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在試驗中ELISA試劑盒的條件挑選2023/11/02

在ELISA試劑盒中，進行各項試驗條件的挑選是很重要的，其間包括:（1）固相載體的挑選：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。現(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一試驗條件下進行反響，調(diào)查其顯色反響是否均一性，據(jù)此判明其吸附功能是否良好。（2）包被抗體（或抗原）的挑選：將抗體（或抗原）吸附在固相載體外表時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時刻及其蛋

菌種保存的幾種常用方法2023/10/31

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于zui不活躍或相對靜止的狀態(tài)，才能在一定的時間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個因素而設(shè)計的。保藏方法大致可分為以下幾種：1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細菌用），培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅

電泳緩沖液的特點及作用有哪些？2023/10/24

電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成，是電泳場中的導體，也是維持電泳系統(tǒng)恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點：1.TAE是使用緩沖系統(tǒng)。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質(zhì)量(TBE中電泳時測出的相對分子質(zhì)量會大于實際分子質(zhì)量)，且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統(tǒng)進行電泳。TAE的缺點是

ELISA實驗操作要點：酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）四大操作要點2023/10/18

1標本的采取和保存可用作elisa測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血k收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標本可按常

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附）原理及步驟詳解2023/10/12

1.原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結(jié)合原理，對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法，酶聯(lián)免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種，分三個部分組成：免疫識別，信號輸出和數(shù)據(jù)處理。2.步驟：免疫識別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體，而后利用抗體識別待測的抗原（通常是疾病的蛋白質(zhì)生物標記物，病毒，細菌等等，從復雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根過氧化酶（HorseradishPeroxidase,HRP）、熒光或放射性標記的抗體通過直

蛋白免疫印跡的基本原理及操作步驟2023/10/11

基本原理：免疫印跡（WesternBlot）采用的是聚丙/烯酰胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質(zhì)，“探針”是抗體，“顯色”用標記的二抗。SDS-PAGE可對蛋白質(zhì)樣品進行分離，轉(zhuǎn)移到固相載體——例如硝酸纖維素薄膜（NC）上。固相載體可以吸附蛋白質(zhì)，并保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。轉(zhuǎn)移后的NC膜就稱為一個印跡（blot），用蛋白溶液（如5%BSA或脫脂奶粉溶液）處理，封閉NC膜上的疏水結(jié)合位點。用目標蛋白的抗體（一抗）處理NC膜——只有待研究的蛋白質(zhì)才能與一抗特異結(jié)合形成抗原抗體復合物，這樣

如何挑選一款優(yōu)質(zhì)的凍存管？2023/10/07

凍存管主要應(yīng)用于低溫運輸與儲存組織或細胞樣本，常用在生物研究及醫(yī)學領(lǐng)域。1.看材質(zhì)一般凍存管都是由無細胞毒性的材料制備的，實驗室常用的材質(zhì)有塑料和玻璃。但因為玻璃材質(zhì)的凍存管不能用在高速或者超速離心機上，所以用塑料聚丙烯材質(zhì)的凍存管的比較多。聚丙烯的化學和溫度穩(wěn)定性非常好，液氮的氣體狀態(tài)環(huán)境下，可耐低溫至零下187℃。2.看構(gòu)成凍存管一般都由管帽、管體構(gòu)成，分為內(nèi)旋蓋和外旋蓋凍存管。如果樣本要液氮氣相中保存，就用內(nèi)旋凍存管，帶硅膠墊的；如果樣品要放在機械設(shè)備，比如冰箱里保存的話，就用外旋凍存管，

緩沖液的原理2023/09/25

由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用，是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時，H+離子基本上被A-離子消耗：所以溶液的pH值幾乎不變；當加入一定量強堿時，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿，其溶液pH值變化不大，但若加入酸，堿的量多時，緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc

細胞的多樣性在生物體中起到了什么樣的作用？2023/09/20

1、組成和結(jié)構(gòu)細胞是生物體的基本結(jié)構(gòu)單位，它們在組成和結(jié)構(gòu)上具有多樣性。不同類型的細胞具有不同的形態(tài)、大小和內(nèi)部結(jié)構(gòu)。例如，動物細胞和植物細胞的結(jié)構(gòu)存在差異，而同一類細胞內(nèi)部的組織結(jié)構(gòu)也會有細微的變化。2、功能和特化細胞在生物體內(nèi)承擔各種不同的功能和任務(wù)。不同類型的細胞具有特定的功能和特化。例如，神經(jīng)細胞負責傳遞信號，肌肉細胞負責收縮，血細胞負責輸送氧氣等。這種細胞的功能和特化使得生物體能夠協(xié)調(diào)運作。3、分工和協(xié)作細胞之間具有分工和協(xié)作的關(guān)系。不同類型的細胞通過相互配合和協(xié)同工作來完成生物體的各

細胞篩網(wǎng)的使用方法2023/09/15

細胞篩網(wǎng)（產(chǎn)品別名：細胞過濾網(wǎng)）常用于器官培養(yǎng)、組織轉(zhuǎn)運或移植，尤其適用于干細胞和原代細胞過濾，常與流式細胞儀配套使用，是流式細胞分選實驗。細胞過濾器使用堅固的尼龍網(wǎng)制作，主要分為三個篩孔型號：100um，70um，40um，可滿足不同細胞大小的過濾操作。那么怎樣才是正確的細胞篩網(wǎng)使用方法？讓我們一起來看看！使用方法：1.準備濾器：選擇一個合適的細胞篩網(wǎng)，并根據(jù)需要在濾器上加上濾紙，使其更容易使用。2.準備細胞懸液或培養(yǎng)基：將細胞懸液或培養(yǎng)基倒入容器中，并加入需要的藥物、酶、抗生素等。3.過濾細

細胞劃痕實驗的所需材料、實驗步驟2023/09/13

所需材料1、儀器：細胞計數(shù)儀、臺式離心機、CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、移液槍、移液管移液器、4℃和-20℃冰箱、6孔培養(yǎng)板、直尺、maker筆。2、試劑：細胞適配培養(yǎng)基、FBS、PBS、胰酶、樣本溶劑。實驗步驟1、劃線：先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻的劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔，每孔至少穿過5條線；2、鋪板：處于對數(shù)生長期的細胞，胰蛋白酶消化成單細胞懸液，接種于6孔培養(yǎng)板；細胞鋪板6w/孔，接種原則為過夜后融合率達到100%，每孔最終的培養(yǎng)基總量2mL；3、細胞

如何使用超濾管？該如何操作？2023/09/12

1、預(yù)處理：新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預(yù)冷10min。然后將水倒出，置于冰上預(yù)冷2-5min，加樣。舊超濾管：倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍（注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜），置于冰上預(yù)冷2-5min，加樣。2、加樣：如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內(nèi)管倒置1000×g離心1min，移液槍移取適量樣本加入超濾管中。3、離心：配平，12000×g離心（15-30min），等達到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。4、樣本收集：外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清，如需取濃縮后樣本用于其他實驗，則另

透析袋的使用方法的詳細介紹2023/09/08

為防干裂，出廠前透析袋一般都經(jīng)10%的甘油處理，透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì)，它們對蛋白質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)有害，用前必須除去。新購進的普通型透析袋必須經(jīng)過處理才能使用。處理方法如下。方法一：把透析袋剪成適當長度（10-20cm）的小段。在大體積（500ml）的2%（w/v）的碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA2Na（pH=8.0）中將透析袋煮沸10min。用蒸餾水清洗透析袋。放在500ml的1mmol/LEDTA2Na（pH=8.0）中將之煮沸10min。冷卻后，置于

凍存管為什么會爆炸？如何避免？2023/09/05

在實驗過程中我們可能會用到凍存管對樣品進行凍存，但是在用液氮進行凍存的時候經(jīng)常會發(fā)生凍存管爆炸的事件，這不僅會使實驗樣品損失，甚至可能會對實驗人員造成傷害，那么該如何避免這種情況發(fā)生呢？原因：首先，凍存管都是不能直接放到液氮的液相中進行保存的。因為常見凍存管的管身和管蓋材質(zhì)不一樣，在進行冷凍時產(chǎn)生的熱脹冷縮速率也不同。如果將凍存管直接放到液相之中，就可能會讓液氮流到管內(nèi)。在下一次將樣品進行復蘇時，把凍存管放入37℃的水浴當中，管內(nèi)的液氮迅速氣化膨脹，但是氣體不能及時從管內(nèi)跑出去，所以導致凍存管爆

