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懸浮細(xì)胞換液問題解答2024/02/27: 一、細(xì)胞換液是否需要用PBS清洗我們知道，在“貼壁細(xì)胞傳代”中，培養(yǎng)基中的血清會抑制胰酶的活性，影響消化的效果，所以必須要PBS的清洗。但對于細(xì)胞換液，尚未查到有資料明確說明是否需要PBS清洗。我覺得這里應(yīng)該根據(jù)細(xì)胞的具體情況考慮：1.若細(xì)胞比較“嬌氣”或生長狀態(tài)不是特別好時，建議還是不要用PBS清洗。一方面，細(xì)胞貼壁的狀態(tài)可能不是很牢固，PBS的沖洗會破壞細(xì)胞的貼壁狀態(tài)；另一方面，PBS可能會洗掉細(xì)胞分泌的一些生長因子，這同樣不利于細(xì)胞狀態(tài)的調(diào)整。如果一定要洗，可以緩慢清洗，減少對細(xì)胞的傷害2

標(biāo)準(zhǔn)溶液與試液的配制及標(biāo)定方法2024/02/26: 1.目的管理好標(biāo)準(zhǔn)溶液及試液，保證化驗正常運(yùn)行。2.適用范圍適用于標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制、標(biāo)定及試液的配制。3.責(zé)任者化驗員應(yīng)嚴(yán)格遵照該操作規(guī)程,QC主管負(fù)責(zé)監(jiān)督本規(guī)程的實施。4.定義USP美國藥典CP中國藥典VS標(biāo)準(zhǔn)溶液6.規(guī)程6.1.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)定如無特殊規(guī)定，應(yīng)嚴(yán)格按照USP25或CP2000規(guī)定的方法操作。6.2.每批標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)有明確的批號，其批號建立規(guī)則是VSxxxx(年)xx(月)xx(順序號)例：2000年5月標(biāo)定的第1批標(biāo)準(zhǔn)溶液，其批號VS20000501。6.3.使用專用的標(biāo)準(zhǔn)溶

培養(yǎng)基上分別生長的一些細(xì)菌介紹2024/02/23: 1、光滑型菌落(S型菌落)：菌落表面光滑、濕潤、邊緣整齊，新分離的細(xì)菌大多呈光滑型菌落。2、粗糙型菌落(R型菌落)：菌落表面粗糙、干燥、呈皺紋或顆粒狀，邊緣大多不整齊。R型菌落多為S型細(xì)菌變異失去菌體表面多糖或蛋白質(zhì)形成。R型細(xì)菌抗原不完整，毒力和抗吞噬能力都比S型細(xì)菌弱。但也有少數(shù)細(xì)菌新分離的毒力株就是R型，如炭疽孢桿菌、結(jié)核分枝菌等。3、粘液型菌落(M型菌落)：菌落粘稠、有光澤、似水珠樣。多見于厚莢膜或豐富粘液層的細(xì)菌、結(jié)核桿菌等。細(xì)菌的物理性狀1．光學(xué)性質(zhì)細(xì)菌為半透明體。當(dāng)光線照射至細(xì)菌，

培養(yǎng)液pH下降很快的可能原因分析2024/02/22: 通常細(xì)胞生長得非?？鞎r，pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。（1）按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度，2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應(yīng)CO2濃度為5％到10％。（2）改用不依賴CO2培養(yǎng)液。（3）松開瓶蓋1/4圈。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度。（4）在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于E

細(xì)胞培養(yǎng)時各種添加物的具體作用說明2024/02/21: 細(xì)胞培養(yǎng)所需添加物通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時需要加入血清，以維持細(xì)胞的生長和存活。而除了血清之外，部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1subclone14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細(xì)胞加入量會有差異，需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。胰島素作用廣泛，包括調(diào)節(jié)脂肪和蛋白質(zhì)的代謝以及促進(jìn)細(xì)胞生長等。胰島素功能的發(fā)揮源于其對細(xì)胞的作用，進(jìn)而引起組織乃至機(jī)體的整體反應(yīng)。一般可將胰島素在細(xì)胞水平的

菌落PCR原理、實驗步驟、注意事項2024/02/01: 常規(guī)的PCR擴(kuò)增需要進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、質(zhì)粒制備等多步操作后才能進(jìn)行基因擴(kuò)增,操作繁瑣耗時較長,同時在反復(fù)的操作中DNA量損失也較大,產(chǎn)率較低。在1989年GussowClackson3建立了菌落PCR(colonyPCR)法,菌落PR與我們通常的普通DNA的PCR的不同在于,直接以單個菌作為模板。是一種可以快速鑒定菌落是否為含目的質(zhì)粒的陽性菌落,操作簡單,快速,在轉(zhuǎn)化鑒定中較常用。PCR原理常規(guī)的PCR需要專門制備DNA模板,面菌落PCR可直接以單個菌落作為模板,用無菌牙挑取單個菌落到TE級沖液中,

