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【RNAi與siRNA技術】基因敲除鼠的實驗建議2021/8/27
如果是在做動物實驗，而且是基因敲除鼠的實驗，那么就會做大批量的小鼠基因型鑒定試驗，來確定自己小鼠的基因型，然而，再做實驗的過程中往往會出現一些意想不到的結果，在這里為大家提一點點小建議。提取DNA1、...
一篇就夠了，帶你了解高通量測序！2021/8/27
說到近十年來發展最迅猛的生物技術，首先想到了高通量測序,我們研究基因組學都離不開它。目前，高通量測序已經深入到生命科學的各個領域，不僅有力地推動了基礎研究的發展，也在逐漸征服臨床應用。所謂的高通量測序...
避免踩坑，注意別踩DNA測序里的大坑！2021/8/27
DNA測序技術自從發明以來，作為一種重要的分子生物學手段，正在科研和臨床上得到了越來越廣泛的應用。下面，介紹一下DNA測序里的大坑。給大家一個前車之鑒吧。坑一：信號衰減/中斷測序信號衰減和中斷，是測序...
DNA 甲基化測序常用方法2021/8/26
隨著高通量測序技術（NGS）技術的發展，使我們能夠從全基因組水平來分析5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件，由此能夠發現很多傳統的基因組學研究所不能發現的東西，這就是所謂的“DNA甲基化測序”！DNA甲基...
電泳中的異常現象及其原因分析2021/8/26
跑電泳是分子生物學實驗的一項基本技術。只要做分子生物學方面的實驗，可能或多或少，或早或晚都要跑跑電泳。有時候，跑電泳跑著跑著也會出現一些奇奇怪怪的現象。下面，談一談跑電泳的過程中可能會發生的異常現象，...
【DNA 電泳】教你做果凍：瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧分享2021/8/26
果凍晶瑩剔透，口感QQ的，其實果凍的原料瓊脂糖，也是我們平時用來跑電泳的材料，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收，DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳...
【教程】構建載體其實一點也不難！2021/8/26
我們在研究基因的功能時，逃脫不掉的就是為了我們的實驗目的，可能需要構建各種載體，比如表達載體，克隆載體，基因打靶載體等等。很多人在構建載體的時候都感覺很困難，特別是對于一個剛進入實驗室的新人來說那更是...
表達融合蛋白時，如何把兩個基因拼接起來？2021/8/26
A君：我要表達一個ras加GFP融合蛋白，怎么設計引物？安培君：你的GFP標簽蛋白在載體里還是要你自己插進去？A君：是我自己插進去。安培君：你打算怎樣融合？A君：是不是這樣？酶切A基因，酶切質粒，把A...
教你如何做分子構建，從此邁向科研達人！2021/8/25
做過分子實驗的人都知道，要想做的有效率有質量是很苦逼的，1個月做100個克隆那都是小case，沒點看家的本事怎么行。如果再遇到比較稀有的基因，周旋個把月，那也是家常便飯。下面就和大家分享一些載體構建的...
學學序列拼接，想節省費用的千萬別錯過！2021/8/25
相信大家PCR之后一般要進行測序以保證擴增序列的正確性吧？由于測序能力的限制，目前好的公司也只能保證一個反應800bp測準。如果大家的克隆片斷大于1k，那么勢必要同時測兩個反應，然后將兩個反應得到的序...
你真的了解 TA 克隆嗎？2021/8/25
首先，TA克隆是用于PCR產物的克隆和測序。原理是利用Taq酶能夠在PCR產物的3’末端加上一個非模板依賴的A，而T載體是一種帶有3’T突出端的載體，在連接酶作用下，可以快速地、一步到位地把PCR產物...
上圖！教你秒懂重組 DNA 技術常用工具酶！2021/8/25
1分子剪刀——限制性內切酶：作用：識別特異序列，切割DNA限制酶的命名是根據細菌種類而定，以EcoRI為例：2膠水——DNA連接酶作用：跟限制性內切酶對著干，催化DNA中相鄰核苷酸間形成磷酸二酯鍵，使...
如何解決酶切切過頭的問題？2021/8/25
之前談到了酶切切不動的問題。這一次，我們探討一下酶切的另外一端：酶切切過頭的問題。還是按照一貫的做法和思路，發現主要是兩個原因導致的，解決辦法也是有的。一、酶切時間過長酶切時間過長的確有時候會對目的條...
【技術】酶切、酶切，切還是不切？2021/8/24
酶切，作為一種常用的分子克隆的手段，如果應用得當，可謂寶刀屠龍，無往而不利；如果應用不當，又會步步維艱。真是讓人歡喜讓人憂愁。酶切，最常見的問題就是切不動和切過了。這些問題比較復雜。下面，先講一講切不...
瓊脂糖凝膠電泳、酶和試劑的使用等一些注意事項2021/8/24
基因克隆在發明后的32年，需求一直不斷增加，但是有些小伙伴的重組質粒就是怎么樣都構建不出來。其實，看似簡單的傳統基因克隆，可是存在著重重陷阱！美國羅林斯研究中心（RollinsResearchCent...
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