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乳化型快速佐劑相關知識2023/05/17

保存條件：不含防腐劑，2-8℃避光保存10個月1.注意事項：雖然本產品很穩定但您還是要盡可能避免陽光直射帶來的危害；另外抗原如果含有甘油或者尿素會降低乳化效率，甚至乳化失敗。2.使用方法：實驗表明最佳使用比例是30-50%。30%乳化后最粘稠，越接近50%粘性越低。因此建議夏季使用低濃度冬季使用高濃度乳化；這樣既能得到很好的免疫效果也能減少注射時帶來的阻力困難。乳化建議2種方法去操作：1、將佐劑先加入乳化管，然后加少部分抗原攪拌乳化兒下后再加抗原繼續乳化，直到抗原加完再乳化幾分鐘即可。2、抗原和

重組蛋白溶解復溶緩沖液和載體蛋白2023/05/16

干粉形式的重組蛋白在常溫下能夠保持穩定，大多數MCE重組蛋白以干粉形式發貨。凍干粉在使用前需進行溶解，這時候會?？吹揭晃荒吧质煜さ摹芭笥选薄d體蛋白。溶解教學：Step1:判斷實驗周期。短期實驗=7天，溶解材料：復溶緩沖液、載體蛋白。Step2:開蓋前離心。凍干粉在運輸過程中，會因為外力因素粘附于管壁或者管蓋上，在開蓋之前，先通過離心操作，將凍干粉收集于管底，避免損失和浪費。建議10,000-12,000rpm高速離心30s；若沒有高速離心機，3,000-3,500rpm離心5min。Ste

核糖核酸是什么？2023/05/15

核糖核酸的概述：核糖核酸存在于生物細胞以及部分病毒、類病毒中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種，即A腺嘌呤，G鳥嘌呤，C胞嘧啶，U尿嘧啶。其中，U(尿嘧啶)取代了DNA中的T胸腺嘧啶而成為RNA的特征堿基。與DNA不同，RNA一般為單鏈長分子，不形成雙螺旋結構，但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA的堿基配對規則基本和DNA相同，不過除了A-U、G-C配

牛血清中球蛋白的作用2023/05/12

1、球蛋白定義：球蛋白(G或GLB)是多種蛋白質的混合物，包括具有防御作用而且含量較多的免疫球蛋白和補體、多種糖蛋白。2、球蛋白分類通過電泳的方法，球蛋白可分為α1，α2，β和γ球蛋白。它們大部分都是由肝臟合成。α1-球蛋白又分為α1-酸性糖蛋白和α脂蛋白。α1-酸性糖蛋白參與運輸氨基己糖，α脂蛋白參與運輸脂類。α2-球蛋白包括α2糖蛋白、纖溶酶原、凝血酶原、結合珠蛋白、銅藍蛋白和α2微球蛋白等。纖溶酶原、凝血酶原參與凝血。結合珠蛋白能和游離的血紅蛋白結合，防止血紅蛋白和鐵流失。銅藍蛋白參與銅代

Parafilm封口膜的產品特性及應用范圍2023/05/11

Parafilm封口膜是一種可以自動封口、可模壓、韌性好的特制薄膜產品，廣泛用于分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學研究實驗室。美國Parafilm封口膜具有*的滲透性能、*的水汽通透性能和很強的抗腐蝕性能。所有Parafilm封口膜產品的厚度均為0.005″（127µm）。能很輕松地打成“死結”是Parafilm®M封口膜的另一個全新特點。Parafilm®M封口膜的長度甚至可以拉伸到3～4倍而不會發生斷裂。Parafilm封口膜產品特性：美國Parafilm封口膜可以快速有效地密封實驗室

基質膠是什么？如何制備2023/05/10

基質膠是從富含胞外基質蛋白EHS小鼠腫瘤中提取取的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包如TGF-β、EGF、IGF、FGF等多種生長因子。在室溫條件下，基質膠聚合形成具有生物學活性的三維基質，能模擬體內細胞基底膜的結構、組成、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養和分化。凝膠制備方法1）基質膠融化后，用預冷的槍頭混勻基質膠。2）將需要使用的培養板置于冰上，然后將培養的細胞與基質膠混合，用遇冷的槍頭使細胞懸浮均勻。按照150-20

