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在細胞實驗中血清熱滅活的作用和意義2023/03/30

一、血清滅活的目的是什么？1、血清熱滅活目的主要是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質，但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。2、實驗員曾對商業胎牛血清中的補體成分進行測定，他們發現胎牛血清中含有的C1、C6僅達成年動物血清的1-3%，而其它補體成分僅有成年動物的5-50%，至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗，也未發現有明顯的溶血現象。多數實驗室在培養前將培養液進行預熱的過程，也對熱敏的補體有滅活的作用。3、熱滅活另一個目的是為了使支原體失活。二、血清使用前是

酵母蛋白胨的優勢及用途2023/03/28

酵母蛋白胨的優勢：動植物源蛋白胨是市場中主要的蛋白胨，對于比較粗放的發酵，該類產品具有一定的優勢。但隨著酵母要求逐漸精細化、標準化后，這類蛋白胨的弊端逐漸暴露出來。動植物生長的環境及一些外在因素，可能造成動植物生長狀態的波動，進而造成其體內蛋白含量波動，并且蛋白的儲存、提取和加工體系基本是開放的，可能會造成原料品質的變化（如變色等）和營養成分的差異，最終導致蛋白胨產品質量的不穩定，以此為原料，勢必會影響發酵生產的穩定性；動物源蛋白凍可能存在致病性和風俗禁忌問題，植物性的蛋白胨主要存在過敏性和轉基

ECL化學化學發光底物（超敏）的操作步驟2023/03/17

ECL化學化學發光底物（超敏）可為使用辣根過氧化物酶（HRP）偶聯物的免疫印跡實驗提供明亮的信號和低皮克級檢測靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性價比，滿足用戶的免疫印跡應用需求。操作步驟：1、執行常規SDS-PAGE、轉模和WesternBlot步驟。注意用HRP標記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。2、WesternBlot最后一次洗模的同時配置發光工作液：分別取等體積的A液和B液，放入干凈容器中混合（注意吸取A液和B液的吸頭一定

紅細胞裂解液的作用原理2023/03/14

紅細胞裂解液是一種去除紅細胞的方法，即用裂解液裂解紅細胞，它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法，主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化，淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞，可進一步用于原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。紅細胞裂解液的作用原理：細胞裂解液一般都使用含酶的，在血紅細胞表面上有紅細胞專屬的表面抗原，當裂解液中可以攻擊特定紅細胞表面抗原的酶的

PBS磷酸鹽緩沖液的配置方法及作用2023/03/07

PBS緩沖液，是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二級解離，緩沖的PH值范圍很廣，而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2，以提供二價陽離子。配置方法：稱取8.0gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4、0.24gKH2PO4溶于800ml蒸餾水中，用HCI調節溶液至7.4，

細胞培養可以分為哪幾種？2023/02/28

細胞培養（cellculture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個過程，細胞培養本身就是細胞的大規模克隆。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術的環節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技

酪蛋白的作用2023/02/22

酪蛋白是一種含磷鈣的結合蛋白，對酸敏感，pH較低時會沉淀。酪蛋白是哺乳動物包括母牛，羊和人奶中的主要蛋白質，又稱：干酪素、酪朊、乳酪素。α-酪蛋白是哺乳動物的主要蛋白，人乳中沒有α-酪蛋白，以β-酪蛋白為主要酪蛋白形式。酪蛋白對幼兒既是氨基酸的來源，也是鈣和磷的來源，酪蛋白在胃中形成凝乳以便消化。作用：酸酪蛋白主要用作涂料的基料，木、紙和布的粘合劑，食品用添加劑等。作為涂料的基料約占總消費的一半，具有優良的耐水性，在顏料中能很好地分散，提高涂料的均勻性。此外，因流動性好，易于涂裝施工，粗制凝乳酶

影響細胞培養的有哪些因素？2023/02/20

環境因素1．無菌環境無毒和無菌是體外培養細胞的首要條件。細胞在活體內，解毒系統和免疫系統可抵抗微生物或其他有害物質的入侵，但細胞在體外培養的過程中，缺乏機體免疫系統的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質的解毒能力。為保證細胞能在體外環境中生長繁殖，必須要確保無菌工作區域、良好的個人衛生、無菌試劑和培養基以及無菌操作。常見的微生物污染有支原體、細菌、真菌。支原體無致死毒性，可與細胞長期共存，對細胞有潛在影響，但體積小，不易鑒別，可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進行檢測。細菌增殖快

