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elisa試劑盒的產品特點及操作方法2023/07/03

產品特點：一、高效、靈敏、特異的抗體；二、穩定的重復性和可靠性；三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型；五、節省實驗經費。elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析過程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，如果作標液1PPM，就是1毫克/升，而作出標準數據為0.99毫克/升，就是說你的回收率是99%，這個與真實成分有密切的關系，說明方法的準確度。比如水中總無機氯含量測定，樣品水中含有無機氯20mg/L，取100mL

如何配置PBS？2023/06/30

PBS作為生物實驗中試劑，PBS是磷酸緩沖鹽溶液，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。它具有鹽平衡、可調整適宜pH、可以緩沖pH等特點。PBS、蒸餾水和生理鹽水三種溶劑該怎么選擇呢？蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結構及生物特性；而生理鹽水不具有調整pH的作用，對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應。在實驗室也常見PB、PBST溶液。PB溶液的成分通常有磷酸鈉和磷酸鉀。若只是化學反應,用PB溶液就行。在PB的基礎上按照一定比例加

如何養細胞？2023/06/29

一、細胞的營養來源針對大多數腫瘤細胞，營養配方一般為：90%合成培養基(DMEM、RPMI1640、MEM等)和10%胎牛血清(FBS);為了防止污染，可以加1%雙抗常見問題解答：Q：針對不同細胞，細胞培養基配方一樣嗎?如何獲知呢?A：不同細胞的培養基是不同的。一般ATCC購買的細胞，針對不同細胞株，會有詳細介紹，包括生長的狀態圖、培養基的類型等。如人源乳腺癌細胞MCF-7細胞一般為1640，人源肺癌細胞A549可用DMEM培養基。Q：培養基為什么一般都是偏紅色?A：因為培養基加了酚紅來顯示顏色

空氣位移移液管如何工作？2023/06/28

設置容積時，活塞將移動到適當的位置。當操作按鈕按下第一檔時，活塞會排出音量設置上指示的相同空氣量。將頂端浸入液體后，操作按鈕被釋放。這會產生部分真空，并吸入體積的液體進入頂端。當操作按鈕再次按下第一檔時，進入槍頭頂端的液體不會吹出。要清空頂端，需要將按鈕將按下到第二檔。影響空氣置換移液器精度的因素：溫度：移液精度最重要的因素是液體溫度。下圖顯示了液體溫度與移液器和空氣不同的時體積的變化。如果液體、移液器和空氣的溫度相同，則精度不會受到顯著影響。密度：密度是液體的質量/體積比。密度根據溫度和氣壓而

如何選擇包埋劑2023/06/26

包埋劑的分類一般用光學顯微鏡觀察的切片，用石蠟、火棉膠、碳蠟、明膠等作包埋劑；電子顯微鏡則使用環氧杯脂、聚苯乙/烯樹脂、異丁/烯樹脂及水溶性樹脂；硬組織包埋(骨、牙齒)則采用塑料包埋，甲酯甲基內/烯。*實際上包埋劑就是浸誘劑，浸透和包埋時用的是同一種物質，只是用在不同的步驟上叫法不同而已。如用石蠟作浸透，那么同樣要用同樣的石蠟包埋。如何選擇合適的包埋劑包埋劑的作用組織對象有特定需求，選擇合適包埋劑可以提高包埋質量，從而提高切片質量。接下來，為大家簡單做了分類：石蠟：常用常見的包埋劑，是病理制片經

細胞分裂的原理、作用2023/06/25

細胞分裂（celldivision）是指活細胞增殖及其數量由一個細胞分裂為兩個細胞的過程。分裂前的細胞稱母細胞（mothercell），分裂后形成的新細胞稱子細胞（daughtercell）。通常包括細胞核分裂和細胞質分裂兩步。在核分裂過程中母細胞把遺傳物質傳給子細胞。真核細胞分裂包括有絲分裂、減數分裂、無絲分裂。細胞分裂（celldivision）是活細胞增殖其數目由一個細胞分裂為兩個細胞的過程。分裂前的細胞稱母細胞，分裂后形成的新細胞稱子細胞。一般包括細胞核分裂和細胞質分裂兩步。在核分裂過程

