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手把手教您識別真菌污染2023/01/10

承接上一期的細菌污染，這一期帶大家了解真菌污染特征。真菌主要分酵母菌、霉菌、蕈。霉菌又主要分為青霉、根霉、曲霉。對于即將踏入細胞房的師弟，師妹，怎樣才能更好地規避師兄、師姐們曾經遇到的細胞污染問題呢？今天帶大家了解主要的真菌污染類型和預防措施吧。真菌污染特征肉眼下的真菌污染特征*真菌污染最短3天才能長出橢圓形的霉斑。*霉斑往往會漂浮在培養液表面，隨著時間逐步擴大。顯微鏡下的真菌污染特征*有些真菌呈類似棉花絮狀的漂浮物。*若是念珠菌會呈卵圓狀，在細胞周邊生長。早期并不會使得培養基變黃變渾濁，但在顯

質粒轉染的技巧2023/01/05

一、質粒轉染原理以及應用質粒轉染是指利用不同的載體物質攜帶質粒DNA通過直接穿膜或膜融合的方法將外源DNA分子導入真核細胞，使外源基因表達，從而針對某個基因和蛋白質的功能進行一系列生物學功能研究的方法。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷深入，DNA轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規實驗工具。質粒轉染在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生命科學前沿研究中，應用越來越廣泛。二、質粒DNA轉染方法質粒DNA導入細胞有多種方法，包括物理介導（電穿孔法、顯微注射和基因槍）、化學

手把手教您識別細菌污染2022/12/28

細胞污染，似乎是每一個細胞培養員過來人的“洗禮”。對于即將踏入細胞房的師弟，師妹，怎樣才能更好地規避師兄、師姐們曾經遇到的細胞污染問題呢？今天帶大家了解主要的細胞污染類型和預防措施吧。細胞污染類型細菌污染*細菌污染時細胞培養基可能在4-6小時呈現混濁。*有時稍加震蕩，變會有很多混濁物漂起。*在顯微鏡下呈黑色細沙狀，或背景有大量黑點。*可能造成細胞增殖緩慢或形態上的改變（多角、多核等），胞質中產生空泡、細胞漂浮凋亡。了解了細菌污染的這些特征以后，同學們又有疑問了，那么細菌菌體能在顯微鏡下看到嗎？答

BD Rhapsody助力解析基底脊索動物合子激活全過程2022/12/20

海洋生物細胞由于其復雜性，在單細胞測序實驗中成功率往往較低。而BDRhapsody憑借其特點和優勢，讓海洋生物單細胞測序研究不再有后顧之憂：1.BDRhapsody大程度降低外界對實驗的干擾基于微孔板原理，細胞自然沉降，不會對細胞產生任何壓力刺激，在細胞裂解后，磁珠捕獲mRNA，之后被磁鐵回收，所有外界干擾因素如化學試劑、金屬離子、酶等都會被清洗，在干凈的反應體系中進行后續反轉錄實驗，大程度降低細胞剪切力、溫度、化學試劑對細胞的刺激和影響，不會改變轉錄本表達特征，真實還原實驗設計預期條件。2.B

質粒轉染試劑的相關知識點介紹2022/12/15

轉染(transfection)是細胞在一定條件下主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。質粒轉染對于哺乳細胞蛋白的表達至關重要，轉染的方法和步驟直接影響著轉染的成功與否。質粒轉染試劑適用于24孔板培養的哺乳動物細胞，所有數量和體積均是按孔計算。大部分細胞系所使用的DNA(μg)與VigeneFection(μg)的比值為1:3或1:4，轉染狀態良好的細胞可獲得高轉染效率、高表達水平和低細胞毒性。轉染步驟：1、貼壁細胞：轉染前一天每孔0.5-2×105個細胞接種于500μl培養基中，在

超聲波細胞破碎機注意事項2022/12/06

超聲波細胞破碎機的工作原理基于超聲波在液體中的空化作用，換能器將電能量通過變幅桿在工具頭頂部液體中產生高強度剪切力，形成高頻的交變水壓強，使空腔膨脹、爆炸將細胞擊碎。此外，由于超聲波在液體中傳播時產生劇烈地擾動作用，使顆粒產生很大的加速度，互相或與器壁碰撞而擊碎或重組。細胞膜將胞內包含物與環境分開，從而保證了細胞的完整性。細胞膜的彈性使細胞能夠適應外界環境滲透壓的急劇變化。在生命科學的研究中，通常要研究細胞內的大分子，如蛋白質、核算、酶等，所以要設法將胞內的物質釋放出來，這個過程叫細胞破碎或裂解

