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血清使用常見問題2023/05/25: 血清使用常見問題1、血清保存的最好方法？我們建議血清最好保存在-20℃保存。若一次使用不完一瓶，建議無菌分裝于適當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)冷凍備用。2、如何解凍血清，才能保證其質(zhì)量不會(huì)受損？我們建議將血清從冷凍箱取出后，置于2℃～8℃冰箱中解凍，然后在室溫下全融，解凍過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3、為什么血清在解凍后會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀？應(yīng)該怎樣處理？血清中絮狀沉淀產(chǎn)生的原因有很多，其中還是由于血清中脂蛋白的變性所致，而血纖維蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血清解凍后，也會(huì)存在于血清中，這也是造成沉淀的主要原因，但這些

無血清細(xì)胞培養(yǎng)基的分類2023/05/24: 無血清培養(yǎng)基是繼天然培養(yǎng)基，合成培養(yǎng)基之后的第三類培養(yǎng)基。與傳統(tǒng)的培養(yǎng)基相比較，無血清培養(yǎng)基是不含動(dòng)物血清或其他生物提取液，但仍可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)、繁殖的一種培養(yǎng)基。無血清培養(yǎng)基由于其組成成分相對(duì)清楚，制備過程簡(jiǎn)單，在現(xiàn)代生物技術(shù)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。無血清培養(yǎng)技術(shù)也是闡明細(xì)胞生長(zhǎng)，增值，分化及基因表達(dá)調(diào)控的基礎(chǔ)研究問題的有力工具。目前，無血清培養(yǎng)基的研究有兩個(gè)方向：一是培養(yǎng)基中不含有任何動(dòng)物來源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當(dāng)前應(yīng)用較多的無血清培養(yǎng)基歸納為

標(biāo)準(zhǔn)溶液如何配置2023/05/22: 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程標(biāo)準(zhǔn)溶液是指已知準(zhǔn)確濃度的試劑溶液。標(biāo)準(zhǔn)溶液包括鐵、錳、鎳、銅、硅、釩等金屬、非金屬還有石油類、陰離子、標(biāo)準(zhǔn)樣品及標(biāo)準(zhǔn)溶液（單標(biāo)及混標(biāo)共100多種）。標(biāo)準(zhǔn)溶液有兩種配制方法：(1)直接配制法準(zhǔn)確稱取一定量的基準(zhǔn)試劑，溶解后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中，加試劑水稀釋至刻度，充分搖勻，根據(jù)稱取基準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)量和容瓶體積，計(jì)算其準(zhǔn)確濃度。(2)間接配制法間接配制法又稱標(biāo)定法，是指將要配制的溶液先配制成近似于所需濃度的溶液，然后再用基準(zhǔn)物或標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定出它的準(zhǔn)確濃度。注意事項(xiàng)(1)稱樣時(shí)要準(zhǔn)確稱量，且

胎牛血清運(yùn)用中遇到的常見問題2023/05/18: 1、怎樣貯存和凍結(jié)血清才不會(huì)使產(chǎn)質(zhì)量量受損?將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須留意的是，融解過程中必須規(guī)矩地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)間貯存在2-8℃時(shí)，血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)或許集合而形成沉積或可見的混濁。因而，推薦在-20℃以下貯存血清，并防止反復(fù)凍融。血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超越一個(gè)月。若一次無法用完一瓶，主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2、血清中包括絮狀沉積，它們是什么，怎樣處理?

細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)2023/05/17: 何為細(xì)胞培養(yǎng)？細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)是在細(xì)胞房中進(jìn)行，在超凈工作臺(tái)或生物安全柜中，把細(xì)胞處理好，根據(jù)需要加入細(xì)胞培養(yǎng)基，放入細(xì)胞培養(yǎng)瓶/皿或細(xì)胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞就像花花草草，尤其是細(xì)胞株基本每天都要觀察、打理的哦！培養(yǎng)的細(xì)胞從哪里來？1.細(xì)胞株簡(jiǎn)單說就是買的或送的。2.原代細(xì)胞組織或血液中提取的。一般細(xì)胞株可以連續(xù)傳代，而原代細(xì)胞養(yǎng)著養(yǎng)著就掛了。培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式有哪些？1.貼壁生長(zhǎng)必須貼附于支持物表面才能生長(zhǎng)。見于各種腫瘤細(xì)胞等。（你把培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶底朝上，細(xì)