如何選擇合適的細胞培養板？2023/06/21

細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。（1）平底和圓底（U型和V型）培養板的區別和選擇不同形狀的培養板有不同用途。培養細胞，通常是選用平底的，這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時，無論是貼壁和懸浮細胞，一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養板。要特別

PDA培養基的配制，特點及用途2023/06/20

PDA培養基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基的簡稱，即PotatoDextroseAgar（Medium），依次對應馬鈴薯、葡萄糖、瓊脂的英文。特點及用途：一種常用的培養基，宜培養酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌按物理性狀劃分：固體培養基按培養基成分劃分：半合成培養基PDA培養基的配制(1)稱量和熬煮按培養基配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持20-30min，用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾，濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。(2)加熱溶解把濾液放入

超濾蛋白純化實驗如何進行？2023/06/19

1.制備培養濾液搖好的培養液，細胞篩過濾去菌絲球，離心去細小菌絲，0.22uM過濾去細小顆粒。2.超濾濃縮、更換buffer1）新買的超濾管使用Milli-Q水進行預清洗。定角轉子，使超濾內管的膜面朝上，膜與軸垂直。加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預冷。2）脫鹽或更換緩沖液是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液的更換可通過超濾管來完成。上超濾柱之后4度離心，離心時間很長，協調好離心機。4度，5000g，每半小時查看離心狀況。濃縮至1ml輕輕加入新的Buffer（經0.

DAPI配置方法2023/06/15

DAPI是一種可與DNA的小溝結合的細胞滲透性熒光探針，它可與雙鏈DNA結合，發出藍色熒光，熒光強度是自身的20倍。瓊脂糖凝膠電泳DNA的染色中DAPI的染色效果是溴化乙淀的數倍。DAPI也能對RNA染色，染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發出熒光。DAPI常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。盡管DAPI不能通過活細胞膜，但卻能穿透擾亂的細胞膜而對核染色。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用來檢測酵母線粒體DNA，葉綠體DNA，病毒DNA，支原體DNA以及染色體D

使用細胞分離液的注意事項2023/06/12

一、分離方法會影響胰島的產率和存活率：因此，取材時需要注意1.胰臟應快速取材，保持包膜完整。2.建議采用UW溶液運輸。3.對胰臟進行評估，在消化酶灌注前去除多余的脂肪和殘留的十二指腸和脾臟。4.消化過程不宜進行震蕩，以保證胰腺組織被灌注的消化酶液消化，而不是被胰腺所釋放的胰蛋白酶消化。5.要保證胰島的包膜完整，消化不能太充分。寧可不足，也不可過頭，否則會影響胰島純化的產率。二、分離胰島細胞時的注意事項：1.biocoll分離液使用時，是采用連續密度梯度，需要分別配制密度為1.065g/mL（UW

常用培養基的特征2023/06/07

1、BME細胞培養基基礎Eagle培養基（BasalMediumEagle），1955年Eagle設計，BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素。簡單、便于添加，適于各種傳代細胞系和特殊研究用，在此基礎上改良的細胞培養基品種有MEM、DMEM、IMDM等。2、MEM細胞培養基Eagle培養基（MinimalEssentialMedium），1959年在Eagle's基礎培養基（BME）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，氨基酸濃度增加，適合多種細胞單層生長，有可高壓滅菌品種，是一種最基本、試用范圍

五種常見生化試劑盒2023/06/06

1.多酚氧化酶（PPO）活性檢測試劑盒（比色法）：多酚氧化酶（PPO）能夠催化Catechol產生醌，后者在525nm有特征光吸收，測定525nm光吸收增加的速率進而計算多酚氧化酶（PPO）活性。該試劑盒適用的樣本范圍廣泛包括血清、血漿、組織、細胞、細菌；而且細致優化了樣本處理方法、實驗操作流程以及結果計算過程。2.血鉀（K?）檢測試劑盒（比色法）：血清中鉀離子（K+）與四苯硼鈉作用，形成不溶于水的四苯硼鉀，產生的濁度在一定范圍內與鉀離子濃度成正比；通過測定其濁度來測定血清鉀含量。該試劑盒提供了

