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選擇actin內參抗體的一些建議2023/03/07
Actin是一種高度保守的細胞骨架蛋白,廣泛存在于真核細胞中。在細胞內,Actin主要負責維持細胞形態和細胞間通訊、細胞內運輸以及細胞運動等生理過程。Actin分為肌動蛋白和非肌動蛋白兩類。其中,肌動蛋白主要存在于肌肉細胞中,非肌動蛋白則存在于各種類型的細胞中。有多種類型,如β-Actin、γ-Actin、α-Actin等。其中,β-Actin是應用廣泛的Actin內參抗體之一。與其他類型的Actin蛋白相比,β-Actin在各種類型的細胞中表達水平相對穩定,因此其常被用于標準化實驗結果??贵w效
bd流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置2023/02/16
bd流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節分辨率為零。由液流系統、光學與信號轉換測試系統和數字信號處理及放大的計算機系統三大基本結構組成。在對細胞懸液中的單個細胞或其超微結構進行多參數快速自動分析過
多色文獻解讀:神經bing理性疼痛調控新機制2023/02/14
神經bing理性疼痛(neuropathicpain)是由軀體感覺系統的損害或疾病導致的疼痛,患者的臨床癥狀表現為各種各樣的疼痛。它的成因和發病機制都十分復雜,外傷、感染、中毒、腫瘤、神經壓迫、免疫與遺傳等多種病因均可導致神經損傷,發病機制包括外周敏化、中樞敏化、下行抑制系統的失能、脊髓膠質細胞的活化、離子通道的改變等。近日,浙江大學醫學院腦科學與腦醫學學院高志華團隊聯合浙江大學醫學院附屬第一醫院骨科王躍團隊在JCIINSIGHT在線發表題為“mTOR-neuropeptideYsignalin
類器官實操大本營之——HE 染色2023/02/10
1.實驗材料蘇木精染液、伊紅染液、乙醇、二甲苯、中性樹膠、培養瓶、培養皿、眼科鑷、蓋玻片、載玻片、顯微鏡。2.實驗步驟(1)石蠟切片脫蠟至水依次將切片放入二甲苯Ⅰ10min;二甲苯Ⅱ10min;無水乙醇Ⅰ5min;無水乙醇Ⅱ5min;95%酒精5min;90%酒精5min;80%酒精5min;70%酒精5min;蒸餾水洗。(2)蘇木素染細胞核切片入Harris蘇木素染3-8min,自來水洗。(3)伊紅染細胞質切片入伊紅染液中染色1-3min,自來水洗。(4)脫水封片將切片依次放入95%酒精I5m
腫瘤免疫微環境相關研究介紹2023/02/09
在過去的幾個世紀里,腫瘤的概念已經從一個異常增殖細胞的簡單聚集演變成一個高度組織的“器官”。構成腫瘤的各種成分被稱為腫瘤微環境,在腫瘤發生發展過程中,包括但不限于巨噬細胞、DC(dendriticcell)、中性粒細胞、B細胞、T細胞、CAF(tumorassociatedfibroblast)等多種細胞被招募到腫瘤細胞周圍的微環境中,與ECM(extracellularmatrix)等元素共同構成TIME(tumorimmunemicroenvironment)(圖1)。圖1TIME的組成在B
HUVEC細胞培養攻略2023/02/09
臍靜脈內皮細胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells,HUVEC)是臍靜脈的重要構成細胞之一。當進行血管內皮細胞實驗時,通常使用人臍靜脈內皮細胞,而非靜脈內皮細胞或動脈內皮細胞。永生化的HUVEC會通過慢病毒轉染的方式攜帶RFP基因或GFP基因。HUVEC細胞基本信息HUVEC細胞基本信息名稱HUVEC(人臍靜脈內皮細胞)形態上皮樣生長特性貼壁接種密度8.0x103-3.0x104viablecells/cm2傳代比率1:2-1:3圖1HUVEC(人臍靜脈內皮細胞
兩篇文章帶你解析腫瘤免疫微環境相關研究思路2023/02/09
在腫瘤發生發展過程中,包括但不限于巨噬細胞、DC(dendriticcell)、中性粒細胞、B細胞、T細胞、CAF(tumorassociatedfibroblast)等多種細胞被招募到腫瘤細胞周圍的微環境中,與ECM(extracellularmatrix)等元素共同構成腫瘤免疫微環境TIME(tumorimmunemicroenvironment)。在TIME中的多種成分,包括T細胞、B細胞以及分泌的相關因子等雖然對腫瘤起著免疫作用,但還有許多其它成分,如細胞方面包括M2型巨噬細胞、Treg
