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上海聯碩生物科技有限公司
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胰蛋白酶的作用有哪些2022/06/06
胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種,EC3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性*的蛋白酶,在決定蛋白質的氨基酸排列中,它成為*的工具。胰蛋
蛋白酶k的定義,應用以及保存方法2022/06/02
蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內及高溫(50?70°C)均有活性,用于質粒或基因組DNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白,使DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進行抽提,除去雜質,收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K的應用:蛋白酶K已廣泛應用在皮革、毛皮、絲綢、醫藥、食品、釀造等方面。皮革工業的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節省時間,又
Trizol提取RNA的詳細步驟2022/06/01
1、在提取組織RNA時,每50~100mg組織用1mlTrizol試劑對組織進行裂解;提取細胞RNA時,先離心沉淀細胞,每5-10╳106個細胞加1mlTrizol后,反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞。2、將組織或細胞的Trizol裂解液轉入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘;在EP管中,按照每1mlTRIZOL加0.2ml氯/仿的量加入氯/仿,蓋上EP管蓋子,在手中用力震蕩15秒,在室溫下(15℃~30℃)放置2~3分鐘后,12000g(2℃~8℃)離心15分鐘。3、取上層水相置于新EP
細胞培養瓶的樣式及分類 .2022/05/31
細胞培養瓶,顧名思義就是用來培養細胞的。根據材質可以分為玻璃的和塑料的,底部形狀有正方形、長方形、三角形等,根據瓶子容積有5至500ml供選擇。另外,表面經過特殊改性處理后,可以讓細胞更好的進行貼壁培養,這樣根據細胞貼壁面積又可以分為25~175cm2多種。國產的細胞培養瓶一般蓋子都是封閉的,不帶內墊,常用于密閉培養,可保證其密閉性;進口的培養瓶的蓋子樣式比較多:密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋、隔墊蓋等。密閉蓋的性能和國產的是相同的,聚酯蓋常用于開放培養,只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶內氣體與環境中氣體的交
丙三醇的性質和貯存方法2022/05/30
丙三醇,又名甘油,化學式為C3H8O3,無色、無臭、味甜,外觀呈澄明黏稠液態,是一種有機物,能從空氣中吸收潮氣,也能吸收硫化q、氰化q和二氧化l。難溶于苯、l仿、四氯化d、二硫化d、石油m和油類,是甘油三酯分子的骨架成分。性質與穩定性1.無色、透明、無臭、粘稠液體,味甜,具有吸濕性。與水和醇類、胺類、酚類以任何比例混溶,水溶液為中性。溶于11倍的乙酸乙酯。不溶于苯、lv仿、四氯化d、二硫化d、石油m、油類、長鏈脂肪醇。可燃,遇二氧化鉻、氯s鉀等強氧化劑能引起燃燒和爆炸。也是許多無機鹽類和氣體的良
什么是細胞松弛素B?2022/05/27
