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恒遠生物|原代細胞培養的應用以及注意事項2023/09/26

一、原代細胞培養的應用1.為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段；2.為傳代培養創造條件；3.服務于臨床實踐，用于藥物篩選等。二、原代細胞培養的分離注意事項1、組織塊培養法1）組織塊接種后的前3天，在觀察和移動的過程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免經常翻動和振動，否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。2）加入的培養液不宜過多，避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。3）當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產生的有毒物質會影響原代細胞的生長。4）

恒遠生物|體外培養的細胞2023/09/20

體外培養的細胞，按照生長方式可分為黏附型細胞和懸浮型細胞兩大類。一、黏附型細胞黏附型細胞是必須附著在某一固相支持物表面才能生長的細胞。由于體內、外生長環境不同，故細胞在體內、外的黏附方式也存在差異。在體內，細胞的黏附是的，細胞的各個部分都與周圍環境相接觸，因而細胞外形具有復雜的立體特征。當細胞被轉移到體外環境中之后，能夠提供附著面的只有培養器皿的壁，大多數情況下，細胞只有一個附著平面，因而培養細胞的外形一般與在體內時明顯不同。按照培養細胞的主要形態，可將黏附型細胞分為以下幾大類型：1、成纖維細胞

恒遠生物|蛋白的保存條件受哪些因素的影響呢？2023/09/11

生物大分子的貯藏保存可分為干態和液態貯藏兩種。所以蛋白保存也有干態保存和液態保存兩種。但是蛋白保存條件卻受諸多因素的影響。下面就為大家分析一下影響蛋白保存條件的因素。蛋白質失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線、酸堿度、樣品狀態、微生物活動、保存時間和容器等；這些因素可單獨起作用，但更多情況是協同作用；以下就對蛋白保存條件受到的影響進行簡要分析1.空氣空氣的影響主要與潮解、微生物污染及自動氧化等有關。空氣中的微生物污染可導致樣品腐敗變質，吸濕后的樣品除潮解變性外也會造成微生物活動

恒遠生物|血清中出現沉淀物的原因及避免方法2023/09/05

血清：指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。主要作用是提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞的起到某些保護作用。用于細胞培養的胎牛血清以及其它血清中可能存在的沉淀物有以下三種:1.纖維蛋白：它是經常出現的較大的沉淀物，可以達到1-2mm，肉眼可觀。因為血清都是在低溫下進行收集和快速處理的，一些纖維蛋白原（可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體）在處理過程中仍然處于溶解狀態，當經過

恒遠生物|如何鑒定微生物2023/08/30

微生物是對藥品原料、生產環境和成品造成污染的重要因素，也是造成生產失敗、成品不合格、對人類造成危害的重要因素。所以分離得到的污染微生物，進行微生物鑒定，是十分必要的，也可為檢驗和生產提供有效的依據。1、形態學特征(1)細胞形態在顯微鏡下觀察細胞外形大小、形狀、排列等，細胞構造，革蘭氏染色反應，能否運動、鞭毛著生部位和數目，有無芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置，放線菌和真菌的繁殖器官的形狀、構造，孢子的數目、形狀、大小、顏色和表面特征等。(2)群體形態通常是指以下情況的特征：1）在一定的固體培養基上生

恒遠生物帶大家了解一下何為脫落酸2023/08/22

脫落酸是植物五大天然生長調節劑之一，是生物學中常用作植物組織培養。脫落酸在衰老的葉片組織、成熟的果實、種子以及莖、根部等許多部位形成。（水分的虧缺可以促進脫落酸的形成）脫落酸的作用：1.一直與促進生長，外施脫落酸濃度高時抑制莖、下胚軸、根、胚芽鞘和葉片的生長，濃度低時促進離體黃瓜子葉生根與下胚軸伸長，加速浮萍的繁殖,刺激單性結實種子發育。2.維持芽與種子休眠。（休眠與體內赤霉素與脫落酸的平衡有關）3.促進果實與葉的脫落。4.促進氣孔關閉。脫落酸可使氣孔快速關閉,對植物又無du害，是一種很好的抗蒸