免疫熒光技術的特點及原理2023/05/09

免疫熒光技術（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。一、特點：該技術的主要特點是：特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是：非特異性染色問題尚未解決，結果判定的客觀性不足，技術程序也還比較復雜。熒光免疫法按反應體系及定量方法不同，還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比，

細胞轉染的原理、操作步驟2023/05/08

細胞轉染的方法主要包括：電穿孔法、磷酸鈣沉淀法、脂質體轉染法、病毒介導的轉染等，理想的細胞轉染方法是具有高轉染效率、對細胞的毒性作用小等，本文主要介紹細胞轉染常用的方法-脂質體轉染的原理和操作步驟。脂質體(Liposome)轉染方法原理：脂質體作為體內和體外輸送載體的工具，已經研究的十分廣泛，中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA，借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。帶正電的陽離子脂質體，DNA并沒有預先包埋在脂質體中，而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上，形成DNA-陽離子脂質體復合物，從而吸附

RNA聚合酶的特點及分類2023/05/06

RNA聚合酶（RNApolymerase）是以一條DNA鏈或RNA為模板，三磷酸核糖核苷為底物、通過磷酸二酯鍵而聚合的合成RNA的酶，因為在細胞內與基因DNA的遺傳信息轉錄為RNA有關，所以也稱轉錄酶。特點：RNA聚合酶催化RNA的合成，其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點：①以DNA為模板；②催化核苷酸通過聚合反應合成核酸；③聚合反應是核苷酸形成3’，5’一磷酸二酯鍵的反應；④以3’→5’方向閱讀模板，5’→3’方向合成核酸；⑤按照堿基配對原則忠實轉錄模板序列。分類：通?？筛鶕锏念悇e，將R

脂質體的制備2023/05/04

一、囊泡形成的機制當脂質薄膜或脂質結塊發生水合并且堆疊的液晶態雙層膜變得具有流動性和膨脹時，會形成脂質體（脂質囊泡）。水合的脂質層在攪拌期間分離并自我密合形成龐大的多層囊泡（LMV），LMV可防止水與雙層膜的碳氫化合物核心在邊緣發生相互作用。一旦形成這些顆粒，將需要聲能（超聲）或機械能（擠出）形式的能量輸入才能減小粒徑。二、脂質體制備方法脂質配方的性質取決于具體成分（陽離子、陰離子和中性脂質）。但是，同一種制備方法適用于所有成分的脂質囊泡。制備流程的一般要素包括制備用于水合的脂質、攪拌水合以及減

使用細胞爬片時的準備及操作方法有哪些？2023/04/25

浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時，再用三蒸水沖洗3遍（個人認為主要目的是將酸沖洗干凈就可以了，如果不干凈的話，細胞帖壁不好），放在飯盒或者玻璃培養皿中烘干后進行高壓消毒。高壓后取出放入烤箱中烤干，備用。烤干后可放入超凈臺中。4.多聚賴氨酸的使用：很多人都將玻片用此處理，以使細胞與玻片結合更牢。但我在做爬片時從來沒用過多聚賴氨酸，細胞貼壁仍然很好，且在做后續的免疫細胞化學染色、TUNEL等凋亡檢測、免疫熒光等也從未脫過片。細胞爬片的操作1.胰酶消化細胞后計數重懸細

胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)的使用說明2023/04/24

產品說明：在組織細胞的體外培養和原代細胞培養中的組織細胞分散（將組織塊制備成單個細胞懸液）以及傳代細胞培養中，貼壁生長細胞的消化分散均要使用組織細胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使細胞間的蛋白質（如細胞外基質）水解，使組織或貼壁細胞分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTASolution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA（0.53mM），溶于無鈣鎂平衡鹽溶液中，經過濾除菌，可以直接用于培養細胞和組織的消化。胰蛋

天然培養基的用途有哪些？2023/04/23

1.蛋白質：雖然蛋白質是血清的主要成分，但許多蛋白質的功能在體外情況下所剩無幾，而有幾種有關的蛋白質可能是需要的，例如攜帶礦物質、脂肪酸、激素的蛋白。已知可滿足這些需求的蛋白質有：白蛋白，它作為脂類或礦物質及球蛋白的一種攜帶者；纖連蛋白（冷不溶性球蛋白），它可促進細胞貼壁；α2-巨球蛋白，它是胰酶的抑制劑。此外，胎兒血清中的胎球蛋白可增進細胞的貼附；轉鐵蛋白可結合鐵離子，使其毒性減小而具有生物可利用性。其他一些未知的蛋白質對于細胞的貼附和生長可能也是必需的。蛋白質還可增加培養基的成泡性，在吹打和

