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當(dāng)前位置：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司>>技術(shù)文章

營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的應(yīng)用說(shuō)明2023/12/14: 在理論研究中，營(yíng)養(yǎng)缺陷型不僅被廣泛應(yīng)用于闡明微生物代謝途徑上，而且在遺傳學(xué)的研究中具有特殊的地位。在轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、原生質(zhì)體融合、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子等遺傳學(xué)研究中，營(yíng)養(yǎng)缺陷型是常用的標(biāo)菌種。此外，營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株還是研究基因的結(jié)構(gòu)與功能常用的材料。在生產(chǎn)實(shí)踐中，營(yíng)養(yǎng)缺陷型可以用來(lái)切斷代謝途徑，以積累中間代謝產(chǎn)物；也可以阻斷某一分支代謝途徑，從而積累具有共同前體的另一分支代謝產(chǎn)物；營(yíng)養(yǎng)缺陷型還能解除代謝的反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，以積累合成代謝中某一末端產(chǎn)物或者中間產(chǎn)物；也可將營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株作為生產(chǎn)菌株雜交、重組育種的

掃描電鏡的使用注意事項(xiàng)！2023/12/14: 掃描電鏡通過(guò)用聚焦電子束掃描樣品的表面而產(chǎn)生樣品表面的圖像。它由電子光學(xué)系統(tǒng)、信號(hào)收集及顯示系統(tǒng)、真空系統(tǒng)和電源系統(tǒng)組成，應(yīng)用于生物、醫(yī)學(xué)、材料和化學(xué)等領(lǐng)域。掃描電鏡作為一種精密儀器，為延長(zhǎng)其使用壽命，在使用時(shí)應(yīng)需要以下事項(xiàng)：1、將試樣置于載物臺(tái)墊片，調(diào)整粗/微調(diào)旋鈕進(jìn)行調(diào)焦，直到觀察到的圖像清晰為止；2、調(diào)整載物臺(tái)位置，找到要觀察的視野，進(jìn)行分析；3、掃描電鏡調(diào)焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡；4、當(dāng)載物臺(tái)墊片圓孔中心的位置遠(yuǎn)離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡，以免劃傷物鏡；5、在做切換動(dòng)作

牛血清白蛋白的分類(lèi)以及作用說(shuō)明2023/12/13: 牛血清白蛋白是血液中的主要成分（38g/100ml），分子量68kD，等電點(diǎn)4.8，含氮量16%，含糖量0.08%，僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半胱an酸組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽(yáng)離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。牛血清蛋白溶液可以作為測(cè)量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。一般買(mǎi)回來(lái)的牛血清蛋白是細(xì)小片狀的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以鐵為基本原料。1、特純級(jí)牛血清蛋白用途：用作酶標(biāo)、金標(biāo)等診斷試劑的封閉劑，生化試驗(yàn)等

【免疫熒光】血清封閉的選擇看這篇就夠啦！2023/12/13: 封閉血清用于免疫組化（IHC）或者免疫熒光（IF）實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉，降低背景，減少假陽(yáng)性。遠(yuǎn)慕提供多種屬封閉血清，液體形式產(chǎn)品（原液），無(wú)需溶解，用PBS直接稀釋即可使用，低防腐劑含量，對(duì)細(xì)胞和蛋白的毒性/影響更小。什么是封閉血清封閉血清就是將養(yǎng)殖的非免疫的正常動(dòng)物采血，然后不加抗凝劑，血液凝固，血kuai收縮，析出的淡黃色液體。經(jīng)過(guò)特殊工藝處理后的血清，特別適在各類(lèi)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中用于封閉處理，比如：IHC、IF/ICC、ELISA等。血清與血漿的區(qū)別血漿是指血液中除去細(xì)胞成分后剩下的淡黃色或無(wú)色

PCR生物實(shí)驗(yàn)常用的染料介紹2023/12/12: 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的染料主要涉及到核酸染料和蛋白質(zhì)染料，核酸染料主要有EB（溴化乙錠,高致癌性），goldview,sybrgreen（實(shí)時(shí)定量PCR時(shí)常用染料）這些染料可以和核酸雙鏈分子特異性結(jié)合發(fā)出強(qiáng)熒光而被檢測(cè)到，蛋白質(zhì)染料最chang用的是考馬斯亮藍(lán)R-250，硝酸銀，其中硝酸銀有時(shí)也用于核酸染色。染料分為天然染料和人工染料兩種。天然染料有胭脂蟲(chóng)紅、地衣素、石蕊和蘇木素等，它們多從植物體中提取得到，其成分復(fù)雜，有些至今還未搞清楚。目前主要采用人工染料，也稱(chēng)煤焦油染料，多從煤焦油中提取獲得，是