? 恒遠生物|無血清培養基的好處和壞處都有哪些?2023/08/16

無血清培養基是在合成培養基的基礎上發展起來的，和傳統的培養基不一樣的是，它既能滿足細胞在體外長時間培養的要求，也能避免動物血清中所帶來的不利因素。無血清培養基的發展歷程分為無血清培養基、無動物源培養基、無蛋白培養基及化學成分限定培養基四類。在使用無血清培養基時，有些細胞需要逐漸適應，即先將原來的培養基與無血清培養基混合培養，再轉為完整的無血清培養基培養。有些貼壁生長的細胞，復蘇時也可用少量的血清先培養（血清可以幫助細胞貼壁），然后再轉為無血清培養基。無血清培養基由營養較wan全的基礎培養基和補充

恒遠生物|ELISA試劑盒變質的原因是什么呢？2023/08/07

在ELISA實驗中我們經常會碰到試劑盒變質的問題，是什么原因導致了ELISA試劑盒的變質呢？接下來我就和大家說一說導致ELISA試劑盒變質的原因有哪些。導致ELISA試劑盒變質的原因主要分為七種：1、方法學的影響ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響，結果重復性較差，質量較難控制。2、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質量一致，即

恒遠生物|細胞凍存和復蘇你應該知道的小細節2023/07/31

細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損傷。細胞復蘇是一個簡單的試驗操作，但操作中也有許多需要注意的事項，在實驗操作中注意細小的問題，才能使復蘇后的細胞保持

恒遠生物|使用恒遠ELISA試劑盒需要符合哪些要求呢？2023/07/24

為了保證elisa試劑盒實驗的穩定及順利完成，廣大科研者和經銷商首先要考慮的就是產品的選擇，一定要選用質量靠得住的產品，萬萬不能夠圖便宜，忽視質量保證。其實，我們在使用ELISA試劑盒時，對自身以及對產品的要求都是很嚴格的；下面，我們一起來看看使用ELISA試劑盒需要符合哪些要求吧：●檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結和分析問題的能力，對ELISA試劑盒實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。●使用校對過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準確與否

恒遠生物|蛋白質相互作用2023/07/19

蛋白質相互作用是指兩個或兩個以上蛋白質分子通過非共價鍵形成蛋白質復合物的過程。如復制、轉錄、翻譯、細胞周期調控、物質代謝等。常見的研究方法有：酵母雙雜交技術、免疫共沉淀、親和層析、細胞內共定位分析。以下是對免疫共沉淀技術（co-immunoprecipitation,co-IP）進行總結，co-IP常用來檢測兩種蛋白質在體內是否結合。基本原理：在保證兩種蛋白質相互作用的條件下，收集并裂解細胞。在細胞裂解液中加入某一種已知蛋白的特異性抗體，孵育后再加入可與特異性抗體結合的蛋白A/G-瓊脂糖珠（或磁

恒遠生物|菌種保存方法有哪些？2023/07/12

微生物為廣泛分布于自然界中的一群肉眼看不到的微小生物，包括細菌、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌、真菌、病毒等類，其結構簡單，以單細胞、細胞群體或非細胞狀態存在，在提供營養物質和適宜環境的條件下，一般都能獨立生活，迅速生長繁殖。為了避免微生物死亡、污染，保持其原有性狀基本穩定，便于研究和使用，需要用到菌種保藏技術。菌種的保存主要是指通過降低細菌新陳代謝的速度,使細菌的生命活動處于半yongjiu性休眠狀態,以達到長期保藏的目的以及減少菌種的更新需求來降低實驗生產成本。微生物菌種的保存方法

細胞轉染方法快來了解一下吧2023/07/04

隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發展，轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規工具。細胞轉染實驗是現代生物學研究中的重要技術手段之一。通過將外源DNA、RNA、蛋白質等引入目標細胞的實驗技術之一，研究者們可以揭示細胞的基因功能、蛋白質表達和相互作用，進而深入理解細胞生理過程和疾病發生機制。接下來我來為大家介紹一下常見的細胞轉染方法吧細胞轉染方法1.化學物質介導：磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物法和脂質體轉染方法1）磷酸鈣共沉淀法：借助于形成一種DNA-磷酸鈣復合物沉淀黏附在細胞膜表面，通過細