大腸桿菌DH5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞使用說明書2024/01/31: 中文名稱：大腸桿菌DH5α化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞英文名稱：E.coliDH5αChemicalCompetentCell產(chǎn)品規(guī)格：0.1mL*10本產(chǎn)品是采用大腸桿菌DH5α菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。DH5α是一種常用于質(zhì)?？寺〉木?，其φ80lacZΔM15基因產(chǎn)物可與載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實現(xiàn)α互補(bǔ)，可用于藍(lán)白斑篩選。recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。使用pUC19質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率不低于107，適用于高效的質(zhì)粒DN

牛血清白蛋白的提取方法2024/01/30: 胎牛血清白蛋白（BSA），又稱第五組分，是牛血清中的一種白蛋白，包含583個氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用，例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性，能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱，表面張力及化學(xué)因素引起的變性。是胎牛血清中的一種球蛋白，一般獲取胎牛血清白蛋白，常常運(yùn)用的方法是加熱法。下面一起來看

遠(yuǎn)慕人ELISA試劑盒文獻(xiàn)引用資訊2024/01/26: Effectsofthetripletherapyofcarnosineglycoside,edaravone,ａndXueshuantonginhemorrhagiccerebralinfarction影響肌肽糖苷的三聯(lián)療法,藥物不良反應(yīng),Xueshuantong在出血性腦梗塞IF：2.2摘要目的:本研究旨在評估的影響肌肉氨基酸和肽的三聯(lián)療法,核苷(MAAPN),藥物不良反應(yīng),和Xueshuantong神經(jīng)功能、腫瘤體積,出血性腦梗死患者的不良反應(yīng)。方法:回顧性研究中,共有115例出血性腦梗死

平板菌落計數(shù)法具體標(biāo)準(zhǔn)步驟2024/01/25: 操作方法一：1．以無菌操作取檢樣25g（或25ml)，放于225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的玻璃珠)或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨制成1：10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以8000~10000r/min的速度處理1min，制成1：10的均勻稀釋液。用1ml滅菌吸管吸取1：10稀釋液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管混合均勻，制成1：100的稀釋液。另取1ml滅菌吸管，按上項操作順序，制10倍遞增

菌種在不同情況下的純化方法2024/01/24: 菌種在分離、保藏和生產(chǎn)過程中，極易遭致雜菌污染，因此必須對染有雜菌的菌種進(jìn)行提純，方能用于生產(chǎn)。根據(jù)污染的類型和程度，需采用不同的純化措施。（1）排除細(xì)菌或酵母菌污染在菌種培養(yǎng)中，用肉眼仔細(xì)觀察培養(yǎng)基表面，不難發(fā)現(xiàn)被細(xì)菌或酵母菌污染的分離物常出現(xiàn)黏稠狀的菌落。取被純化物接種在無冷凝水、硬度較高（瓊脂用量2.3%～2.5%）的斜面上，再降低培養(yǎng)溫度至15～20℃，利用某些大型真菌在較低的溫度下，菌絲生長速度比細(xì)菌蔓延速度快的特點，用尖細(xì)的接種針切割菌絲的前端，轉(zhuǎn)接到新的試管斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng)，連續(xù)2

這些情況下可以使用穩(wěn)定細(xì)胞系！2024/01/23: 穩(wěn)定細(xì)胞系是指將外源基因整合到宿主細(xì)胞基因組中，使外源基因能夠在宿主細(xì)胞中長期穩(wěn)定表達(dá)，這樣的細(xì)胞系稱為穩(wěn)定細(xì)胞系。其原理是將外源基因克隆到具有某種抗性的載體上，通過轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，外源基因整合到宿主染色體上，用載體中所含抗性基因進(jìn)行篩選即可得到成功整合目的基因的細(xì)胞。在試驗過程中，常用的真核表達(dá)載體抗性篩選標(biāo)志物有嘌呤霉素(puromycin)、新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)等。通過篩選可得到符合實驗要求的穩(wěn)定高表達(dá)目的蛋白細(xì)胞株或者穩(wěn)定沉默目的基因的細(xì)胞株。其建立的

石蠟切片與冰凍切片在實驗中的區(qū)別2024/01/22: 在組織學(xué)中，石蠟切片和冰凍切片都是常用的方法，前者常用于進(jìn)行免疫組化實驗，后者則常用于免疫熒光實驗。組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中最為廣泛應(yīng)用的切片方法，為石蠟切片與冷凍切片。石蠟切片法包括取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與粘片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片等步驟，為永jiu性顯微玻片標(biāo)本。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法。多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。而且也被用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。冷凍切片技術(shù)，是一

遠(yuǎn)慕豬雌二醇(E2)ELISA kit 文獻(xiàn)引用資訊2024/01/19: Treatmentofporcineovarianfollicleswithtert-butylhydroperoxideasanovariansenescencemodelinvitro治療豬卵泡與叔丁基氫過氧化物作為卵巢衰老模型IF:5.2文獻(xiàn)介紹：卵巢衰老是女性生殖問題的主要原因。過度氧化應(yīng)激可以誘導(dǎo)卵巢衰老和卵泡閉鎖,從而減少繁殖性能。毛囊被分成五組文化基于刺激的持續(xù)時間與叔丁基氫過氧化物(t-BHP)閥門組和組1h,2h,6h,和12h。結(jié)果顯示,孕激素的比例(P),雌二醇(E)增加2

