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工欲善其事,必先利其器---單細胞懸液質量優化2024/02/26
隨著流式分析、細胞分選、單細胞組學、質譜流式等研究技術的蓬勃發展,單細胞也在腫瘤免疫學和神經生物學等多個領域成為大眾的焦點,它能夠很好地反映細胞的特異性和異質性。目前,組織(以腫瘤組織為例)制備成單細胞懸液的方法主要有機械解離法、酶解法和化學法(圖1)。圖1腫瘤組織制備成單細胞懸液的方法[1]高質量的初始樣本是實驗成功的關鍵。然而如何在此基礎上,進一步優化粗懸液,獲得高質量的單細胞懸液呢?基于三者的原理以及適用范圍等(表1),我們發現這些方法處理樣本時,沒有統一的標準。就機械法來說,每次實驗研磨
調整可離子化的陽離子脂質設計,提高功效和安全性2024/02/23
脂質納米顆粒(LNPs)有望che底改變以核酸為基礎的療法。雖然人們已經做出許多努力來提高LNPs中所用陽離子脂質的功效,但其安全性不容忽視。雖然陽離子脂質在遞送核酸方面很早就取得了成功,但由于存在安全風險,它們在治療方面的適用性大打折扣。通過設計具有生物相容性和生物可降解功能基團的可離子化陽離子脂質,可在這一領域取得重大進展。具有生物相容性的可電離頭部基團早期用于遞送核酸的脂質包括DOTAP和DOTMA1。這些脂質含有一個季銨頭基(圖1),賦予脂質yong久的陽離子電荷。這些脂質含有季銨頭基(
微孔板檢測儀可以用于哪些領域2024/02/20
微孔板檢測儀是一種功能強大的分析儀器,其在多個領域都發揮著重要作用。以下是對微孔板檢測儀應用領域的詳細探討:生物學研究:在生物學領域,微孔板檢測儀被廣泛用于細胞生物學、分子生物學和免疫學等研究。例如,在細胞生物學中,研究人員可以利用微孔板檢測儀來監測細胞生長、死亡和分化等過程,從而深入了解細胞的生理和病理機制。在分子生物學和免疫學研究中,微孔板檢測儀可用于檢測蛋白質、核酸和其他生物分子的相互作用,以及免疫反應的定量分析等。藥物研發:微孔板檢測儀在藥物研發過程中也發揮著重要作用。研究人員可以利用微
超越mRNA疫苗的LNP-我們該何去何從?2024/02/20
脂質納米顆粒(LNPs)有望徹di改變現代醫學。這項技術具有巨大的發展潛力,它可以超越傳染病的范疇,到達曾經被認為無法用藥的靶點,治療幾乎wu窮無盡的疾病。但這一領域仍處于起步階段,要充分釋放LNPs的潛力,還有許多挑戰需要克服。LNPs的用途多年來,科學家們已經在簡化細胞模型和培養瓶中證明了核酸療法的潛力。然而,這些概念驗證實驗在現實生活中的應用更具挑戰性,因為在生物體內施用這些療法會增加其復雜性。LNPs使這些療法的施用方式成為可能,既能防止它們在體內降解,又能將它們輸送到靶點。LNPs大大
移液器百寶箱——成為移液大師只差?2024/02/20
移液器,是一種用于定量轉移液體的工具,作為實驗室bi備儀器之一,相信各位科研小伙伴們都不陌生,甚至每天使用的時間都高達數小時之久。細節決定成敗,移液器的選擇、使用以及維護都決定著最終實驗數據的準確性,因此,小優在這里為大家整理出了移液器百寶箱,快叫上你的實驗搭子一起來看看吧~Part1如何選擇移液器Q1:挑選移液器我們應該考慮哪些因素?A1:(1)量程范圍、可變量:確保移液器可以涵蓋你實驗中所需的量程范圍,既不過大也不過小。如果實驗對體積非常敏感,選擇可變量小的移液器;一般來說,量程較小的移液器