明膠的改性可通過哪三種途徑2023/05/16: 明膠具有許多優(yōu)異的性質(zhì)與性能，但也不可避免地具有一些不足之處，因而需要通過一定的手段來予以彌補(bǔ)和使之消除，或者使之具有新的性質(zhì)與性能，這就是“明膠的改性”。明膠的改性大體上可通過三種途徑，即純物理改性、共混改性和化學(xué)改性。純物理改性純物理改性是指在不添加任何添加劑的情況下，通過明膠本身結(jié)構(gòu)的改變來改變其某些性能。明膠在其制品中是以膠原狀的螺旋構(gòu)象和卷曲構(gòu)象的形式存在的，兩種構(gòu)象比例的不同，對(duì)明膠制品性能的影響很大。例如，明膠溶液或涂布成膜冷凝后放置一定時(shí)間，使明膠分子構(gòu)象轉(zhuǎn)變形成高度螺旋構(gòu)象，此

生物實(shí)驗(yàn)中剛果紅是怎么用的？2023/05/15: 剛果紅染色法特指用剛果紅將纖維素染色的方法。剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，常用的剛果紅染色法有兩種。在剛果紅中加入氯化鈉可以可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去。剛果紅的原理：剛果紅篩選主要是根據(jù)菌落降解纖維素,可以形成降解圈,氯化鈉沖洗再烘干后可以讓降解圈看的更清楚,更易觀察、它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng).在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅染色后,再Nacl用漂洗,Nacl可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明圈。剛果

parafilm封口膜使用中的注意事項(xiàng)及應(yīng)用范圍2023/05/12: Parafilm封口膜（貨號(hào)：PM-996）使用中的注意事項(xiàng)：1、溫度特性：當(dāng)溫度超過38℃時(shí)，Parafilm封口膜薄膜性能開始下降，變得難以展開。性能下降的標(biāo)志是薄膜粘性提高，以至于不能在無破裂情況下延伸到我們需要的長(zhǎng)度。Parafilm封口膜薄膜低溫使用范圍取決于其所受機(jī)械作用力的大小。如果Parafilm封口膜薄膜沒有任何伸縮、彎曲，其*可以放入液氮中而不會(huì)出現(xiàn)任何問題。像絕大多數(shù)塑料材料一樣，我們必須要研究材料在干冰和液氮環(huán)境中的脆性。暴露在液氮環(huán)境中的Parafilm封口膜，在回到室

弗氏完/Q佐劑和弗氏不完/Q佐劑的區(qū)別2023/05/11: 弗氏體即弗氏佐劑是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中常用的佐劑，分為不完/Q弗氏佐劑和完/Q弗氏佐劑。不完/Q弗氏佐劑是液體石蠟與羊毛脂混合而成，組分比為1～5：1，可根據(jù)需要而定，通常為2：1.不完/Q佐劑中加卡介苗(最終濃度為2～20mg/ml)或死的結(jié)核分枝桿菌，即為完/Q弗氏佐劑（FCA）。一般注射時(shí)用1/2體積FCA加上1/2體積的抗原進(jìn)行乳化，第二次或第三次注射時(shí)用不完/Q佐劑或不用佐劑。如不加佐劑，則抗原量增大10-20倍。弗氏完Q佐劑：Freund'sAdjuvantComplete弗氏完/Q佐劑是一種

常見七種細(xì)菌鑒定生化反應(yīng)2023/05/10: 各種細(xì)菌所具有的酶系統(tǒng)不盡相同,對(duì)營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)的分解能力也不一樣,因而代謝產(chǎn)物或多或少地各有區(qū)別,可供鑒別細(xì)菌之用.用生化試驗(yàn)的方法檢測(cè)細(xì)菌對(duì)各種基質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物,從而鑒別細(xì)菌的種屬,稱之為細(xì)菌的生化反應(yīng)。(1)、糖(醇)類發(fā)酵試驗(yàn)不同的細(xì)菌含有發(fā)酵不同糖(醇)的酶,因而發(fā)酵糖(醇)的能力各不相同.其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物亦不相同,如有的產(chǎn)酸產(chǎn)氣,有的產(chǎn)酸不產(chǎn)氣.酸的產(chǎn)生可利用指示劑來判定.在配制培養(yǎng)基時(shí)預(yù)先加入溟甲/酚紫［PHS.2(黃色)一6.8(紫色)],當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)酸時(shí),可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S