細菌和真菌的DNA如何提取呢？2023/06/30

操作步驟：1.準備：無水乙醇、異丙醇、PBS及1.5mL離心管。2.取出洗滌液，按終濃度70%比例加入無水乙醇，如7.8mL加入18.2mL無水乙醇，充分混勻。3.菌體處理：將收集的細菌或真菌5,000rpm離心3分鐘，棄上清，加入200μLPBS，振蕩混勻，5,000rpm離心3分鐘，充分棄上清。4.加入100μL裂解液Ⅰ，強烈Vortex，直到沉淀至懸浮，無明顯塊狀沉淀，再加入裂解酶10μL，充分混勻，室溫放置20分鐘。5.加入200μL裂解液Ⅱ，20μL復合消化液，充分混勻，65℃孵育20

恒遠生物|ELISA常見問題與解決方法2023/06/21

ELISA常見問題與解決方法1.陰性對照出現陽性結果①樣品、試劑被污染，或加樣時操作不當導致相鄰孔之間溶液濺灑出現交叉污染——更換試劑，小心操作。②酶標板洗滌不好——洗板前先將抗體溶液倒干凈，然后清洗液倒滿板孔，確保能充分洗滌。③抗體量過多導致非特異性結合——根據說明書的推薦量使用抗體，稀釋抗體到適當濃度。2．酶標板整體背景高①抗體非特異性結合——應確保板孔進行了封閉并且使用的是恰當的封閉液以防止非特異性結合。②底物結合濃度過高——對底物進行適當稀釋。③反應時間過長——當酶標板顯色足夠進行吸光度

恒遠 生物|ELISA實驗的原理與類型2023/06/14

一、ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物

恒遠生物|ELISA試劑盒定性與定量的區別?2023/06/07

Elisa試劑盒是利用抗原抗體之間專一性結合的特性，對樣本進行檢測的實驗方法，通過底物顯色深淺代表待測物在樣本中含量的多少。什么是定性？定性ELISA只能粗略表示樣本待測物含量在某個特定值以上或以下，定性ELISA通常設置陽性對照（P）、和陰性對照（N），結果分別用“陰性”和“陽性”表示。ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”的判斷標準是試劑盒所確定的陽性判斷值，即cut-off值。什么是定量？定量ELISA是通過一系列不同已知濃度的標準品所對應的OD值做出標準曲線，然后將樣本的OD值代入標準曲

恒遠生物|細胞培養的無菌原則2023/05/31

無菌技術在理論上是很簡單的：阻止無菌的、未被污染的物質或物品與任何有菌的、被污染的物體相接觸。成功的無菌技術的一個基本因素就是個人衛生。任何直接或間接地與培養相接觸的物品必須無菌。理想化的情況是所有無菌操作都應該在一個層流式超凈臺中進行。如果是在一個敞開的空間進行無菌操作，火焰滅菌則通常是一種直接的、局部的滅菌方法。由于火焰形成的湍流會極大地打亂無菌氣流，因此火焰滅菌法應盡量少用。材料:1、抗菌肥皂2、70％乙醇或其他適當的消毒劑3、95％乙醇4、潔凈的袖口緊縮的實驗室工作服5、手術用乳膠手套6

兔谷丙轉氨酶（ALT)ELISA說明書解析20232023/05/25

檢測范圍:2ng/L-90ng/L使用目的:僅供科研使用，本試劑盒用于測定兔血清樣,血漿及相關液體樣本中谷丙轉氨酶（ALT)含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔谷丙轉氨酶（ALT)水平。用純化的兔谷丙轉氨酶（ALT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入谷丙轉氨酶（ALT)，再與HRP標記的谷丙轉氨酶（ALT)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品

競爭法ELISA中，主要兩種計算方法2023/02/27

在競爭法ELISA中，陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量，一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間，此時反應最為敏感。競爭法ELISA不易用自視判斷結果，因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異，一般均用比色計測定，讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種，即陽性判定值法和抑制率法。a.陽性判定值法與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同，ELISA試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值，現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對