absin恒溫搖床可達到混合和反應的目的2024/02/15
absin恒溫搖床的工作原理是通過以上關鍵部分的配合,實現樣品在恒定溫度下的搖擺運動。當樣品放置在搖床的夾具上后,打開電源,電動馬達開始旋轉產生力,通過傳動系統將力傳遞到搖床的搖擺部分,使樣品進行搖擺運動。同時,加熱系統開始提供恒定的溫度,保持搖床上的溫度不變。這樣,樣品在恒定溫度下進行搖擺,達到混合和反應的目的。可用于細胞培養、酶反應、DNA提取、疫苗制備等實驗。其恒溫和搖擺功能可以提供恒定的溫度和混合條件,使得實驗能夠在穩定的環境下進行,確保實驗結果的準確性和可重復性。同時,設備結構合理、操
absin恒溫搖床的重要組成部分有哪些?2024/02/01
absin恒溫搖床是用于生物化學、細胞學、生物制劑等領域的實驗設備,其原理是運用電動馬達產生旋轉力,并通過傳動系統將旋轉力傳遞到搖床的搖擺部分,使樣品能夠以一定速度進行搖擺運動。同時,通過加熱系統使搖床上的溫度保持恒定。在absin恒溫搖床中,主要包括以下幾個關鍵的部分:1.電動馬達:電動馬達是提供旋轉力的主要裝置,通過電流的輸入使電動馬達產生旋轉力,并將其轉化為搖床的搖擺運動。2.傳動系統:傳動系統是將電動馬達產生的旋轉力傳遞到搖床的搖擺部分的裝置,通常包括傳動帶、傳動軸等。傳動系統的設計要使
文獻速遞:單核細胞誘導的小膠質細胞可作為小膠質細胞的生理模型2024/01/30
精神分裂癥和阿爾茨海默病等神經系統疾病的發生,很大程度上與小膠質細胞的功能障礙有關。為了更深入地探索小膠質細胞在病理中的角色,我們需要一個可以模擬人體的實驗模型。現在,這些模型大多源于人類誘導多能干細胞(hiPSC)所產生的小膠質細胞。然而,將人類誘導多能干細胞(hiPSC)分化為小膠質細胞是一個具有挑戰性的任務,并且其分化過程通常較為緩慢,這使得它不太適合用于高通量的臨床試驗。另一個值得注意的問題是,誘導的小膠質細胞(iMGs)的表現并不總是與體內的小膠質細胞相似。然而,最新的研究已經成功地從
功能基因高通量篩選解決方案2024/01/25
在生命系統中,基因的功能可通過系統性敲低、敲除或過表達來確定,此實驗方法被稱為功能基因組學,目前是眾多生物學研究領域的關鍵發現工具,如藥物靶點鑒定、耐藥性、宿主-病原互作和生物通路分析等。因此,功能基因高通量篩選文庫應運而生,今天聚焦96/384孔板陣列核酸片段文庫,來看看這類文庫的高通量篩選流程及其多重應用方向。陣列核酸片段文庫將siRNA、sgRNA與自動化、生物分析、高內涵數據捕獲和生物統計分析相結合,篩選表型讀數可在標準設備上進行,如酶標儀;也可選用多種終點分析法,如比色、熒光或發光測定
活體轉染應用第七彈之玻璃體注射2024/01/25
哈嘍,最近發現很多小伙伴詢問活體轉染關于玻璃體注射的應用,今天小編就帶著幾篇相關應用文獻來給大家簡單介紹一下。第一篇是來自中山大學中山眼科中心余克明教授與莊菁研究員團隊發表在CellDeathandDisease雜志上,題為”LithiumpromotesDNAstabilityandsurvivalofischemicretinalneurocytesbyupregulatingDNAligaseIV”。本文中,作者直接在缺血性大鼠視網膜中直接測試了鋰對DNANHEJ(非同源末端連接)活性的影
人elisa試劑盒該如何存儲?2024/01/18