ATP酶活性檢測試劑盒的作用2023/02/02
ATP酶,又稱為三磷酸腺苷酶,是一類能將三磷酸腺苷(ATP)催化水解為二磷酸腺苷(ADP)和磷酸根離子的酶,這是一個釋放能量的反應。在大多數情況下,能量可以通過傳遞而被用于驅動另一個需要能量的化學反應。這一過程被所有已知的生命形式廣泛利用。鳥苷-5'-三磷酸,(GTP),是一類嘌呤類核苷三磷酸,GTP在信號轉導過程中起的作用,特別是和G蛋白作用時以及在第二信使機制中,在GTP酶的催化作用下,GTP會轉化為GDP(二磷酸鳥苷)。ELIPA驅動蛋白ATP酶檢測試劑盒(酶聯無機磷酸鹽測定),貨號:(C
流式細胞法科普知識大全,你真不一定都懂2023/02/02
流式細胞法是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒(如微球,細菌,小型模式生物等)逐個進行快速定量分析和分選的技術?,F代流式細胞儀產生于上世紀六七十年代。經過近四十年的發展和完善,今天的流式細胞儀已經十分成熟,并被廣泛的運用于從基礎研究到臨床實踐的各個方面,涵蓋了細胞生物學、免疫學、血液學、腫瘤學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗等領域,在各學科中發揮著重要的作用。一種在液流系統中,快速測定單個細胞或細胞器的生物學性質,并把特定的細胞或細胞器從群體中加以分類收集的技術。其特點是通過快速測定庫爾特電阻、
如何快速啟動siRNA文庫篩選2023/01/31
客戶:小刀,我之前有聽過你的siRNA文庫講座,還挺感興趣的客戶:但是我們實驗室沒有高通量儀器,也可以做siRNA文庫篩選嗎?會不會太麻煩?DAO:不會很麻煩,小幾十個基因的篩選排槍就能搞定,高通量儀器一般適用于幾百、幾千或幾萬個基因的篩選客戶:之前沒做過siRNA篩選,我有點怕我操作不好DAO:這個不用太擔心,基本的轉染操作和單基因一致,只不過通常是用96孔細胞板進行,所以需要多些細心和耐心客戶:好的,那我可以試試看客戶:對了,你講座中提到的成品文庫,我看了下,這些基因家族分類和我想要研究的方
PART3 片段化分析儀助力食道癌的綜合性RNA數據集分析2023/01/31
食道癌(EAC)是全球top6高致死率的癌癥。NDB是已知的EAC前體病變,表現為食管的正常鱗狀粘膜被柱狀上皮覆蓋。其可經歷低度異性增生(LGD)到高度異型增生(HGD),最終發展到食道癌。在過去的幾十年里,食道癌的發病率急劇增加。因此迫切的需要更好地了解疾病的病因,并識別新的預后和預測性生物標志物,以提高患病的生存概率。在本文中,科學家們選取了17位不同的食道癌患者的樣本,進行了綜合的數據分析?;谶@些數據,共形成了3種生物型,共有119個表達譜,包括miRNA(51)、mRNA(51)和ci
酶聯/熒光免疫斑點分析技術常見問題解答2023/01/28
一ELISPOT(酶聯免疫斑點技術)/FluoroSpot(熒光免疫斑點技術)的區別ELISPOT(酶聯免疫斑點技術)FluoroSpot(熒光免疫斑點技術)FluoroSpot是在ELISpot基礎上發展起來的,使用熒光檢測代替比色法。熒光免疫斑點實驗結合了ELISpot的靈敏性和同時分析幾種分析物分泌的能力,適用于單次檢測和大規模篩選不同功能特征的細胞群檢測。熒光免疫斑點實驗是將夾心法與熒光標記檢測法相結合,對同一孔內的兩種或多種分析物進行檢測。案例說明:通過ELISpot和FluoroSp
植物提取物抗xin冠病毒研究進展2023/01/18
植物提取物是以植物為原料,通過物理化學等方式獲取植物中的某一種或多種有效成分所形成的天然產品。其應用領域非常廣泛,包括食品、醫藥、飼料、化妝品等,植物提取物的分類見表1。由于天然植物提取物具有較強的生物活性,如免疫調節、抗感染、增強抗氧化能力、抗炎等作用[1],對其藥用價值的探究也一直受到廣大研究者的關注。自2019年xin冠病毒感染爆發以來,目前有效且被人熟知的治療方案仍然很少。國內外在植物提取物預防和治療新冠感染的研究中取得了顯著成果,以下是Absin收集的幾種植物提取物在抑制xin冠病毒效
免疫共沉淀實驗·基礎篇2023/01/18
WhatisCo-IP?Co-IP全稱Co-Immunoprecipitation,中文學名免疫共沉淀,是一種以抗體和抗原識別專一性為基礎,用于研究蛋白質之間相互作用的經典方法。通俗點來說,假設我們需要研究樣品中A蛋白和B蛋白之間是否存在一些相互作用,首先我們通過合適的方法處理樣本,將蛋白提取出來(同時不能破壞蛋白之間的相互作用),然后用預先結合了瓊脂糖珠或者磁珠的A蛋白抗體捕獲樣本中的A蛋白,那么與A蛋白結合的B蛋白也能一起沉淀下來。再將蛋白從珠子上裂解下來,對B蛋白進行檢測,能檢測到,說明B