一、概述:細胞松弛素BC29H37NO5是從真菌類Helminthosporiumde-mariodeum中分離得到的代謝產物。是以希臘語的cytos(細胞)和chalasis(松弛)組合而命名的。在許多動植物細胞的細胞運動中,特別是可逆地抑制同微絲系有關的現象。例如在0.5—1.0微克/毫升濃度下作用24小時,會使鼠的培養纖維芽細胞只進行核分裂,而細胞質的分裂受到抑制,從而成為多核細胞。5微克/毫升可阻止蛙的受精卵的卵裂溝的形成,致使不能進行正常的卵裂,也抑制淋巴球、海膽卵、肺上皮細胞等的細胞
聚乳酸的特性和優點2022/05/26
單個的乳酸分子中有一個羥基和一個羧基,多個乳酸分子在一起,-OH與別的分子的-COOH脫水縮合,-COOH與別的分子的-OH脫水縮合,就這樣,它們手拉手形成了聚合物,叫做聚乳酸。聚乳酸也稱為聚丙交酯,屬于聚酯家族。聚乳酸的特性:聚乳酸(H-[OCHCH3CO]n-OH)的熱穩定性好,加工溫度170~230℃,有好的抗溶劑性,可用多種方式進行加工。由聚乳酸制成的產品除能生物降解外,生物相容性、光澤度、透明性、手感和耐熱性好。聚乳酸(PLA)還具有一定的耐菌性、阻燃性和抗紫外性。聚乳酸的優點:⑴聚乳
脫落酸的特性與應用2022/05/25
脫落酸是一種具有倍半萜結構的植物激素。1963年美國艾迪科特等從棉鈴中提純了一種物質能顯著促進棉苗外植體葉柄脫落,稱為脫落素II。英國韋爾林等也從短日照條件下的槭樹葉片提純一種物質,能控制落葉樹木的休眠,稱為休眠素。1965年證實,脫落素II和休眠素為同一種物質,統一命名為脫落酸。脫落酸的特性:1.植物的生長平衡因子脫落酸又叫S-誘抗素。具有促進植物平衡吸收水、肥和協調體內代謝的能力。可有效調控植物的根/冠和營養生長與生殖生長,對提高農作物的品質、產量具有重要作用。2.植物的抗逆誘導因子S-誘抗
消泡劑的物理性質是什么?有哪些用途?2022/05/24
消泡劑,也稱消沫劑,是在食品加工過程中降低表面張力,抑制泡沫產生或消除已產生泡沫的食品添加劑。我國許可使用的消泡劑有乳化硅油、高碳醇脂肪酸酯復合物、聚氧丙烯甘油醚、聚二甲基硅氧烷等。消泡劑的物理性質:1、消泡快,抑泡性能好。2、不影響起泡體系的基本性質。3、擴散性、滲透性好。4、化學性穩定。5、無生理活性,無腐蝕、無毒、無不良副作用、不燃、不爆,安全性高。消泡劑的用途:1、硅油消泡劑在石油行業用得十分廣泛,已成為生產過程中*的一個重要助劑。由于鉆井液中大量使用強起泡性便面活性劑,不僅抽提原油離不
殼寡糖的應用領域有哪些2022/05/23
殼寡糖又叫殼聚寡糖、低聚殼聚糖,是將殼聚糖經特殊的生物酶技術降解得到的一種聚合度在2~20之間寡糖產品,分子量≤3200Da,是水溶性較好、功能作用大、生物活性高的低分子量產品。它具有殼聚糖所沒有的較高溶解度,全溶于水,容易被生物體吸收利用等諸多*的功能,其作用為殼聚糖的14倍。殼寡糖的應用領域:1.醫藥領域使傷口免受細菌的感染,而且還可以滲透空氣和水分,促進傷口愈合。被生物體內的溶菌酶降解生成天然的代謝物,具有無毒、能被生物體*吸收的特點,因此用它作藥物緩釋劑具有較大的*性。2.食品領域乳品:
先鋒霉素的類型和作用2022/05/18
先鋒霉素的類型和作用:先鋒霉素(頭孢菌素)類抗生素是臨床上常用的抗菌藥物,按發現年代以及抗菌性質可分為一、二、三、四代。1962~1970年發現生產的為第一代,如頭孢噻吩(先鋒霉素1號)、頭孢噻啶(先鋒霉素2號)、頭孢氨芐(先鋒霉素4號)。頭孢脞啉(先鋒霉素5號)、頭孢拉啶(先鋒霉素6號)。1970~1976年生產的為第二代,如頭孢盂多、頭孢替定、頭孢呋新等。1976~1983年發現生產的為第三代,如頭孢隆胎、頭孢哌酮(先鋒必),頭孢三嗪(菌必治),頭孢他啶(復達欣)等。第四代是80年代中期開發
辣椒堿的用途有哪些2022/05/16
椒堿又稱辣椒辣素,是一種有機化合物,分子式為C18H27NO3。在自然界它存在于茄科植物辣椒(Capsicumannuum)及其變種,從石油/醚中析出者為單斜晶,矩形片狀物。最大紫外線吸收在227nm,281nm(ε7000;2500)。是一種極度辛辣的香草酰胺類生物堿。辣椒堿為白色結晶粉末,是辣椒屬植物紅辣椒的活性成分。急性毒性:腹腔-大鼠LD50:9.5毫克/公斤;口服-小鼠LC50:47.2毫克/公斤。用途:1、辣椒燃燒脂肪的奧秘是什么?關鍵在于——辣椒堿,只須吃上一兩勺,它的刺激口味即刻