細胞凋亡檢測試劑盒的原理、使用方法及注意事項2023/02/14

細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡是為維持環境穩定，為更好的適應勝春環境而主動爭取的一種死亡過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等作用，是一種字體損傷的現象。zui常用的目前就是細胞凋亡檢測試劑盒。細胞凋亡檢測試劑盒原理：細胞凋亡是細胞的基本特征之一，在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面都起到十分重要的作用。AnnexinV是一種分子量為35.8KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白，能與細胞凋亡過程中翻轉到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）高親和力特異結合

保存血清時遇突發問題如何隨機應變？2023/02/07

產品的保存方法與質量有著莫大的關系，有不少老師反映出在保存血清的時候會遇見“什么溫度zui合適”“怎樣避免沉淀物出現”等等問題。1.保存血清的方法是怎樣的呢？我們建議血清應保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內，再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會使產品品質受損？我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。3.血清解凍后發現有絮狀沉淀

教您如何用酶標記抗體法染色2023/02/06

很多實驗新手剛剛做酶聯免疫試驗，都會有很多不了解的方面。今天，小編在這里要和大家分享下如何運用酶標記抗體法染色。酶標記抗體法的實驗原理總體來說和熒光素標記抗體法的原理類似，分為直接法和間接法，其原理基本相同，但敏感性不同。一、直接法直接法是將酶（如HRP）標記在特異性抗體（*抗體）上，然后用酶標記抗體直接與相應原特異性結合，形成抗原—抗體—HRP復合物，zui后用酶底物DAB-H202顯色。該法的優點是簡單、步驟少，省時、特異性高、非特異性染色輕：缺點是敏感性差，因為一個抗原決定簇只結合一個HR

落酸的原理及配制方法2023/02/03

脫落酸是植物體內產生的一種抑制植物生長發育的倍半萜類的植物激素。脫落酸有調節蒸騰的作用。此外，脫落酸還有抑制營養器官的生長，促進葉片等器官的衰老和棉花幼果的脫落等作用。脫落酸在植物界廣泛分布，它抑制種子的萌發，調節芽的休眠，促進離層形成與器官的衰老、脫落。脫落酸的原理：脫落酸分子式是C15H20O4，分子量是264.31，PKa4.5，難溶于水或苯，易溶于甲醇、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或堿性水溶液。它含有一個不對稱的碳原子(C-1′)，形成兩種光學異構體。天然ABA呈現右旋旋光性，標志為(+)-AB

Elisa試劑盒實驗的技巧及注意事項2023/02/02

在操作elisa試劑盒實驗前，不少老師會找尋很多的相關實驗資料，網上的資料一大堆，然而真正所能夠需要用到的技巧和注意也就那幾條，熟練的了解并掌握之后再應用到實驗中就會簡單的多。一、加樣的經驗總結加樣或加試劑時，請注意在吸取標本/標準品，酶結合物或底物時，個孔與一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的“預孵育”時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。二、孵育的三條必知1.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密

重組蛋白可分為哪幾種？2023/02/01

重組蛋白的產生是應用了重組DNA或重組RNA的技術從而獲得的蛋白質。體外重組蛋白的生產主要包括四大系統：原核蛋白表達，哺乳動物細胞蛋白表達，酵母蛋白表達及昆蟲細胞蛋白表達。生產的蛋白在活性和應用方法方面均有所不同。根據自身的下游運用選擇合適的蛋白表達系統，提高表達成功率。按功能分，可分為以下幾種：1.白細胞介素（Interleukin，IL）由多種細胞產生并作用于多種細胞的一類細胞因子。由于最初是由白細胞產生且又在白細胞間發揮作用，所以得名，現仍沿用此名。2.干擾素（interferon，IFN

