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冰凍切片包埋劑制備注意事項2024/07/01

操作步驟1、冰凍制片組織常規取材。2、取材后的組織材塊用干擦布或吸水紙充分吸干表面水分。3、在冷凍切片機里預冷的組織托上滴加冷凍切片組織包埋劑。4、待包埋劑底部變白后放上組織材塊。5、迅速放上冷凍錘(低于-25℃)，待組織與包埋劑冷凍凝固后取下冷凍錘。6、將組織托夾入切片夾頭，進行切片。7、切片完成后可將組織托置于室溫下3-5分鐘解凍后變軟，用水將包埋劑沖洗干凈。8、將組織放入包埋盒，浸入中性緩沖福爾馬林固定液中進行組織固定。結果1、包埋效果良好:包埋劑均勻圍繞組織，冷凍后包埋劑和組織變白，硬度

胎牛血清如何正確存放與解凍2024/06/24

一、如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?未拆封的血清，一般情況下應存放于-10℃至-20℃，在產品規定的效期內均可使用，若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內，再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是，融解過程中必須規則地搖晃均勻。溶解后建議盡快使用，若長時間儲存在2-8℃，血清中的各種（脂）蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。二、血清中絮狀沉淀

即用型透析袋與干型透析袋的區別2024/06/21

一、即用型透析袋即用型透析袋的制造過程沒有重金屬污染及硫化物，無需預處理，只需用去離子水清洗即可使用，滿足對截留分子量精確性和膜純度的應用。1.韌性膜材料，不易破損2.雜質含量極少，可無需預處理，只需用去離子水清洗即可使用3.孔徑標準均一4.對溶質的吸附性小5.可選分子量范圍廣100-3000006.多種扁平寬度可選7.生物技術膜，不含硫化物及金屬雜質二、普通干型透析袋1.PH穩定范圍:5-92.污染物水平:硫化物3.化學兼容性:與很多鹽兼容，比如CaCl2,(NH4)2SO4；還可與分子生物學

ELISA中必要的三個試劑2024/06/18

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分：(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中);(5)酶聯物(結合物)及標本的稀釋液;(6)洗滌液;(7)酶反應終止液。免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下一般可保存6個月以上。有些不完整的試盒，僅供應包被用抗原或抗體，檢測人員需自行包被。以下簡述固相載體和包被過程。固相載體固相載體在ELISA測定

實驗中細胞爬片的準備及操作2024/06/17

細胞爬片的準備1、蓋玻片的選擇：爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用細胞爬片（價格比較昂貴）但是細胞貼壁牢固，拍出照片效果好。2、爬片的剪裁：可根據自己的需要，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色剪裁成合適大小，置于6孔板、12孔板或24孔板。3、爬片的使用前處理：將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時，再用三蒸水沖洗3遍。細胞爬片的操作1、胰酶消化細胞后計數重懸細胞于培養基中。2、加細胞前，根據玻片的大小，先在

如何使用細胞篩網2024/06/13

準備濾器：選擇合適的細胞篩網，并根據需要在濾器上加上濾紙，使其更容易使用。準備細胞懸液或培養基：將細胞懸液或培養基倒入容器中，并加入需要的藥物、酶、抗生素等。過濾細胞：將濾器輕輕地壓在溫和的細胞懸液或培養基中，讓其均勻地經過細胞篩網的孔。收集過濾的細胞：過濾后的細胞可以直接通篩網被收集或者用無菌的器具從容器中進行收集。細胞培養：若需要培養篩選的細胞，則將其收集到未被污染的細胞培養基中，并按照培養基配方進行培養。此外，細胞篩網的使用還需注意以下幾點：1.細胞篩網的類型。細胞篩網通常分為單層和多層兩

PBS緩沖液的配置方法及作用2024/06/11

PBS緩沖液，是生物化學研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI，一般作為溶劑，起溶解保護試劑的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二級解離，緩沖的PH值范圍很廣，而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2，以提供二價陽離子。01、配置方法分別稱取8g的NaCI、0.2g的KCI、1.44g的Na2HPO4、0.24g的KH2PO4，溶于800ml蒸餾水中，使用HCI調