CCK-8細胞實驗原理及步驟2023/06/02

一、原理：CCK-8試劑盒用于快速靈敏地檢測細胞增殖和細胞毒性。工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），可以被線粒體內的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產物（formazan），其顏色的深淺與細胞增殖成正比，與細胞毒性成反比，對同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。使用酶標儀在450nm波長處測定OD值，可以間接反映活細胞的數量。二、用途：可用于細胞增殖測定、細胞毒性

四種常見的ELISA方法2023/06/01

1.直接ELISA將抗原固定于ELISA板上，然后用酶標抗體直檢測抗原。相較于其它類型的ELISA實驗，直接ELISA實驗步驟少，檢測速度快，不需要用到二抗，避免了交叉反應，測定結果不容易出錯。但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定的，樣本中的靶蛋白及其他雜質蛋白都會與ELISA板結合，實驗背景會比較高。而且直接ELISA每種靶蛋白都需要準備能夠與其特異性結合的一抗，實驗不太靈活。另外由于沒有使用二抗，信號沒有被放大，降低了測定的靈敏度。2.間接ELISA先將抗原結合到ELISA板上，隨后分

EdU法細胞增殖檢測介紹2023/05/30

一、什么是細胞增殖呢？細胞增殖是生物體的重要生命特征，細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的細胞，用來補充體內衰老或死亡的細胞。二、細胞增殖的意義和方式意義：細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。方式：真核生物的分裂依據過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分裂方式，是真核細

如何辨別細胞培養血清？2023/05/25

一、外觀1、顏色根據血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現出黃色或紅色，我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。國產血清的采血點很分散，大多是由屠戶采血后馬上離心收集，所以很少會有溶血，表現出明亮的蠟黃色，當然，國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。進口胎牛血清或多或少總有點溶血，因為真正的胎牛血清凝血功能差，紅細胞容易破裂。總的來說，國產的血清呈現出蠟黃。進口的血清，

牛血清白蛋白的組要成分有哪些？2023/05/22

牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用。成分：蛋白質是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著；α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著；轉鐵蛋白能結合鐵離子，減少其毒性和被細胞利用。多肽血小板促生長因子能促細胞分裂，是多肽家庭的主要成員之一，是主要的促細胞增殖因子；成纖維細胞生長因子、

表面活性劑作用原理是什么？2023/05/18

表面活性劑（surfactant），是指是能使目標溶液表面張力顯著下降的物質。具有固定的親水親油基團，在溶液的表面能定向排列。表面活性劑的分子結構具有兩性：一端為親水基團，另一端為疏水基團；親水基團常為極性基團，如羧酸、磺酸、硫酸、氨基或胺基及其鹽，羥基、酰胺基、醚鍵等也可作為極性親水基團；而疏水基團常為非極性烴鏈，如8個碳原子以上烴鏈。表面活性劑分為離子型表面活性劑（包括陽離子表面活性劑與陰離子表面活性劑）、非離子型表面活性劑、兩性表面活性劑、復配表面活性劑、其他表面活性劑等。一、作用：表面活

乳化型快速佐劑相關知識2023/05/17

保存條件：不含防腐劑，2-8℃避光保存10個月1.注意事項：雖然本產品很穩定但您還是要盡可能避免陽光直射帶來的危害；另外抗原如果含有甘油或者尿素會降低乳化效率，甚至乳化失敗。2.使用方法：實驗表明最佳使用比例是30-50%。30%乳化后最粘稠，越接近50%粘性越低。因此建議夏季使用低濃度冬季使用高濃度乳化；這樣既能得到很好的免疫效果也能減少注射時帶來的阻力困難。乳化建議2種方法去操作：1、將佐劑先加入乳化管，然后加少部分抗原攪拌乳化兒下后再加抗原繼續乳化，直到抗原加完再乳化幾分鐘即可。2、抗原和