細胞培養如何防止污染？2022/12/05

除特殊要求外，建議培養基中添加雙抗比較好。防止污染這件事，真的沒有那么簡單，常規操作就不贅述了，主要安利一下我們實驗室自己總結的防污染tips：1，從培養箱取放細胞前，用酒精清潔雙手（或手套），盡量縮短開門時間和減少開門次數。培養瓶放入培養箱前，用酒精消毒表面，并稍等至酒精揮發后再放入，以免培養箱內滯留過多乙醇蒸氣。2，操作的時候防護服、口罩、手套缺一不可。操作前，準備好所有實驗所需物品，以減少走動，物品需有序擺放在超凈臺觸手可及的地方，同時空留足夠操作空間。3，操作時，試劑不用盡量及時蓋上蓋子

組織病理——一站式解決方案2022/11/29

病理學是研究人體疾病發生的原因、發生機制、發展規律以及疾病過程中機體的形態結構、功能代謝變化和病變轉歸的一門基礎醫學科學。在科學研究中，對病理的研究能夠幫助分析和闡明。①病因學，即疾病發生的原因，包括內因、外因及其相互關系；②發病學，即在病因作用下導致疾病發生、發展的具體環節、機制和過程；③病理變化或病變，即在疾病發生發展過程中，機體的功能代謝和形態結構變化以及這些變化與臨床表現（癥狀和體征）之間的關系——臨床病理聯系；④疾病的轉歸和結局。組織學觀察是將病變組織制成厚約數微米的切片，經不同方法染

助力核酸藥物開發“黑馬”—環狀RNA2022/11/25

一、環狀RNA的研究背景隨著新guan病毒的全球流行，針對性的mRNA疫苗在多種疫苗類型中脫穎而出。與此同時，諸如自復制mRNA和circRNA等新型技術路線也逐漸走入大眾視野，隨著資本的大量涌入，circRNA技術迅速發展起來。環狀RNA（circRNA）是一類特殊的非編碼RNA分子，circRNA分子呈封閉環狀結構，不受RNA外切酶影響，表達更穩定，不易降解。circRNA不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴，通過外顯子環化或內含子環化，將3'和5'末端連接起來形成完整的環形結構，

siRNA——你不知道的那些小奧秘2022/11/24

小刀最近在準備11.3下午的講座（名稱：siRNA實驗操作小技巧），這不整理不知道，一整理嚇一跳。那句話怎么說來著？越是看習慣了的東西，便越是習焉不察，美丑都難看出。你別看siRNA的身材小，其中蘊含的奧秘可一點也不少。那么，我們就一起走進siRNA，深度探討19bp微觀世界里的那些事兒。我們知道脫靶效應自2003年發表以來，一直是限制siRNA特異性的關鍵因素，影響其在功能基因組學和疾病治療領域的應用。因此，如何使siRNA在保持特異性的同時減少脫靶效應，是各大廠商共同努力的目標。Dharma

通用型CAR-T細胞療法治療CD7陽性腫瘤表現令人驚喜2022/11/24

這類通用型CAR-T細胞治療1期臨床試驗結果于2022年9月23日發表于CellResearch期刊，論文作者為浙江大學醫學院附屬第一醫院黃河教授、胡永仙教授、王東睿研究員、北恒生物任江濤博士。該研究shou次報道健康供體來源的CD7靶向異基因CAR-T細胞治療CD7+血液惡性腫瘤的I期臨床試驗報告。研究結果證明了RD13-01異基因CAR-T細胞治療CD7+腫瘤的令人鼓舞的安全性和有效性。T細胞惡性腫瘤是高度侵襲性的血液腫瘤，通常與預后不良有關。特別是復發性或難治性（r/r）疾病，其5年總生存

一種基于雜交和分子標簽的新型錯誤矯正測序（HYTEC-seq）2022/11/24

循環腫瘤DNA（ctDNA）分析已成為一種重要的臨床有用的癌癥診斷和治療監測工具。然而，ctDNA檢測由于DNA濃度低，所以在技術上難度大且實驗情況復雜。這篇文章中，科學家們描述了其在IonTorrent測序平臺上新開發的一種高靈敏度的ctDNA檢測方法，被稱之為基于雜交和標簽技術的錯誤校正測序（HYTEC-seq）。該方法結合了雜交捕獲和分子標簽，以及新型variantcallerPlasmaMutationDetector2以消除背景錯誤。科研家闡述了使用已知突變的對照樣本用HYTEC-se

小愛手把手教學—3D類器官培養及研究思路2022/11/22

01你聽說過類器官嗎？我們在國外生化類科幻大片中經常看到人造人，在制作改造人之前他們會做一些人造器官，所有我們經常會看到一些心臟或者其他器官在培養液中的畫面，當然這些都是人們的腦洞所想象出的科幻電影。但是我們目前的科研水平已經實現了3D類器官的構建。2009年，荷蘭Hubrecht研究所的HansClevers團隊成功的將成體干細胞培養成為小腸的隱窩和絨毛結構，開啟了類器官發展的新篇章。下面小愛繼續給您介紹什么是類器官？HansClevers-小腸干細胞markerLgr5發現者02什么是類器官