影響ELISA試劑盒測定成果的解決辦法2024/06/06

一、類風濕因子人血清中IgM、IgG型類風濕因子（RF）能夠與ELISA系統中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合，然后導致假陽性。解決辦法:1.用F（ab）2替代完好的IgG；2.標本用聯有熱變性（63℃，10min）IgG的固相吸附劑處理（將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有用）；3.檢測抗原時，能夠用2-巰基yi醇等加入到標本稀釋液中，使RF降解。二、補體ELISA系統中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發作變構，其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來，使C1q能夠將二者連接起來，

什么是細胞培養？2024/06/04

培養的細胞從哪里來？1.細胞株簡單說就是買的或送的。2.原代細胞組織或血液中提取的。一般細胞株可以連續傳代，而原代細胞養著養著就掛了。培養細胞的生長方式有哪些？1.貼壁生長必須貼附于支持物表面才能生長。見于各種腫瘤細胞等。（你把培養皿或培養瓶底朝上，細胞也不會掉下來。2.懸浮生長于懸浮狀態下即可生長，不需要貼附于支持物表面。見于各種造血系統腫瘤細胞等。每代貼附生長細胞的生長過程分為：1）游離期：細胞接種后在培養液中呈懸浮狀態，也稱懸浮期。2）貼壁期：細胞貼附于（膠原、玻璃、塑料、其他細胞等）。3

即用型RC膜的使用方法2024/05/20

一、膜技術參數：生物技術RC膜（再生纖維素），重金屬離子和硫化物含量為痕跡級別，干型，膜表面有甘油保護層，使用前用溫水（60℃以內）浸泡10分鐘左右后，再以蒸餾水沖洗干凈即可。RC膜擁有廣泛的化學兼容性，能承受弱酸弱堿或稀釋的強酸強堿，絕大部分的醇類物質。弱極性有機物或者稀釋過的強極性有機物，如DMSO，接觸強極性有機溶劑可能會損害RC膜。標準RC膜能適用pH值2-12以及溫度4-132°C之間。二、儲存條件:透析膜表面有甘油保護層，封放置于4-37°C之間環境。建議密封放在冰箱冷藏室4℃保存。

尖底離心管與圓底離心管的區別2024/05/16

尖底離心管和圓底離心管的主要區別在于它們的底部形狀和設計，這些差異影響了它們的使用范圍和性能。以下是兩者之間的主要區別：形狀：①尖底離心管的底部是尖銳的錐形，這種設計可以集中樣品的沉淀于底部，從而提高沉淀物在底部的濃度和純度。②圓底離心管的底部是圓形的，有助于平衡樣品的沉淀和防止樣品干燥。用途：①尖底離心管則更適合用于分離較大的固體，如細胞、組織等，以及在需要進行密度梯度收集的情況下。②圓底離心管通常用于沉淀較小的顆粒物或分離液體中的成分，以及在進行加熱或高速旋轉的實驗時，因為它們的密封性較好。

影響培養基滅菌效果的因素有哪些2024/05/11

1.營養成分的保持濕熱滅菌時，微生物被殺死的同時，培養基的營養成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸和色氨酸也有相當數量被破壞。在熱的作用下某些營養成分還可能因受熱而相互之間發生反應，造成培養基中原有營養成分的數量變化，因而影響培養基質量。2.微生物的耐熱性細菌芽孢的熱阻較大，滅菌所需要的時間取決于把細菌芽孢減少到所規定數目的時間。3.pH值pH值對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時，微生

牛血清白蛋白在生化實驗中的作用2024/05/10

牛血清白蛋白（BSA）在生化實驗中有廣泛的應用,接下來為大家介紹其中兩種作用。牛血清白蛋白測定蛋白濃度：按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白標準）+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標準液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、20ul將蛋白標準液加入96孔板的第1~8標準孔中，在其他樣品孔中加入10ul待測樣品。分別加PBS定容至20ul。各孔中加入200ulBCA工作液，室溫放置2小時。用酶標儀測定蛋白濃度：測定A562，依標準曲線算出蛋白濃度。牛血清白蛋白SDS-PA

