超速血液總 RNA 提取試劑盒

FlashPure Blood Total RNA Kit 

超速全血（液體樣本）總RNA提取試劑盒  

目錄號：91213

產(chǎn)品內(nèi)容

自備試劑

無水乙醇

保存條件

室溫（15 ~ 25℃）

產(chǎn)品簡介

采用 RNAzol LS Reagent與吸附柱相結(jié)合提取總RNA的方法，簡化了RNA 提取的流程，與經(jīng)典的異丙醇沉淀法相比，柱式純化方法簡便，去除雜質(zhì)能力更強(qiáng)，大大提高了RNA的純度。該試劑盒可從各種血液、血漿、血清中快速提取總RNA，每個(gè)吸附柱每次可處理0.25ml液體樣本或5~10×10⁶細(xì)胞。提取的總RNA沒有DNA和蛋白的污染，可用于Northern Blot、Dot Blot、PolyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析和分子克隆。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. RNA 純度更高；

2. 應(yīng)用廣泛：可提取多種不同的樣本材料。

注意事項(xiàng)

1. 血液 RNA 的常溫保存/運(yùn)輸/提取的簡易方案：

臨床取樣：在臨床上，使用抗凝管采血后，取250μl新鮮血液，加入 750μl的裂解液RLS(RNAzol LS Reagent，Cat#91012-100)，用移液槍反復(fù)抽打并振蕩混勻，在室溫裂解5~10min，直至血細(xì)胞充分發(fā)生裂解。

保存：經(jīng)裂解后的血液可在-20℃下保存 1-2 個(gè)月，在-70℃保存半年。

運(yùn)輸：可冰袋 4℃運(yùn)輸 1 天，干冰-20℃運(yùn)輸一周。

提取：后續(xù) RNA 提取按 R213（或 R012）的說明書進(jìn)行。

2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟（所有離心步驟均可在室溫下進(jìn)行，不影響提取效果！）

操作前，請先在漂洗液 RW、70%乙醇中加入無水乙醇，詳見瓶身的標(biāo)簽。

1. 每250μl液體樣品 (血清、血漿、腦脊液、凍存血等)，加入 750 μl裂解液 RLS，用移液器反復(fù)抽打幾次，然后劇烈渦旋震蕩，充分混勻。

（液體樣品和裂解液 RLS 的終體積比總是 1：3）

2. 將勻漿樣品在室溫下放置 5 min，使得核酸蛋白復(fù)合物wan全分離。

3. 加入 200μl 氯仿，劇烈振蕩 15 秒，并在室溫下放置 2-3 分鐘。

4. 12,000 rpm 離心 10 min。樣品會分成三層：下層有機(jī)相，中間層和上層無色的水相，RNA 存在于水相中。水相層的容量大約為所加 RLS體積的 70%，轉(zhuǎn)移上清至一個(gè)新的離心管中，進(jìn)行下一步操作。

5. 向上清中加入等體積 70％乙醇（檢查是否已加入乙醇），顛倒混勻。

6. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中，12,000rpm 離心 1 min，倒棄濾液。重復(fù)此過程，直到溶液全部上柱。

7. 加入 500μl 去蛋白液 RE，12,000 rpm 離心 1 min，倒棄濾液。

8. 加入 500 μl 漂洗液 RW，12,000 rpm 離心 1 min，倒棄濾液。

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入無水乙醇，用后立即蓋緊瓶蓋，以防乙醇揮發(fā)）

9. 可選步驟：重復(fù)步驟 8 一次。

10. 將RNA吸附柱放回空收集管中，12,000 rpm 離心2min，去除乙醇。

11. 取出RNA吸附柱，放入一個(gè)新的 RNase-Free 1.5 ml 離心管中，向吸附膜的中央加入 30~50 μl 的RNase-Free ddH2O，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min。

（注意：如要要提高 RNA 濃度，可將得到的溶液重新加到吸附柱中，室溫放置2 min，再次離心收集）

12. 提取的 RNA，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)，或于-70℃保存，以免降解。

相關(guān)產(chǎn)品： 

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

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