檢測(cè)過(guò)程的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)2023/12/12: 檢測(cè)過(guò)程的質(zhì)量控制1.確保樣品在接收、制備和測(cè)試過(guò)程中確保樣品的原始特性，未受污染或變質(zhì)。2.測(cè)試前應(yīng)做好以下各項(xiàng)準(zhǔn)備工作：①核對(duì)樣品標(biāo)簽、檢測(cè)項(xiàng)目和相應(yīng)的檢測(cè)方法；②按檢測(cè)方法的要求準(zhǔn)備儀器和器具。使用符合分析要求的藥品。按檢測(cè)方法配制試劑。標(biāo)準(zhǔn)溶液等；③檢查檢測(cè)現(xiàn)場(chǎng)清潔。溫度等可能影響測(cè)試質(zhì)量的環(huán)境條件；④選用規(guī)范的原始記錄表。3.檢測(cè)過(guò)程需按檢測(cè)方法和作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作。當(dāng)測(cè)試過(guò)程出現(xiàn)異常現(xiàn)象應(yīng)詳細(xì)記錄。并及時(shí)采取措施處置。4.需要時(shí)，隨同樣品測(cè)試做空白試驗(yàn)、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)試和控制樣品的回收率試驗(yàn)

分光光度法基本原理及應(yīng)用說(shuō)明2023/12/11: 分光光度的概述吸光光度法定義:基于物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收而建立的分析方法稱(chēng)為吸光光度法，包括紫外可見(jiàn)分光光度法及紅外光譜法等。紫外可見(jiàn)分光光度法所用的光譜區(qū)域?yàn)?00~780nm，其中紫外分光光度法為200~400nm，可見(jiàn)分光光度法為400~780nm。紅外光譜法為2.5~1000um。分光光度法概述分光光度法的發(fā)展歷程:最初人們發(fā)現(xiàn)很多物質(zhì)都具有顏色，例如Mn04-為紫紅色，F(xiàn)e3+為黃色，當(dāng)含有這些物質(zhì)的溶液濃度改變時(shí)，溶液顏色的深淺度也就隨著改變。溶液越濃顏色越深，溶液越稀顏色越淺，因此利

試劑配制操作及注意事項(xiàng)匯總來(lái)了！2023/12/11: 配制試劑的順序1.計(jì)算2.稱(chēng)量或量取3.溶解4.轉(zhuǎn)移5.洗滌6.定容7.搖勻8.轉(zhuǎn)移至試劑瓶中9.標(biāo)簽注意事項(xiàng)1.溶液應(yīng)用純化水配制，容器應(yīng)用純化水洗三次以上。2.溶液要用帶塞(蓋)的試劑瓶盛裝。3.配制好的試劑應(yīng)及時(shí)盛入試劑瓶，試劑瓶上必須有標(biāo)明名稱(chēng)、濃度和配制人,配制日期，復(fù)核人，復(fù)核日期的標(biāo)簽，有效期限。4.溶液儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)注意不要使溶液變質(zhì)。5.配制硫酸、磷酸、硝酸、鹽酸等溶液時(shí)，應(yīng)把酸倒入水中。6.防護(hù)措施:不能用手直接接觸腐蝕性及有ju毒的溶液，劇毒廢液應(yīng)作解毒處理，不可直接倒入下水道。

科研實(shí)驗(yàn)選擇原代細(xì)胞還是細(xì)胞株？2023/12/08: 原代細(xì)胞：從體內(nèi)直接分離的細(xì)胞。功能、代謝、形態(tài)類(lèi)似體內(nèi)細(xì)胞的特點(diǎn)，因此原代細(xì)胞適用于分析單個(gè)細(xì)胞形態(tài)、代謝、功能。原代細(xì)胞的缺點(diǎn)是：細(xì)胞均一性差，因?yàn)閺奶囟ńM織取下來(lái)的原代細(xì)胞可能處于不同的發(fā)育時(shí)期。增殖能力差、培養(yǎng)時(shí)間受限、轉(zhuǎn)染效率低。原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：①組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。②消化培養(yǎng)法③懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

