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上海聯碩生物科技有限公司
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電泳緩沖液具有哪些特性2025/04/01
電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統的一個重要組成,是電泳場中的導體,也是維持電泳系統恒定pH值的必要條件。常見的核酸電泳緩沖液有:TAE、TBE、TPE和MOPS等。電泳緩沖液的特點:1.TAE是使用的緩沖系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量(TBE中電泳時測出的相對分子質量會大于實際分子質量),且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種緩沖液快約10%,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果,此外,回收DNA片段時也易用TAE緩沖系統進行電泳。TAE的缺點
確保細胞培養實驗結果穩定的要點2025/03/24
在細胞培養過程中,無菌操作是確保實驗成功的關鍵步驟之一。細胞培養的無菌環境可以有效防止外源性細菌、真菌和病毒的污染,從而保證細胞的純度和生長狀態。本文將介紹無菌操作的重要性,以及一些常用的無菌技術和注意事項,幫助實驗人員進行高質量的細胞培養。無菌操作的重要性細胞培養實驗的成功與否直接依賴于細胞的純度和生長狀態。任何微小的污染都可能導致實驗結果的偏差或失敗。無菌操作的目的是消除和預防細胞培養過程中的污染,確保細胞的純度和生長環境的穩定性。通過無菌操作,我們可以盡可能減少以下問題的出現:外源性細菌、
細胞培育所需求的8大基本條件2025/03/24
1.溫度細胞溫度過低時細胞成長緩慢甚至不成長。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有割裂分解能力。溫度過高導致細胞。這主要是由酶和蛋白質所需求的適溫度決定的。大都生物大分子遇到高溫后簡單導致空間結構改動或者喪失(變性)。細胞膜遇到高溫后簡單變化。2.pH過酸或過堿可導致細胞。這主要與蛋白質的變性和細胞膜的結構受損有關。3.透壓細胞內外可溶于水的物質份額和品種決定細胞的脹大與收縮程度,因為細胞膜是半透膜,只允許對自己有利的物質經過。4.細胞養物養分物和水一同,又名細胞培育液,培育液中含有細胞增殖和成長所
TRIZOL法如何提取細胞中的總RNA2025/03/18
RIZOL是一種總RNA抽提試劑,TRIZOL在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性,是最常見的RNA提取方法之一。實驗試劑及原理:(1)TRIZOL含有苯酚、異硫氰酸胍等物質,能迅速破碎細胞并抑制細胞釋放出的核酸酶。TRIZOL的主要成分是苯酚。TRIZOL在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性,因此常用于對純化RNA及標準化RNA的生產。(2)氯仿:其作為有機溶劑可以快速破壞細胞、使內容物釋放、去除勻漿中的脂溶性雜質;可以抑制RNA酶的活性,并使蛋白質變性,易于通過離心去除。(3)異丙醇:用
馬血清在細胞生物學領域的作用2025/03/06
馬血清是采用健康馬血液為原料,經無菌采集、分離、微孔過濾后而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、低內毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,促細胞生長繁殖效果好,在細胞實驗中是常用的試劑。以下是馬血清在細胞生物學中的作用:1、馬血清可用于細胞培養或誘導樹突狀細胞,且細胞生長、增殖狀況良好。有研究人員分別用胎牛血清和馬血清培養馬單核細胞來產生樹突狀細胞(eqMoDC),結果發現,馬血清馬血清生成的eqMoDC與FBS生成的eqMoDC沒有區別。然而,與馬血清補充培養基一起孵育的eqMoDC在從
透析袋的使用方法2025/02/25
透析袋的選擇1,正確選擇合適的截留分子量截留分子量的選擇是以預留在膜內的大分子的分子量和將要被除去的小分子污染物的分子量為基礎的。為達到合理有效的分離,需分離的兩種物質分子量的比率至少為25,選擇截留分子量的經驗法則:選擇截留分子量值約為要保留的大分子分子量的一半,以獲得至少90%的保留率。2,正確選擇扁平寬度透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15厘米的透析袋。3,透
聚合酶鏈反應2025/02/19
PCR由變性–退火–延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板–引物結合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留