人Elisa試劑盒具有成本低、操作簡便、準確度高等優點,但需要注意的是,在使用過程中要遵循試劑盒供應商的操作指南,并保持實驗室安全和規范操作。使用方法:1.準備樣本:收集所需測定物質的樣本,如血液、尿液、細胞培養液等。2.樣本處理:根據試劑盒的指南,對樣本進行處理,如離心、稀釋等。3.加入試劑:按照試劑盒的指南,將樣本加入試劑盒提供的孔板中。4.攪拌孔板:用孔板上的攪拌器輕輕攪拌樣品,確保試劑和樣本充分混合。5.孔板孵育:將孔板放入恒溫孵育箱中,在需求溫度和時間下孵育反應。6.讀取結果:將孔板放
一篇文章帶你了解趨化因子2024/01/17
趨化因子(CHEMOtacticcytoKINES)是炎癥細胞因子家族的一個重要分支。有50多種趨化因子在哺乳動物細胞中表達,它們的特點是分子量相對較小(約70-90個氨基酸)、N端和半胱氨酸基序保守。根據半胱氨酸在motif中的位置,這組蛋白質被進一步分類為C、CC、CXC和CX3C趨化因子亞家族3,9。所有50種趨化因子都通過20種不同的趨化因子受體產生作用,這些受體屬于G蛋白偶聯受體(GPCR)超家族,表明不同受體之間存在一定程度的混雜性。所有趨化因子受體都與百日咳敏感的Gi蛋白結合16。
一篇文章帶你了解連接蛋白和泛連接蛋白間隙連接通道2024/01/11
間隙連接通常成簇存在,通過允許小分子在細胞間通過,實現細胞間的交流2。它們在不同的生物過程中發揮著重要作用。這些過程包括分化、細胞周期同步、細胞發育、神經元活動和免疫反應5,7,9。參與間隙連接形成的蛋白質由四個跨膜結構域、兩個胞外環、一個胞內環以及胞內N端和C端組成10,12。細胞外環中的幾個共同的半胱氨酸殘基對于間隙連接半通道在相對的細胞膜上的細胞間對接是不可少的3,10,12。連接蛋白(Connexins,Cx)包括21個屬于該家族的整體膜蛋白,它們形成同源或異源的六聚體,一般稱為連接子或
ET-PRIME轉染試劑有哪些常見問題2024/01/11
ET-PRIME轉染試劑在使用過程中可能會遇到一些常見問題,以下是一些需要注意的問題:轉染效率低:可能原因包括DNA用量不足、細胞密度過高或過低、轉染條件不佳等。建議增加DNA用量、優化細胞密度和轉染條件。細胞毒性大:ET-PRIME對細胞的毒性較低,但仍可能出現毒性反應。可能的原因包括DNA濃度過高、轉染時間過長等。建議降低DNA濃度或縮短轉染時間。轉染液配制問題:如果轉染液配制不當,會影響轉染效果。建議按照說明書要求配制轉染液,并避免使用過期或污染的試劑。細胞狀態不佳:細胞的生長狀態和健康狀
抑制癌細胞的限速生脂酶研究進展2024/01/10
限速生脂酶,包括乙酰-CoA羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、ATP-檸檬酸裂解酶(ACLY)和硬脂酰CoA去飽和酶(SCD)。脂類,包括脂肪、蠟、固醇和脂溶維生素等。近年來,我們對脂質在癌變過程(正常細胞轉變為癌細胞的過程)中的作用的理解有了重大進展1。當正常細胞逃避控制其生長的過程時,腫瘤就會發生。長期以來的研究表明,癌細胞的特征是脂質合成增加,這主要是因為分裂細胞的細胞膜需要脂質,因此開發針對脂質生成反應限速步驟的癌癥療法是合乎邏輯的。有一篇很好的綜述介紹了脂質代謝與癌癥的關系,其
SENP2對關鍵靶蛋白的 SUMO化調控抑制了動脈粥樣硬化2024/01/08