細(xì)胞株保存也可以很簡(jiǎn)單2023/12/08: 1.紫外消毒30min后關(guān)閉紫外燈，開(kāi)啟超凈臺(tái)正常工作狀態(tài)，用酒精消毒操作者的雙手。2.將所需的培養(yǎng)基，胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺(tái)面內(nèi)，點(diǎn)燃酒精燈，將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后，再將瓶口對(duì)準(zhǔn)在酒精燈上消毒2-3次，旋開(kāi)瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋，分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上，瓶口對(duì)準(zhǔn)酒精燈，且放在距離酒精燈最近的位置，瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。3.將培養(yǎng)瓶瓶口在酒精燈上消毒2-3次，旋開(kāi)后分別再次消毒瓶口和瓶蓋2-3次，蓋放于酒精燈右側(cè)后將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液懸空倒進(jìn)污缸

一些霉菌菌落的特征基本介紹2023/12/07: A、形態(tài)較大，質(zhì)地疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或松或緊的形狀。B、菌落和培養(yǎng)基間的連接緊密，不易挑取，菌落正面與反面的顏色、構(gòu)造，以及邊緣與中心的顏色、構(gòu)造常不一致。C、霉菌的菌絲有營(yíng)養(yǎng)菌絲和氣生菌絲的分化，而氣生菌絲沒(méi)有毛細(xì)管水，故它們的菌落必然與細(xì)菌或酵母菌的不同，較接近放線菌。霉菌的菌絲。構(gòu)成霉菌營(yíng)養(yǎng)體的基本單位是菌絲。菌絲是一種管狀的細(xì)絲，把它放在顯微鏡下觀察，很像一根透明膠管，它的直徑一般為3～10微米，比細(xì)菌和放線菌的細(xì)胞約粗幾倍到幾十倍。菌絲可伸長(zhǎng)并產(chǎn)生分枝，許多分枝的菌絲相互交織

原代培養(yǎng)技術(shù)的注意事項(xiàng)2023/12/07: 一、注意污染1、嚴(yán)格進(jìn)行動(dòng)物皮膚消毒，使用三套器械取材。新生動(dòng)物皮膚先用2%碘酒液消毒，成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。2、嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，防止細(xì)菌、霉菌、支原體污染，避免化學(xué)物質(zhì)污染。自取材開(kāi)始，保持所有組織細(xì)胞處于無(wú)菌條件。細(xì)胞計(jì)數(shù)可在有菌環(huán)境中進(jìn)行。3、吸取液體前，瓶口和吸管進(jìn)行火焰消毒；吸取液體時(shí)，避免瓶口和吸管碰撞。4、離心管入臺(tái)前，管口、管壁應(yīng)消毒。5、實(shí)驗(yàn)者離開(kāi)超凈臺(tái)時(shí)，要隨時(shí)用肘部關(guān)閉工作窗。6、使用過(guò)的器械用酒精棉球擦去血污后，移入另一個(gè)器皿中繼續(xù)消毒，在浸

做微生物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備步驟2023/12/06: 1、準(zhǔn)備工作，培養(yǎng)基的配制及滅菌（121-126度滅30分鐘高壓蒸汽式滅菌），玻璃器皿的滅菌（170度滅2小時(shí)干熱滅菌，也可用濕熱滅菌）若量大可加長(zhǎng)滅菌時(shí)間。2、微生物實(shí)驗(yàn)室及無(wú)菌操作臺(tái)開(kāi)紫外燈滅菌1小時(shí)，關(guān)閉后至少半小時(shí)才進(jìn)入無(wú)菌室，我們一般1小時(shí)后才進(jìn)去。因?yàn)樽贤鉄粽丈浜笥袣埩簟?、進(jìn)入無(wú)菌室要穿戴專(zhuān)門(mén)的衣服，帽子，鞋子，口罩，手套。在接觸無(wú)菌的東西都要用75%的酒精噴灑或涂抹，如果是藥品就要求更嚴(yán)。4、實(shí)驗(yàn)完后，把平皿倒置放入設(shè)定好溫度的培養(yǎng)箱內(nèi)，并在要的時(shí)間觀察記錄。5、完后無(wú)菌室可以打