姬姆薩染色法的操作步驟及注意事項2025/02/10
操作步驟:1、滴加姬姆染色液A液(0.5-0.8ml)于涂片上,并讓染液覆蓋整個標本涂色片染色1分鐘。2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面(滴加之量為A液的2-3倍)以洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀,使兩液充分混合,染色3-10分鐘。3、水洗(沖洗時不能先倒掉染液,應以流水沖去,以防有沉渣沉淀在標本上)。4、干燥,鏡檢。注意事項:1、染色時間要視何種標本,涂片薄厚,有核細胞多少,何種細胞及溫室等而定;通常染血液涂片時滴加B液后染1-3分鐘即可,染骨髓片則應不少于5分鐘。2、做骨髓涂片時因為骨髓纖
ELISA實驗前務必注意事項2025/02/05
目前很多人在訂購ELISA試劑盒的時候會問到一些關于試劑盒的實驗操作步驟及應注意的哪些問題,下面我司針對一些初學者,將ELISA實驗前的注意事項做了一份報告如下:請大家在實驗前務必注意。1、仔細閱讀說明書2、檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期,請勿使用。3、按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)4、標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存5、準備好所有實驗額外所需物品,(比如移液器,試管,清洗器,酶標儀)6、按說明書將
細胞染色的方式2025/01/21
細胞染色是生物學研究中常用的技術,它涉及到使用特定的染料或熒光探針來觀察和分析細胞的結構和功能。以下是一些常見的細胞染色方法和染料:瑞氏染色(Wright'sstain)染液主要由堿性染料亞甲藍(美藍)和酸性染料伊red溶于甲醇配置形成。操作簡單,染色時間短,對細胞質成分及中性顆粒染色效果較好。染色效果較差,容易退色,對細胞核染色效果較姬姆薩染色法差。保存時間短,適用于臨時性檢驗,如血涂片血細胞分析。姬姆薩染色(Giemsa'sstain)染液主要由堿性染料天青色素、酸性染料伊red、甘油和甲醇
胰酶的作用和應用2025/01/15
胰酶是經提取、精制、復配而成的一種復合酶,含有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等,具有較強的分解蛋白質及脂肪等能力,廣泛應用于食品、醫療、釀造、絲綢、制革等行業。應用領域:1、胰酶應用在動物蛋白水解,如雞豬牛等家禽肉類、骨類肉副產品、魚蝦蚌類等水海產品的蛋白水解,生產各種肉類香精、骨湯料、肉類及海產品的抽提物。2、胰酶是一種無毒的蛋白質,已成功應用于洗滌劑用酶工業,可添加在普通洗衣粉、濃縮洗衣粉和液體洗滌劑當中,既可用于家庭洗衣,也可用于工業洗衣,可以有效的去除蛋類、乳制品、或肉汁、菜汁等蛋白類的污漬,另
為什么要選擇超低吸附產品2025/01/06
超低吸附系列產品與傳統培養表面有什么不同?該怎么選?細胞培養中,除了選擇合適的培養試劑搭配優化后的培養條件,還需要謹慎選擇合適的培養器皿,對細胞的生長和實驗結果的準確性有至關重要的影響。1)用于貼壁細胞的TC處理培養表面TC處理表示該器皿經過表面的改性處理,適合貼壁細胞的培養。LANSO多數細胞培養耗材都經過TC處理,能夠優化貼壁效果,提高培養效率。2)用于懸浮細胞的未經處理培養表面高質量,透光良好的聚苯乙烯表面疏水,是懸浮細胞培養的理想選擇,也適用于各種生化檢驗。使用這種表面,細胞可以在懸浮的
如何配置PBS2025/01/02
PBS作為生物實驗中試劑,PBS是磷酸緩沖鹽溶液,一般作為溶劑,起溶解保護試劑的作用。一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。它具有鹽平衡、可調整適宜pH、可以緩沖pH等特點。PBS、蒸餾水和生理鹽水三種溶劑該怎么選擇呢?蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結構及生物特性;而生理鹽水不具有調整pH的作用,對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應。在實驗室也常見PB、PBST溶液。PB溶液的成分通常有磷酸鈉和磷酸鉀。若只是化學反應,用PB溶液就行。在PB的基礎上按照一定比例加
Eppendorf移液槍使用說明2024/12/24