血流模式已被證明對動脈粥樣硬化的進展有深遠的影響,具體來說,紊亂血流與促動脈粥樣硬化的特征相關,而層流則抑制動脈粥樣硬化。Abe小組通過氧化還原敏感的核糖體S6激酶p90RSK,在T368處磷酸化去SUMO化的SENP2,將紊亂的血流與增強內皮細胞中關鍵靶蛋白的SUMO化聯系起來。在最近的這項研究中,該小組發現層流也可以調節SENP2,但調節方式與T368的磷酸化無關,從而產生防止動脈粥樣硬化的作用。根據現有的質譜技術,SENP2S344被鑒定為一個潛在的翻譯后修飾。該實驗室開發了一種針對SEN
鈉鈣交換體(Na+/Ca2+ Exchangers,NCX)的簡介及研究工具2024/01/03
Ca2+在可興奮和不可興奮的細胞中是通用的信號分子。然而,細胞內的Ca2+濃度比細胞外環境低1000倍,保持這一比例對細胞的正常功能至關重要。鈉鈣交換體(Na+/Ca2+Exchangers,NCX)是一種Na+/Ca2+交換器,負責細胞中大部分Ca2+的外流1-3。NCX轉運蛋白是溶質載體SLC8家族的成員,而SLC8家族又屬于CaCA(Cation-CoupledAntiporter)超家族1,4,5。NCX-1是三種Na+/Ca2+交換器(NCX-1、NCX-2、NCX-3)之一,可實施一
聚焦:5-HT3受體2024/01/03
5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是用途zui廣的神經遞質之一。它可部分通過5-HT3受體發出部分信號,5-HT3受體屬于配體門控離子通道超家族。5-羥色胺3型(5-HT3)受體是陽離子選擇性Cys環受體,在中樞和外周神經系統中均有表達,可介導快速興奮性神經傳遞2。迄今為止,已發現五種受體亞基(5-HT3A至5-HT3E),其中5-HT3A和5-HT3B受體是不同類型受體中特征zui明顯的。要形成一個功能性受體,五個亞基要圍繞一個可滲透Na+、K+和Ca2+離子的孔聚
人elisa試劑盒是常用于生物醫學研究的工具2024/01/03
人elisa試劑盒是常用于生物醫學研究和臨床診斷的實驗工具,其原理基于酶聯免疫吸附實驗,抗體是免疫系統產生的蛋白質分子,可以識別并結合特定的抗原,形成抗原-抗體復合物。Elisa試劑盒通常包含有特異性與目標抗原結合的抗體。分為直接Elisa、間接Elisa、競爭Elisa和間接競爭Elisa等多種類型。人elisa試劑盒的步驟如下:1.固定抗原:在試驗板表面上固定抗原。通常將抗原溶液加入試驗孔并孵育,使抗原與試驗板表面結合。2.阻斷:通過加入一種非特異性蛋白(如牛血清蛋白)來封閉試驗孔表面的未被
聚焦:機械敏感離子通道Piezo2023/12/27
機械刺激是痛覺、聽覺和血壓調節等多種生理過程的驅動力2。Piezo1和Piezo2最早是在小鼠神經母細胞瘤細胞系中發現的,細胞膜上的剪切力誘導了機械激活電流2。Piezo通道是一種異常大的離子通道,推測有38個跨膜結構域。它們形成的三聚體結構呈螺旋槳狀,三個葉片圍繞著一個中心孔。*的結構數據顯示,Piezo1可彎曲局部脂質環境,形成“圓頂”結構。穹頂結構是由處于非活動構象的葉片形成的。質膜上的機械壓力或張力會導致穹頂形狀變平,從而激活通道1,3,8,10。Piezo的結構研究正處于高峰期,有關其
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