細(xì)菌的革蘭氏染色和特殊形態(tài)觀察2023/12/06: 染色方法：革蘭染色法是細(xì)菌學(xué)中最guang泛使用的一種鑒別染色法。1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立。方法是先將細(xì)菌用結(jié)晶紫染色，加媒染劑（增加染料和細(xì)胞的親和力）后，用脫色劑（酒精或丙酮）脫色，再用復(fù)染劑染色。如果細(xì)菌不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽(yáng)性菌(G＋)；如被脫色，而染上復(fù)染液的顏色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細(xì)胞壁的細(xì)菌分為兩大類(lèi)：革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌。單染色法：只能觀察微生物的大小、形狀、和細(xì)胞排列狀況，但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法：用兩種或兩種以

PCR實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)2023/12/05: 實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)：盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽(yáng)性反應(yīng)的原因，樣品間的交叉污染也是原因之一。因此，不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真，在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意：(1)戴一次性手套，若不小心濺上反應(yīng)液，立即更換手套。(2)使用一次性吸頭，嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用，吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中，避免氣溶膠的污染。(3)避免反應(yīng)液飛濺，打開(kāi)反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況，開(kāi)蓋前稍離心收集液體于管底。若不小心濺到手套或桌面上，應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。(4)操作多份樣品時(shí)，制備反

PCR之引物設(shè)計(jì)遵守原則2023/12/05: 熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種技術(shù)手段。它通過(guò)在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來(lái)顯示DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對(duì)PCR過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的。并且可以通過(guò)數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來(lái)源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，我們需要注意諸多細(xì)節(jié)，謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn)，拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)表高分文章，走上人生dian峰呢？引物設(shè)計(jì)的好壞，關(guān)乎著擴(kuò)增效率的高低、產(chǎn)物特異性的與否。

一些特殊培養(yǎng)基的屬性介紹2023/12/04: RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。MEM也稱(chēng)最di必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡(jiǎn)單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類(lèi)型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞

懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項(xiàng)2023/12/04: 懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動(dòng)或搖動(dòng)的液體培養(yǎng)基里，培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團(tuán)的組織培養(yǎng)系統(tǒng)，下面一起來(lái)了解一下懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟與注意事項(xiàng)。一、步驟1.將準(zhǔn)備好的凍存細(xì)胞放入37℃水浴中解凍。2.用70%乙醇對(duì)頂端進(jìn)行消毒，用吸管將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有5mlwan全MEM-10培養(yǎng)基的25cm2組織培養(yǎng)瓶中，輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)瓶中，放入5%CO2加濕培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。3.將培養(yǎng)基吸出，用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆蓋細(xì)胞，消化30~40s。4.加入10ml旋轉(zhuǎn)瓶wan全

流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)步驟2023/12/01: 流式細(xì)胞術(shù)（flowcytometry，F(xiàn)CM）是一種綜合應(yīng)用光學(xué)、機(jī)械學(xué)、流體力學(xué)、電子計(jì)算機(jī)、細(xì)胞生物學(xué)、分子免疫學(xué)等學(xué)科技術(shù)，使被測(cè)溶液流經(jīng)測(cè)量區(qū)域，并逐一檢測(cè)其中每一個(gè)細(xì)胞的物理和化學(xué)特性，從而對(duì)高速流動(dòng)的細(xì)胞或亞細(xì)胞進(jìn)行快速定量測(cè)定和分析的方法。首先，待測(cè)細(xì)胞經(jīng)處理或染色后被壓人流動(dòng)室，與此同時(shí)，不含細(xì)胞的緩沖液在高壓下從鞘液管?chē)姵觯室汗苋丝诜较蚺c待測(cè)樣品流成一定角度，這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動(dòng)，組成一個(gè)圓形的流束，待測(cè)細(xì)胞在包繞下單行排列，依次通過(guò)檢測(cè)區(qū)域。在激光束的照射下產(chǎn)

如何祛除細(xì)胞上的支原體污染？2023/12/01: 細(xì)胞培養(yǎng)怕支原體污染，但有一些被污染的細(xì)胞不能被丟棄時(shí)該怎么辦？接下來(lái)一起來(lái)了解一下吧如何祛除細(xì)胞上的支原體污染？據(jù)研究表明，約98％的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。支原體直徑約180~350nm，比細(xì)胞小很多，經(jīng)低速離心與細(xì)胞分離。通過(guò)反復(fù)懸浮沖洗、離心，加上使用我們的ZellShield，即可在細(xì)胞培養(yǎng)四代以?xún)?nèi)有效地祛除支原體。什么是ZellShield？ZellShield是一種鏈青霉素類(lèi)復(fù)合抗生素，對(duì)細(xì)胞影響很小，可以有效抑制細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體、細(xì)菌、霉菌、真菌等微生物增殖。普通的鏈霉

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