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重組蛋白真核表達采用原核表達系統進行研究，主要方法是將已克隆到目的基因DNA的片段的載體轉化到細菌中，通過IPTG誘導和終純化獲得所需的目的蛋白。其優點是可以在短時間內獲得基因表達產物，所需成本相對較低。目前的表達系統各有利弊，但一般理想的表達系統滿足以下幾點：一是特異性，不受其他內源性因素影響，只能通過外源性無毒物激活。二是不干擾，不干擾細胞通路。以及誘導劑的誘導性、生物利用度、可塑性和劑量依賴性。因此，在選擇表達系統時，必須充分考慮各種因素，如蛋白質性質、實驗條件、生產成本、表達水平和安全性
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重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態兩種保存形式，原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態，真核細胞表達的重組蛋白為溶液態保存，這樣使得重組蛋白非常穩定，在-80℃條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解，其中溶解的方法非常關鍵，因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程中也需要仔細注意。重組人BMP4的分泌表達優點:1、一些可被細胞內蛋白酶所降解的蛋白質分泌到周質或培養基中可增加其穩定性；2、有些在細胞內表達時無活性的蛋白分泌表達時能夠按適當的方式進行準確折疊，增加到蛋白
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真核表達細胞表達產物在分子結構、理化特性和生物學功能方面更接近于天然的高等生物蛋白質分子。原核基因表達調控與真核存在很多共同之處。但因原核生物沒有細胞核，亞細胞結構及其基因組結構要比真核簡單得多。1.原核基因轉錄調節特點⑴σ因子識別特異啟動序列，不同的σ因子決定特異基因的轉錄激活，決定mRNA,rRNA和tRNA基因的轉錄。⑵除個別基因外，原核生物絕大多數基因按功能相關性成簇的串聯、密集于染色體上，共同組成一個轉錄單位——操縱子。一個操縱子只含一個啟動序列及數個可轉錄的編碼基因。2.真核細胞結構
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哺乳動物細胞自身具備蛋白折疊和翻譯后修飾的功能，其表達的重組蛋白在分子結構、理化性質和生物學功能方面接近于天然的高等生物蛋白質分子，更有可能獲得與天然分子相同的生物活性。哺乳動物瞬時表達重組蛋白服務系統能表達天然結構完整的重組蛋白，是廣泛應用的人類復雜糖基化蛋白的表達系統，生物活性接近于天然蛋白質，是活性蛋白因子及各類受體蛋白的表達系統，在生物制藥領域應用較廣,60%以上的的藥用蛋白產品由哺乳動物細胞表達系統獲得。哺乳動物細胞瞬時轉染能在短期內快速表達高活性蛋白，滿足蛋白制備的需求。哺乳動物瞬時
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哺乳動物細胞真核表達系統是哺乳動物細胞經過翻譯和再加工后產生的外源蛋白，在活性上遠優于原核表達系統和酵母、昆蟲細胞等真核表達系統，更接近天然蛋白。哺乳動物細胞表達系統可以提供較接近自然狀態的重組人蛋白的翻譯后修飾。在蛋白質表達過程中，會形成接近天然蛋白質的蛋白質折疊和聚合，具有活性蛋白質所必需的空間結構和修飾。哺乳動物細胞經過翻譯和再加工后產生的外源蛋白比原核表達系統和真核表達系統如酵母和昆蟲細胞要好得多，更接近天然蛋白。這一特性使得哺乳動物細胞表達系統廣泛應用于重組蛋白藥物，特別是治療性重組單
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化學感受態細胞該菌株衍生自大腸桿菌菌株B，具有lon和ompT蛋白酶缺陷的優點，是目前應用廣泛的表達宿主菌之一，其操作方法如下：1、化學感受態細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，6分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手滑動EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。2、42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置5分鐘，晃動會降低轉化效率。3、向離心管中加入0.9mL室溫S.O.C.(S.O.C.營養豐富，可提高轉化效率)或LB培養基。4、30℃，250rpm復蘇60分鐘。當
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藥物是不能亂吃的，需要在醫生的指導下服用！重組人干擾素α2b又叫長生扶康，是一種微黃色或白色疏松體，溶解后為澄明液體，無肉眼可見的不溶物。重組人干擾素α2b通過肌肉或皮下注射，血液濃度達峰時間為3.5～8小時，消除半衰期為4～12小時。腎臟分解代謝為干擾素主要消除途徑，而膽汁分泌與肝臟代謝的消除是重要途徑。肌內注射或皮下注射的吸收超過80%。重組人干擾素α2b用法用量1.慢性乙型肝炎：皮下或肌內注射，3～6×106IU/日，連用四周后改為3次/周，連用16周以上。2.慢性粒細胞白血病：3～5×1
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哺乳動物細胞真核表達系統在表達過程中有翻譯后修飾和折疊的功能，這一特點使其蛋白更接近天然蛋白，具備天然蛋白必須的空間結構和修飾，與天然蛋白有相同的生物活性，哺乳動物細胞表達系統在功能蛋白、抗體生產、臨床疫苗的研發和生產中應用較為廣泛。原核表達系統具有表達水平高、操作簡單、周期短、易于大規模高密度培養、成本低等優點，而對于全抗體和糖蛋白類生物藥物來說，表達產物多肽鏈的折疊、二硫鍵的形成、糖基化的有無以及糖基化的類型常常影響表達產物的合成分泌、生物活性、體內穩定性以及免疫原性等特性。由于原核細胞缺少