類器官實操大本營之——固定包埋2023/01/17
1.類器官收集收集生長至較大尺寸類器官:96孔板,生長密度較大時,使用移液槍取半孔以上,清洗1至3遍,洗去大部分基質膠,離心沉淀,棄除大部分上清。2.瓊脂糖固定槽制備(可一次制備一批,溫密閉保存)1)稱量0.2至0.4g瓊脂糖,加入至燒杯或者小試劑瓶內;2)加入10mL左右PBS;3)微波爐高火融化,每隔5s暫停打開,觀察,重復數次至瓊脂糖融化完;4)取約200uL融化瓊脂糖,加入至600uLEP管內;5)在盛有瓊脂糖的小EP管內插入一小PCR管,使瓊脂糖形成一圓尖底凹槽,室溫或者4℃冰箱靜置數
BioXcell常見問題2023/01/17
1.如何正確保存BioXcell抗體產品采用4℃避光無菌條件保存,現配現用。2.BioXcell抗體的保質期有多久采用正確的保存條件,保證1年。3.收到的BioXcell抗體有絮狀物/沉淀,是否正常存在聚集物或沉淀物屬于正?,F象,不會影響抗體的活性??梢栽谑覝叵螺p輕搖晃使其溶解。4.BioXcell抗體的體內使用濃度是多少?每周注射幾次由于不同客戶使用的小鼠品系、動物模型、干預條件、實驗設計等因素均不相同,故廠家和公司不提供適合特定客戶的使用濃度以及注射頻率的方案。常見的使用濃度為10mg/kg
抗體結構分析太復雜?FabRICATOR幫你實現定點酶切!2023/01/17
對于抗體結構的質量定量,完整的結構解析包括整體結構分析、亞基水平分析和肽圖。其中亞基水平分析在抗體藥物結構分析中對設備要求低,分析時間短,且做為QC認證的試驗方法,有助于在研發前期理解抗體結構。Genovis抗體酶切產品可以在亞基水平幫助我們分析抗體片段的結構,獲得均勻的Fab和Fc片段。而目前應用較為廣泛的胰蛋白酶(Trypsin)、木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)切割位點并不專一,特異性差,酶切結果隨時間的變化容易造成抗體未被切開或過度消化的結果。因此,Genovis可以
鐵死亡也能治療肝臟疾???——一文帶你了解其通路機制2023/01/16
肝臟疾病是世界范圍內導致人類死亡的主要原因之一,并且呈逐年上升趨勢。幾種形式的程序性細胞死亡,包括凋亡,壞死和鐵死亡,都與各種肝病的發病機制有關,因此,阻斷肝細胞死亡可以為保護肝臟免受損傷和相關疾病提供一種有效的策略。鐵死亡是一種鐵依賴性的細胞死亡形式,小優之前也整理過幾篇鐵死亡相關文章,從研究歷程到正式命名,再到通路研究,不清楚的同學可以戳鏈接再了解。越來越多的研究表明,鐵死亡在血色素沉著病、酒精相關性肝病(ALD)、丙型肝炎病毒(HCV)感染、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)和肝細胞癌(HCC
三氟甲基分子砌塊助力新藥研發2023/01/12
關鍵詞:分子砌塊;三氟甲基;1,1,1-三氟丙酮;3-溴-1,1,1-三氟丙酮;新藥研發分子砌塊是指一類用于合成具有特定活性的復雜化合物的基本單元。在化學領域,砌塊或分子砌塊是具有活性官能團的虛擬分子片段或真實分子。砌塊可用于特性分子結構“自下而上”的組裝。在新藥研發最開始的階段,研究人員使用并組合不同的分子砌塊對化合物進行篩選和評估,從而找到一個各個方面都符合要求的化合物作為臨床候選物。分子砌塊是整個小分子藥物的最上游,是化學藥物研發的起點,同時也伴隨藥物研發的全流程。新藥研發前期藥企或研究機
如何將自然界中的生物發光現象運用到報告基因中?2023/01/10
對于自然界中的生物發光現象,大家應該都是比較熟悉的,其廣泛存在于海洋生物、微生物和陸生生物中。生物發光現象其實是在生物體內由于生命過程中由化學反應介導的將化學能轉化為光能所產生的,這其中起到主要作用的是一種叫熒光素酶的物質。熒光素酶是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,具代表性的是螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶,被廣泛應用到生物學的報告基因中—一類可以編碼熒光蛋白或酶,從而將看不見的底物轉化為發光或彩色產物的一類基因報告系統,光信號可通過發光檢測儀或CCD相機進行檢測,是生物醫學領域基礎研究的一個
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