過氧化氫酶是什么？2023/05/09: 過氧化氫酶是一種普遍存在于幾乎所有生物體內(nèi)的一種抗氧化酶，主要分布于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中。它是過氧化物酶體的標(biāo)志酶,約占過氧化物酶體酶總量的40%。過氧化氫酶是由四個(gè)多肽鏈組成的同源四聚體，每一個(gè)亞基含有超過500個(gè)氨基酸殘基，且每個(gè)亞基的活性位點(diǎn)都含有一個(gè)卟啉血紅素基團(tuán)，用于催化過氧化氫的反應(yīng)。過氧化氫酶的最適pH接近7，最適溫度則因物種而異。過氧化氫酶的主要作用是催化過氧化氫分解為水和氧氣，清除體內(nèi)的過氧化氫，從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御體系的關(guān)鍵

常見細(xì)胞裂解液及其組分2023/05/08: 在許多細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)、純化及蛋白-蛋白互作等免疫實(shí)驗(yàn)（如WB、IP、Co-IP、ChIP）中，細(xì)胞裂解是關(guān)鍵一步。RIPA裂解液RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液，獲得的蛋白樣品可用于常規(guī)WB、IP等實(shí)驗(yàn)。組分：25mMTris-HCl,pH7.6、150mMNaCl、1%NP-40、1%去氧膽酸鈉、0.1%十二烷基硫酸鈉（SDS）。IP裂解液IP裂解液是一種改良后的RIPA裂解液，具中等強(qiáng)度效力，可高效溶解細(xì)胞蛋白，但不會(huì)像RIPA一樣釋放染色體組DNA或破壞蛋白復(fù)合物。適合下游免疫

什么是脯氨酸？他的作用是什么？2023/05/06: 脯氨酸是一種環(huán)狀的亞氨基酸。α-亞氨基酸，中性，等電點(diǎn)為6.30，水中溶解度比任何氨基酸都大，25℃時(shí)100g水中可溶162g左右。易潮解不易得結(jié)晶，有甜味。與茚三酮溶液共熱，生成黃色化合物。一旦進(jìn)入肽鏈后，可發(fā)生羥基化作用，從而形成4-羥脯氨酸，是組成動(dòng)物膠原蛋白的重要成分。羥脯氨酸也存在于多種植物蛋白質(zhì)中，尤其與細(xì)胞壁的形成有關(guān)。植物體在干旱、高溫、低溫、鹽漬等多種逆境下，常常有脯氨酸的明顯積累。我們知道脯氨酸有三種形式DL-脯氨酸，L-脯氨酸、D-脯氨酸，通常所說的脯氨酸就是L-脯氨酸，天

移液槍的原理是什么？2023/05/05: 移液器其實(shí)就是一個(gè)加了彈簧和活塞位置調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)的針筒。至于你問為什么那么精確，其實(shí)微量注射器（微量進(jìn)樣器）也很準(zhǔn)，只不過不能像移液器一樣標(biāo)準(zhǔn)化使用操作。移液器確保反復(fù)使用的要素，主要和密封性有關(guān)。任何廠牌的移液器，最后其實(shí)都是首先拼密封性，其次是調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)的準(zhǔn)確性。密封良好的移液器，只要調(diào)節(jié)機(jī)構(gòu)經(jīng)過校準(zhǔn)并且可以穩(wěn)定保持精度，就不必?fù)?dān)心有問題。移液器的密封性主要有幾個(gè)因素：1）活塞的品質(zhì)活塞的材質(zhì)很重要，要經(jīng)得起長(zhǎng)期與套筒相互摩擦2）套筒的品質(zhì)不能容易彎曲變形或熱脹冷縮3）O型彈性密封圈這個(gè)是耗材，一