遠(yuǎn)慕分享：HRP標(biāo)記抗體常用的方法2024/01/18: 酶與抗體交聯(lián)的方法有許多種,根據(jù)酶的結(jié)構(gòu)不同可采用不同的方法。對于制備HRP結(jié)合物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。戊二醛二步法1.原理：戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結(jié)合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結(jié)合物。2.標(biāo)記步驟：(1)稱取HRP25mg溶于1.25％戊二醛溶液中，于室溫靜置過夜。(2)反應(yīng)后的酶溶液經(jīng)SephadexG-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml／1分鐘，收集棕色流出液。如體積大于5ml，則以PEG濃縮至5

細(xì)胞培養(yǎng)過程中血清使用常見問題解答2024/01/17: 細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中最chang用也是最重要的技術(shù)之一，在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、生物科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用以提供研究模型和實驗材料。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，wan全培養(yǎng)基對細(xì)胞生長狀態(tài)起到關(guān)鍵作用，決定實驗成功與否。而血清是wan全培養(yǎng)基中的關(guān)鍵成分之一，除為細(xì)胞生長提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、結(jié)合蛋白、一些參與解毒代謝的微量元素和可起到中和保護(hù)的酶類之外，還可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷，因此被業(yè)內(nèi)認(rèn)為是細(xì)胞增殖過程中最重要的試劑。在生命科學(xué)領(lǐng)域的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，動物血清的應(yīng)用十分廣泛，特別是牛來源血清。而牛

大腸桿菌重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)解答2024/01/16: 大腸桿菌（E.coli）重組蛋白表達(dá)技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展，相對于其他表達(dá)體系，算是非常成熟的一個體系。大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)主要有以下特點：遺傳背景清楚；易于培養(yǎng)和控制；轉(zhuǎn)化操作簡單；表達(dá)水平高；成本低；周期短。本篇將對大腸桿菌重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)的常見技術(shù)問題進(jìn)行一一解答。1、大腸桿菌表達(dá)體系的優(yōu)點是什么？（1）菌體繁殖速度快：20分鐘倍增一次，這意味著按照1/100的比例接種（MOI），只需要幾個小時培養(yǎng)基細(xì)菌即可到達(dá)穩(wěn)定期；（2）容易實現(xiàn)高密度培養(yǎng)：理論培養(yǎng)密度是1×1013cells/ml，實際

小鼠抗乙肝核心抗原檢測說明書2024/01/15: 乙型肝炎核心抗原(hepatitisBcoreantigen，HBcAg)是單一多肽，分子量18848u。HBcAg在HBV感染中占有重要地位，他能反映血清中：Dane顆粒的存在及肝內(nèi)HBV的復(fù)制，并可與其他的HBV血清學(xué)標(biāo)志物起互相配合和互相補(bǔ)充的作用。只是由于其抗體具有很強(qiáng)的親和力，能迅速地與血清中的HBcAg結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，因而難以在血清中測得游離的HBcAg。常用ELISA和IRMA雙抗體夾心法檢測HBcAg。產(chǎn)品名稱：小鼠抗乙肝核心抗原產(chǎn)品貨號：CR2123緩沖液成分：0.01M

Hoagland's(霍格蘭氏)營養(yǎng)液SCI文獻(xiàn)引用資訊2024/01/12: Hydrogenperoxidemediatesspermidine-inducedautophagytoalleviatesaltstressincucumber過氧化氫介導(dǎo)亞精胺誘導(dǎo)的自噬以緩解黃瓜的鹽脅迫IF:13.3文獻(xiàn)介紹：自噬是一種進(jìn)化上保守的細(xì)胞降解過程，在植物發(fā)育和脅迫反應(yīng)中起著關(guān)鍵作用。盡管有大量關(guān)于自噬在應(yīng)對環(huán)境壓力中的重要作用的信息，但對自噬的調(diào)控知之甚少。在本研究中，我們證明了亞精胺（Spd）是一種多胺，在鹽脅迫下通過激活（自噬相關(guān)）基因的表達(dá)和自噬體的形成參與黃瓜耐鹽性

關(guān)于實驗室常用抗凝劑選用2024/01/11: 抗凝是用物理或化學(xué)方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固。能夠阻止血液凝固的物質(zhì),稱為抗凝劑或抗凝物質(zhì)。檢查項目不同，所用的也不同。實驗室常用抗凝劑的選擇有以下幾種，實驗中最常出現(xiàn)的幾個抗凝劑。(一)枸櫞酸鹽主要為枸櫞酸三鈉，能與血液中鈣離子結(jié)合形成螯合物，從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉與血液的抗凝比例是1∶9或者1∶4，一般用于凝血和紅細(xì)胞沉降率的檢查。因其毒性小，也是輸血保養(yǎng)液的成分之一。(二)肝素肝素是一種生理性抗凝劑，廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和嗜堿

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