抗體的選擇和保存指南2023/08/30

一、怎樣選擇適合你實驗需要的抗體？1.一抗選擇要點（1）確定抗體的名字，注意中英文名字、它名、亞型等信息。（2）確定你的實驗類型，Elisa，WB，IHC，ICC，還是FACS。一般抗體的說明書都會列出該抗體經(jīng)驗證過適用于何種實驗的類型，如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型，并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型，而僅是說明尚未經(jīng)過此種實驗驗證，請根據(jù)說明書列出的已驗證的類型來選擇適合你實驗的抗體。（3）確定實驗樣本的種屬，Human，Mouse，還是Rat。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗驗證過

即用型透析袋使用方法2023/08/29

一、儲存條件：透析膜浸泡在儲存液中，封放置于4-37°C之間環(huán)境，有效期3年。二、使用方法：1、把透析袋剪成適當長度（10-20cm左右）的小段。2、用去離子水浸泡10分鐘左右，再用去離子水膜內(nèi)沖洗3次。3、不使用的透析膜放回儲存液中，密封保存，接觸透析膜過程中必須戴手套。4、使用時，一端用透析袋夾子夾緊，灌滿水后，用手指適當加壓，檢查不漏，方可裝入樣品。通常要留三分之一至一半的空間，以防透析過程中，袋外的水和緩沖液過量進入袋內(nèi)將袋漲破。裝完樣品后，加樣端用夾子夾緊袋口，可在袋內(nèi)放一玻璃珠，以使

細胞爬片（玻片）的用前準備2023/08/25

細胞爬片又名玻片，是指讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi)，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，免疫組織化學，細胞涂片，原位雜交等。除了在實驗中的使用，實驗前的準備也十分重要，讓我們一起來看看使用前需要做哪些準備吧！用前準備：1、蓋玻片的選擇爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用細胞爬片，價格比較昂貴但是細胞貼壁牢固，拍出照片效果好；2、爬片的剪裁可根據(jù)自己的需要，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色剪裁成合適大小，置于6孔板、12孔板或24孔板；3、爬片的使用前處理將剪裁好的爬片，置

細胞凍存原理及注意事項有哪些？2023/08/23

原理：1.當溫度低至-70℃時，細胞內(nèi)的酶活性全部停止，代謝活動停止，故實現(xiàn)長期保存的目的。2.隨著溫度降低，細胞內(nèi)外的水分都會結(jié)晶，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞，從而引起細胞死亡，特別是0~-20℃的階段，冰晶呈針狀，及其引發(fā)細胞損傷。在不加任何保護劑條件下直接凍存細胞時，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。3.常見的冷凍保護劑是甘油或二甲基亞砜（DMSO）。DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞，

ELISA試劑盒組成與常見ELISA試劑盒分類2023/08/21

ELISA試劑盒主要的組成成份如下：(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；(2)C的抗原或抗體(結(jié)合物)；(3)酶的底物；(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中)；(5)結(jié)合物及標本的稀釋液；(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；(7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的最終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。常見的ELISA試劑盒一、食品安全檢驗ELISA試劑

CCK-8細胞增殖實驗介紹2023/08/18

1）制備細胞懸液，計數(shù)。2）在96孔板中接種細胞懸液，每孔約100μl，同樣的樣本可做3個重復。3）將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)一段時間（37℃,5%CO2），細胞貼壁需要大約2-4h，如果是懸浮細胞，該步驟可以省去。4）每孔各加入10μlCCK-8溶液，由于加入的CCK-8量比較少，可能會因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議在加完試劑后輕輕晃動培養(yǎng)板以幫助混勻，或者直接配置含10%CCK-8的培養(yǎng)基，以換液的形式加入。另外注意，加樣的過程中盡量不要產(chǎn)生氣泡。5）將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱中孵育1-4h。因為