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北京諾博萊德科技有限公司

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71812Fast HiFi PCR Master Mix(含染料)

  • 公司名稱:
  • 更新時間:
  • 所 在 地:
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  • 北京諾博萊德科技有限公司
  • 2025-04-23 09:35:57
  • 北京市
  • 北京
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【簡單介紹】

品牌 NobleRyder/諾博萊德 貨號 71812
規格 5x 1ml / 100x 1ml 供貨周期 現貨
主要用途 2× FastHiFi PCR Mix是長片段、超保真、快速擴增的shou選產品 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥
2× FastHiFi PCR Mix為多種采用zui xian進基因工程改造而來的超保真酶添加延伸因子混合而成,極大的提高了擴增長度、擴增速度、保真性和產量。2× FastHiFi PCR Mix是長片段、超保真、快速擴增的shou選產品。
Fast HiFi PCR Master Mix(含染料)

【詳細說明】

2× FastHiFi PCR Master Mix (含染料)

 

Fast HiFi PCR Master Mix(含染料)

目錄號:71812

產品內容

產品成份

71812-05

71812-0100

2× FastHiFi PCR Master Mix

5× 1 ml

100× 1 ml

保存條件

-20℃保存,有效期 2 年。

經常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 個月。

產品簡介

2× FastHiFi PCR Mix為多種采用zuixian進因工程改造而來的超保真酶添加延伸因子混合而成極大的提高了擴增長度、擴增速度、保真性和產量。2× FastHiFi PCR Mix是長片段、超保真、快速擴增的shou選產品。

PCR產物為平末端,不需要加A頭,可直接用 Blunt平末端系列載體克隆。

本產品包含FastHiFi DNA Polymerase、dNTPs和優化的反應緩沖液,濃度為2×。使用時,只需加入模板、引物,并補足水至Mix終濃度為1×即可。

本制品含紅色示蹤染料,不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進行電泳;也可經過純化處理,以用于酶切、連接、熒光測序等后續操作。

產品特點

1. 高產:一般 PCR 產物量比傳統產量高 50%-100%!

2. 高效:延伸速度可以達到 3-4kb/min,是 pfu 的 6-8 倍!

3. 高成功率:對于高 GC 模板和特殊結構的復雜模板有良好效果!

4. 超高保真:保真度是 taq 的 81 倍!

5. 擴增長度長:以復雜基因組 DNA 為模板擴增可達 3kb,以簡單基因組、質粒和噬菌體 DNA 為模板擴增可達 6kb。

× FastHiFi PCR Master Mix 使用說明:

一、配制 PCR 反應體系:(于冰上配制)

Component

20 μl Reaction

50 μl Reaction

終濃度

2× FastHiFi PCR Mix

10 μl

25 μl

1 ×

Forward Primer (10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Reverse Primer (10 μM)

0.4 μl

1 μl

0.2 μM

Template DNA

as required

as required


ddH2O

up to 20 μ

up to 50 μl


參考模板用量:(以 50 μl 反應體系為例)

質粒:0.1-10 ng;

細菌基因組:10-100 ng;

人類基因組:50-150 ng;

cDNA:1-5 μl from RT。

注意:實際操作中,首先要計算好需要補加 ddH2O 的量以后,建議先加水,然后按上述順序添加其它成分,最后加 FastHiFi PCR Mix,瞬離,上機。

二、設置 PCR 循環條件:(請根據實際情況適當調整)

Step

Temperature

Time

Cycle Number

Initial denaturation

94℃

3 minutes


Denaturation

94℃

10 seconds

30-35 cycles

Annealing

50-60℃

10-15 seconds

Extension

72℃

15-20 seconds /kb

Final Extension

72℃

5 minutes



4-8℃

Hold


注意:一般情況下,Annealing Temperature = Tm - 5°C

1. 質粒和簡單基因組等簡單模板,可以采用 10-15 sec/kb;復雜模板 ( 如人類 基因組 DNA ),可以采用 20-25 sec/kb。

2. 對于高 GC 含量的模板,預變性和變性溫度可以提高到 98℃。

3. 如果電泳發現主帶上下拖尾模糊現象,或者泳道出現從上樣孔拖下來的涂抹帶現象,一般提示延伸時間過長,梯度縮短延伸時間(建議 10-15sec/kb 為梯度減少延伸時間)直到獲得滿意結果。

三、結果檢測:反應結束后取 5 µl 反應產物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。

Fast HiFi PCR Master Mix(含染料)

    
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