透析袋的使用技巧2024/04/29

1）除鹽透析時將高鹽的樣本加入透析袋中，夾緊，用你選擇的保存液進行透析，一般在2-8度透析過夜，中間要更換一到兩次透析液，另外透析液體積盡量大些。先把透析液放進容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進去，這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的，幾乎整個透析袋都與透析液接觸，溶液的置換面積最大，置換速度最快。如果夾子很穩，那就夾好，先把透析液放進容器中（容器的直徑小于透析袋長度），再將夾好的透析袋豎直放進去，這樣透析袋與透析液的接觸面積是最大的，幾乎整個透析袋都與透析液接觸，溶液

ELISA和WB區別2024/04/24

ELISA（酶聯免疫吸附試驗）用到了免疫學原理和化學反應顯色，待測的樣品多是血清、血漿、尿液、細胞或組織培養上清液，因而沒有用到組織包埋、切片等技術，這是與免疫組化的主要區別，操作上開始需要將抗原或抗體結合到固相載體表面，從而使后來形成的抗原-抗體-酶-底物復合物粘附在載體上，這就是“吸附”的含義。免疫組化和elisa所用到的原理大致相同，只是因為所檢測的樣品不同，從而在操作方法上有所不同。elisa多用于定量分析，其靈敏度非常高。Westernbolt（蛋白質印跡法）先要進行SDS-PAGE，

針頭式過濾器的使用方法2024/04/22

1.確保針頭式過濾器的濾芯是干凈和完好的，不存在損壞或污垢。確保濾座和濾頭也是完好的，沒有任何堵塞或損壞。收集所需的工具和材料，如螺絲刀、密封膠、連接管等。2.安裝過濾器:根據需要選擇合適的位置來安裝過濾器。確保過濾器安裝的位置能夠方便操作和維護，并且不會對其他設備的正常工作造成于擾。根據管道的直徑，選擇合適的連接管，并使用密封膠確保連接緊密。使用螺絲刀將過濾器固定在合適的位置上。3.準備濾芯:將濾芯按照過濾要求選擇合適的型號，并確保濾芯的有效期沒有過期。如果需要，將濾芯浸泡在清水中一段時間以去

爬片的特點與注意事項2024/04/19

爬片又名細胞爬片，是指讓玻片浸在細胞培養基內，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，免疫組織學，冰凍切片，細胞涂片，原位雜交等。細胞爬片特點1.玻片表面經過TC處理，雙面均可使用.2.ybeita射線滅菌,保證無菌.3.使用便捷,只需打開包裝,將爬片放入孔板內,將細胞懸液滴到爬片上即可培養.4.爬片厚度為0.17mm,直徑為8mm/14mm/20mm/25mm.分別適用于48孔細胞培養板/24孔細胞培養板/12孔細胞培養板/6孔細胞培養板5.吸附強：該玻片表面具有陽離子電荷,可以通過靜電作用吸附冰凍

B27和N2添加劑之間的區別2024/04/15

B27添加劑和N2添加劑是用于神經干細胞培養的不同類型的營養因子，它們的主要區別在于成分和用途。B27添加劑是一種無血清培養液中的營養因子，含有更多的添加成分，有利于干細胞的恢復和維持。它通常用于人的神經干細胞原代培養。相比之下，N2添加劑是用于神經元培養的無血清培養液中的營養因子，適用于鼠的神經元培養。在某些情況下，如人的神經干細胞培養，可以先用B27添加劑進行成球，之后更換為N2添加劑進行長期培養。需要注意的是，Invitrogen出品的B27添加劑有四種類型，建議選用不含視黃酸(RA)的那

細胞凋亡檢測實驗原理2024/04/07

細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合，是細胞遵循一定規律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態學和生物化學特征。在形態上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸，細胞變園，細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體，凋亡小體最后被吞噬細胞吞噬消化。在凋亡過程中細胞內容物

超濾管的使用方法有哪些？2024/04/01

1、預處理新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預冷10min。然后將水倒出，置于冰上預冷2-5min，加樣。舊超濾管：倒出管內的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍（注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜），置于冰上預冷2-5min，加樣。2、加樣如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內管倒置1000×g離心1min，移液槍移取適量樣本加入超濾管中。3、離心配平，12000×g離心（15-30min），等達到目的轉速后方可離開。4、樣本收集外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清，如需取濃縮后樣本用于其他實驗，則另取外管，