操作步驟:1.移液槍的選擇:根據實驗的需要,選擇合試量程的槍。以滿足既能吸取所需的體積為準,減少多次操作所造成的誤差。在能滿足要求的情況下,盡量選擇量程較小的槍。2.量程的調節:將移液器橫置,水平放至自己的眼前,通過調節輪慢慢地將容量值調至預想值,從而避免視覺誤差所造成的影響。在容量設定時,還有一個需要特別注意的地方。當我們從大值調整到小值時,剛好就行;但從小值調整到大值時,就需要調超三分之一圈后再返回。3.槍頭(吸液嘴)的裝配:將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合
緩沖液的原理及作用2024/12/18
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由于溶液中存在足夠量的堿A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時,H+離子基本上被A-離子消耗:所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強堿時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。在緩沖溶液中加入少量強酸或強堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時,緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關。0.1mol·L-1HAc和0.1mol·L-1NaAc
新品推薦 | PVDF轉印膜國產平替版上線!2024/12/11
貨號產品名稱規格LS-PVDF-045-ZPVDF轉印膜,0.45μm(30cmx3m)1卷/盒LS-PVDF-022-ZPVDF轉印膜,0.22μm(30cmx3m)1卷/盒主營品牌:Lanso、Ameko、Sigma、Amresco、Abcam、Spectrum、Axygen、Corning、Gibco、Hyclone、Invitrogen、Millipore、Roche、Aladdin、Tci、Merck、Qiagen、Supelco、Vetec、Sab、Oxoid、Acros、Viska
脂糖凝膠的制作及瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧2024/12/10
瓊脂糖凝膠電泳與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有"分子篩"和"電泳"的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量,而且還取決于分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由于其孔徑相比于蛋白質太小,對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道,故瓊脂糖凝膠電泳是核酸分析常用的實驗技術。瓊脂糖凝膠電泳操作簡單、快速,通過調整其使用濃度,使得分辨率達到大多數實驗的要求,因此成為分離、鑒定、純化核酸分子的
超低吸附細胞培養板的特點2024/12/06
三維細胞培養技術(throe-dimensionalcellculture,TDCC,簡稱3D培養)是指通過細胞聚集建立細胞球或將細胞嵌入支架上或支架內來模擬真實生物體組織的ECM(細胞外基質),進而在一定程度上模擬體內微環境。3D培養技術既能保留體內細胞微環境的物質及結構基礎,又能展現細胞培養的直觀性及條件可控的優勢。3D細胞培養優勢:-細胞形態和功能更穩定-模擬體內細胞的微生物環境-提供更準確的藥物篩選策略3D細胞培養應用:-藥物篩選、藥物機制研究-組織工程和再生醫學-類器官和干細胞模型研究
N2添加劑的使用方法2024/12/03
GibcoN2添加劑基于Bottenstein'sN-1配方,是一種化學成分確定的無血清添加劑。可用于支持源自外周神經系統、中樞神經系統、原代神經母細胞瘤及有絲分裂后神元經的生產和表達。N2添加劑作為100X濃縮液提供,可與補充生長因子后的Neurobasa培養基配合使用。同時它也可以與DMEM配合使用。使用方法:1、N2細胞培養添加劑是100X濃度。2、用前請用基礎培養基(如Neurobasal)稀釋到1X。3、如準備100ml培養基:請將1ml的N2細胞培養添加劑(100X)加入到99ml的
細胞爬片的特點,操作注意事項及其保存方式2024/11/27
在醫學生物研究中,免疫熒光檢測等需用到細胞爬片。細胞爬片是什么?其名為爬片,外文名稱為RoundCoverslip,用于各類細胞培養板中,讓細胞在爬片上生長,后續實驗可直接使用,避免了細胞從培養板轉移到載玻片上的損傷。細胞爬片采用玻璃片,經滅菌,TC等處理后制作而成,可促進細胞在玻片上貼壁生長與形態伸展,在后期免疫組化、免疫熒光、原位雜交等處理過中也不易脫片。細胞爬片特點以及規格:-無污染,免清洗,節省實驗員的時間。-γ射線滅菌,無熱源、無DNA酶、無RNA酶。-化學穩定性好,耐受實驗室常用溶劑
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