中樞神經系統衰老的十種研究思路2022/11/22

衰老是生命過程的必經階段，而中樞神經系統是人體受衰老影響最大的系統之一。衰老大腦中新生的神經細胞數量逐漸減少，免疫炎癥增加、大腦功能減退。但目前還不清楚中樞神經系統衰老的機制。小優博士為大家整理了10篇近期發表的神經系統衰老相關的高分文章，希望能夠幫助到大家。1)Gamma-H2AXupregulationcausedbyWip1deficiencyincreasesdepression-relatedcellularsenescenceinhippocampus研究背景：1.Wip1敲除導致小

慢病毒純化神器——Nereus LentiHERO技術2022/11/22

慢病毒載體由于能夠在分裂以及非分裂細胞中穩定的整合基因組，因此成為基因以及細胞治療中的一種有效工具。在過去的十幾年中慢病毒的生產以及純化技術已經獲得了顯著的進步，然而隨著市場規模的擴大，對慢病毒純化的通量以及純度的要求日益增長。對于各大企業來說，構建具有成本效益的生產以及純化平臺具有十分重要的意義。但是目前慢病毒載體的純化方法和經驗多是由抗體藥的純化方法和經驗發展過來的，然而LVV的衣殼直徑較大，在80-100nm左右，比一般的病毒大得多，它的大小也在純化方面帶來了挑戰，所以標準的基于樹脂的分離

蛋白質磷酸化是調節蛋白質功能的一種常見的重要機制2022/11/18

蛋白質磷酸化是敏感而可逆地調節蛋白質功能的一種常見和重要的機制，是調節細胞增值的基礎。很多多肽生長因子(血小板來源的生長因子和表皮生長因子)和細胞因子(白細胞介素-2、集落刺激因子-2和y-干擾素)在與其受體結合后均激發磷酸化作用，而這些被誘導的磷酸化反過來激活細胞質內的蛋白激酶如raf、MEK和MAP。此外，在所以有核生物中，細胞周期中G1/S期和G2/M期的轉換均受依賴細胞周期蛋白的蛋白激酶(CDK)的調節。磷酸化作用也控制著分化和發育，如果蠅視網膜的R7細胞和秀麗新小桿線蟲(Caenorh

細胞培養一般方法有哪些2022/11/09

細胞培養首先分為原代培養和傳代培養.一、原代培養需要從組織中消化、分離、純化出單細胞,然后繼續進行傳代、凍存；二、傳代培養首*行細胞復蘇:1.應遵守慢凍快融的原則.先將水溫鍋調至37-38度,取出凍存的細胞迅速放入后交細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化.2.在無菌臺內將培養基加入培養瓶內,然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞,置培養瓶內輕輕搖晃,使細胞均勻后置培養箱內培養,24h后換液；也可復蘇當時離心（1000rpm5min左右）后,培養基重懸培養,適時換液.細胞傳代:1.貼壁細胞:對于貼壁細胞應先

細胞培養dmso目的與用途有哪些，細胞培養2022/11/08

細胞培養dmso目的與用途：1、科學研究藥物研究開發，如新藥篩選，疫苗、基因工程藥物、細胞工程藥物、研究與開發、單克隆抗體制備等。基礎研究，如藥物作用機理、基因功能、疾病發生機理等研究。2、生物制藥疫苗生產：如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)，多肽疫苗(腫瘤疫苗)等。基因工程藥物生產：如EPO等。抗體藥物、基因治療藥物生產。細胞工程藥物生產：生物細胞內的一些生物活性多肽，生物活性物質等。利用細胞法體外測定生物活性物質的活性；并預測其在體內的藥效和替代體內法檢測其成品的生物活性。擴展資料細

腸道菌群可抑制動脈粥樣硬化？！竟是因為這個代謝物……2022/11/07

血管（bloodvessels）是將血液輸送到全身的通道，其主要功能是將血液運輸到身體的各個組織和器官中，血液為它們提供了維持生物功能所需要的氧氣以及營養物質。同時，血管也能將廢棄物和二氧化碳從身體的組織和器官中帶走。當血管發生病變時，人們的身體健康將會收到極大威脅。因此，揭示血管病發生發展的機制，對臨床醫學的發展有重大意義。2020年，科學家們就揭示了腸道微生物群、膳食營養和宿主之間的互作可能會影響動脈粥樣硬化性心血管疾病（atheroscleroticcardiovasculardiseas

bd流式細胞儀的工作原理你清楚么？2022/11/07

bd流式細胞儀的工作原理是：將待測細胞經特異性熒光染料染色后放入樣品管中，在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單列由流動室的噴嘴噴出，形成細胞柱。通常以激光作為發光源。經過聚焦整形后的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在激光束的照射下，產生散射光和激發熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測，這種信號基本上反映了細胞體積的大小；熒光信號的接受方向與激光束垂直，經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不