培養基配置與儲存2023/04/18

實驗材料基礎培養基（液體或干粉）；PET/PETG方形試劑瓶；血清（常規為FBS/NBS）；補充劑；移液槍；電動移液槍；15mL、50mL無菌離心管；滅菌超純水；盒裝無菌吸頭；血清移液管；超凈工作臺；雙抗（青鏈霉素混合液）；杯式濾器(0.22μmPES膜)；針式濾器(0.22μmPES膜)實驗準備血清準備：配置培養基前一天，將所需血清從-20℃冰庫取出，放置入2-8℃冰箱緩慢解凍儲存，使用前37℃水浴加熱。培養基準備：液體基礎培養基使用前37℃水浴加熱。實驗流程基礎培養基配置（干粉）：根據配置體

液體培養基的配制原則2023/04/11

根據培養目的需要選擇適宜的營養物質由于微生物營養類型復雜，不同微生物有不同的營養要求。因此，要根據不同微生物的營養需求選擇適宜的營養物質，配制針對性強的培養基。自養微生物有較強的合成能力，能以簡單的無機物如co2和無機鹽合成復雜的細胞物質。因此，培養自養微生物的培養基應由簡單的無機物組成。異養微生物的合成能力較弱，不能以CO2作為碳源或主要碳源，故應在培養基中至少添加一種有機物。注意營養物質的濃度與配比要合適微生物只有在營養物質濃度及其比例合適時才能良好生長。營養物質濃度過低不能滿足現生長需要，

透明質酸酶的作用與用途2023/03/16

透明質酸酶（hyaluronidase,HAase）是能使透明質酸產生水解作用酶的總稱，是一種能夠降低透明質酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。作用與用途：是一種能水解透明質酸的酶（透明質酸為組織基質中具有限制水分及其他細胞外物質擴散作用的成分），用于人體暫時降低細胞間質的粘性，可促使皮下輸液、局部積貯的滲出液或血液加快擴散而利于吸收，為一種重要的藥物擴散劑。注意事項：1、該產品對水是稍有危害的，不要讓未稀釋或者大量的產品接觸地下水、水道或污水系統，若無政府許可，勿將材料排入周圍環境。2、

CCK-8試劑盒的操作步驟2023/03/08

CCK-8試劑盒，是用于測定細胞增殖或毒性實驗中活細胞數目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。CCK法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性測驗等。操作步驟：1、在96孔板中配置100μl的細胞懸液，將培養板在培養箱預培養24小時（在37℃，5%CO2的條件下）。2、向培養板加入10μl不同濃度的待測物質。3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間（例如6、12、24或48小時）。4、向每孔加入10μlCCK-8溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響

TRIZOL的原理和作用2023/02/28

基本原理：TRIZOL是一種新型總RNA抽提試劑，采用變性劑即內含異硫氰酸胍、酚和β-疏基乙醇等變性物質，能迅速破碎細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶。各組分作用：苯/酚：主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白和核酸物質解聚得到釋放。苯/酚雖可有效地變性蛋白質，但不能抑制RNA酶活性。異硫氰酸胍：屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質，并使蛋白質二級結構消失，細胞結構降解，核蛋白迅速與核酸分離，保護RNA完整性。β-疏基乙醇：β-疏基乙醇主要破壞RNase蛋白質中的二硫鍵。8-羥基喹/啉：0.

細胞培養可以分為哪幾種？2023/02/20

細胞培養（cellculture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個過程，細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術的環節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技

胎牛血清給細胞提供的益處，有哪六個方面？2023/02/14

胎牛血清是細胞培養中常用的添加培養基。它營養豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎培養基所不具備的營養因子。它給細胞提供的益處主要有六個方面：1.提供細胞生長所需的天然激素或天然生長因子,如胰島素、IGFII等。2.提供天然的結合蛋白如胎球蛋白、白蛋白等，能識別氨基酸、脂質、金屬離子和激素等，能結合并調節它們的活性。胎球蛋白（Fetuin），具有多個鈣離子結合位點，能調節血清中的鈣離子濃度。3.提供細胞外基質成分，便于細胞粘附、貼壁、鋪展。當然，有些細胞也能分泌部分外基質成分，但血清中的更不可