紅細胞裂解液操作步驟2023/01/31

操作步驟：（一）貼壁培養細胞1、取NP-40裂解液置于室溫融解混勻，加入PMSF，使PMSF終濃度為1mM。2、去除貼壁細胞的培養液，用PBS、生理鹽水或無血清培養液清洗1次，低速離心，棄上清，留取沉淀。3、按照6孔板每孔加入150～250μl含有PMSF的NP-40裂解液，移液器輕輕吹打，使裂解液和細胞充分接觸。置于冰上或4℃裂解，通常裂解液作用于細胞1～3s內，細胞就會被裂解。4、10000～12000g，4℃離心5～10min（如無低溫離心機，室溫下離心亦可），取上清。5、后續的SDS-P

如何選擇合適的細胞培養板？2023/01/30

1、孔的數量根據不同的實驗背景以及篩選通量去確認培養板的孔數，例如WB、流式檢測相關，需要較多的細胞樣本量，最終的檢測通量較低，一般會選擇6孔板、24孔板；而實驗通量較高，最終的檢測手段可以實現自動化，多數可以選擇96孔板或者384孔板，例如：CTG實驗、CCK8實驗等。2、孔的形狀一般貼壁細胞的培養，進行成像或分光光度的測定shouxuan平底的培養板；而懸浮細胞的培養，為防止細胞的附著，需要使用U底的培養板。3、孔板顏色發光檢測—白色微孔板；以便最大限度提高信號的反射率。熒光檢測—黑色微孔板

木瓜蛋白酶的生產方法2023/01/29

由木瓜的未成熟果實，經提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業上以粗制品的應用為主。木瓜蛋白酶韻生產方法有三種，分別是直接熱風烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。直接烘干生產方法較簡單、快速，但生產出來的成品只是粗酶，雜質多、色澤差且微生物超標，酶活力也較低，只有60萬～80萬單位/g。多為個體工廠采用，已不能滿足國內食品質量衛生安全等。噴霧干燥此法是先通過離心去除部分雜質后再進行噴霧干燥，所生產出的成品酶活力相對高，達到100萬單位/g左右，雜質相對也較少，色澤相對也較白。但產品噴霧時容易

十二烷基硫酸鈉的制備方法2023/01/28

（0.053mol）ClHSO?，混合均勻。在5min中慢慢地將8g（0.043mol）以液體形式或極細固體粉末形式的十二烷醇加入到冷的醋酸及ClHSO?中，攪拌30min直至全部的醇都溶解并參與反應。若醇未全部溶解，則將反應瓶從冰浴上取出，在室溫下攪拌10min。把反應物料倒在盛有30g碎冰的燒杯中,將30mLC?H10O加至上述混合物中，攪拌3min。攪拌下慢慢加入3mL飽和碳酸鈉水溶液,溶液對石蕊試紙呈堿性。當反應呈堿性后，加入10g固體無水碳酸鈉，靜置。將上層C?H10O溶液從水層表面傾

科研用試劑聚乙二醇2023/01/13

聚乙二醇在科研領域運用廣泛，作為高分子聚合物，聚乙二醇具有良好的水溶性，并與許多有機組分有良好的相容性。具有優良的潤滑性、分散性、粘黏性，在制藥、化妝品、金屬加工等方面都有廣泛的應用。聚乙二醇衍生產品種類繁多，同官能團和異官能團的聚乙二醇；甲氧基聚乙二醇；磷脂聚乙二醇；膽固醇聚乙二醇；硬脂酸聚乙二醇等等。每個品類都可以和不同基團連接，常見的基團有氨基；羧基；巰基；羥基；醛基；馬來酰亞胺；琥珀酰亞胺酯；不同基團之間可以自由組合連接在聚乙二醇兩端。

硝酸纖維素膜（NC膜）吸附蛋白的重要性、影響因素常問題處理2023/01/12

硝酸纖維素膜(nitrocellulosefiltermembrane，簡稱NC膜)，在膠體金試紙中用做C/T線的承載體，同時也是免疫反應的發生處。蛋白質吸附的重要性在免疫層析檢測中，蛋白質固著于NC膜作為待測樣本的捕獲試劑。由于檢測結果取決于捕獲試劑在膜上達到良好的吸附效果，因此蛋白質在膜上均一、良好的吸附對檢測結果非常重要。自從NC膜第一次應用于蛋白質吸附以來，已有相當多的關于蛋白質吸附于NC膜的研究，但蛋白質吸附于NC膜的確切作用機理仍然不能確定。雖然多種作用力在結合中起到作用，尤其比如疏