PCR技術(shù)是什么？PCR的基本反應(yīng)步驟有哪些？2023/04/27: 一、PCR是什么聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA（或RNA）片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)，是能將微量的DNA大幅增加。因此，無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一丁點(diǎn)的DNA，就能用PCR加以放大，進(jìn)行比對(duì)。這也是“微量證據(jù)”的威力之所在。PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，

在細(xì)胞培養(yǎng)中，如何凍存細(xì)胞2023/04/25: 操作步驟：1.用移液器吸走原培養(yǎng)基，加入適量PBS洗1-2遍；2.加入適量胰酶，置于培養(yǎng)箱中消化；3.待消化到位后加入適量血清或培養(yǎng)基終止消化，800-1000rpm離心3-5min；4.配制凍存液，待細(xì)胞離心后去上清，加入凍存液重懸，轉(zhuǎn)移到凍存管中；5.將凍存管放入程序降溫盒中，-80度過夜，然后轉(zhuǎn)移到液氮中保存。注意細(xì)節(jié)：1.凍存步驟中包含了消化的大部分步驟，注意細(xì)節(jié)相同2.凍存液常規(guī)配比為培養(yǎng)基：血清：DMSO=7:2:1，如果細(xì)胞比較珍貴，可以調(diào)整為血清：DMSO=9:1；3.如果沒有程

DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別？2023/04/24: DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時(shí)又分為高糖型（高于4500mg/L）和低糖型（低于1000mg/L）。高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長(zhǎng)，適于生長(zhǎng)較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別？1、用途不同：低糖DMEM用于養(yǎng)干細(xì)胞可防分化，高糖DMEM可以養(yǎng)大多數(shù)哺乳動(dòng)物的細(xì)胞。2、適用性不同：高糖DMEM適于培養(yǎng)代謝旺盛的細(xì)胞，而低糖適于培養(yǎng)一般代謝水平的細(xì)胞。代謝活躍的細(xì)胞，如ES，低糖培養(yǎng)基

考馬斯藍(lán)染料的原理，及使用及步驟2023/04/23: 考馬斯藍(lán)染料簡(jiǎn)介：考馬斯藍(lán)廣泛用于瓊脂糖或丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的可視化?？捡R斯亮藍(lán)R250（紅色染成藍(lán)色）電泳（更靈敏：可以檢測(cè)到0.1微克蛋白質(zhì)），考馬斯藍(lán)G250（淺綠色藍(lán)色）用于溶液中的蛋白質(zhì)分析（方便-可溶）。兩者都可以用于每種應(yīng)用中，但是它們可以互換使用，因?yàn)樗鼈兛梢詫⒌鞍踪|(zhì)染色成不同的強(qiáng)度和顏色?？捡R斯藍(lán)染料技術(shù)說明：考馬斯藍(lán)R-250和G-250染料是考馬斯染料的兩種最常見的化學(xué)形式，是二磺化的三苯基甲/烷化合物。R-250（紅色）缺少以G-250（綠色）形式存在的兩個(gè)甲基。

透析袋原理是什么？根據(jù)分子量篩選，使用方法的詳細(xì)介紹2023/04/20: 一、透析的原理透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。透析的動(dòng)力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度，通常是4

培養(yǎng)基的種類那么多，怎么給細(xì)胞選擇合適的培養(yǎng)基？2023/04/18: 培養(yǎng)細(xì)胞的重要環(huán)節(jié)有很多，其中很重要的一步就是為細(xì)胞選擇適合的生長(zhǎng)環(huán)境，為其選擇成分適合又營(yíng)養(yǎng)豐富的細(xì)胞培養(yǎng)基。細(xì)胞培養(yǎng)基是供給細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)、維持細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物，種類一般包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基、無血清培養(yǎng)基以及化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基等。這其中又以基礎(chǔ)培養(yǎng)基最為常用?；A(chǔ)培養(yǎng)基屬于合成培養(yǎng)基，是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計(jì)、配制的培養(yǎng)基，其主要成分有氨基酸、碳水化合物、無機(jī)鹽、維生素及其他輔助成分，比如DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12，這些都是應(yīng)用

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