緩沖溶液作用原理、pH值和應用2022/05/13
緩沖溶液(BufferSolution)是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。緩沖溶液(BufferSolution)是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。pH緩沖系統對維持生物的正常pH值和正常生理環境起到重要作用。多數細胞僅能在很窄的pH范圍內進行活動,而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩沖體系,它們是蛋白質緩沖系統、重碳酸鹽緩沖系統以及磷酸鹽緩沖系統。每種緩沖體系所占的分量在各類細胞和器官中是不同的。在生化研究工作
干粉培養基的配置和注意事項2022/05/12
干粉培養基是將配制好的培養基進行脫水處理,這樣便于保存及銷售。干粉培養基的優缺點:優點在于便于運輸、可以長期儲存,不過需要使用者自行配置方可以使用,配制時需要制備細胞培養用的純水,有時也存在溶解性不好的問題。缺點在于批次間的重復性不太好。干粉培養基的配置:1.在一個盡可能接近總體積的容器中加入比預期培養基總體積少5%的雙蒸水。2.在室溫(20℃到30℃)的水中加入干粉培養基,輕輕攪拌,不要加熱。3.水洗包裝袋的內部,轉移全部的痕量干粉到容器內。4.加NaHCO3到培養基中。5.用雙蒸水稀釋到想要
關于蛋白質綴合的方案你了解多少2022/05/11
關于蛋白質綴合的簡捷方案你了解多少?以下是使用SMCC和DTT詳細說明PE-蛋白質綴合的方案,供參考。注意:該方案使用IgG(MW:150kDa)作為其綴合蛋白,但是其他蛋白質可以用適當修飾的量替代。PE準備注意:如果PE作為溶液(通常為硫酸銨)儲存,則必須首先進行離心分離。離心并棄去上清液,然后在PBS中以與原溶液相同的濃度重建沉淀物。如果PE以固體形式儲存,立即懸浮在PBS中。對于計劃結合的每mgIgG,使用3.5mgPE。1.將PE溶液透析,每1升PE對1升PBS進行透析。重復一次。2.對
細胞復蘇的主要步驟及注意事項,有哪些?2022/05/10
主要步驟:①將冷凍管從液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,細胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時間延長會提高細胞死亡率,復蘇過程中一般細胞死亡率在20%~25%之間。②迅速用酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒,然后放置在冰浴上。③小心開啟瓶蓋,把細胞轉入含有4mL培養基的培養瓶中,然后把培養瓶移至培養箱,36℃~38℃培養1h,讓細胞貼壁。④細胞貼壁后,小心移棄培養基,主要是去掉DMSO(懸浮生長細胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細胞及其碎片,加5mL新鮮培養基,36℃~38℃
透析袋預處理的方法2022/05/09
為防干裂,出廠前透析袋一般都經10%的甘油處理,透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質,它們對蛋白質和其他生物活性物質有害,用前必須除去。新購進的普通型透析袋必須經過處理才能使用。方法一:把透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段。在大體積(500ml)的2%(w/v)的碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA2Na(pH=8.0)中將透析袋煮沸10min。用蒸餾水*清洗透析袋。放在500ml的1mmol/LEDTA2Na(pH=8.0)中將之煮沸10min。冷卻后,置于30%或者5
細胞培養板的分類與選擇2022/05/06
一、按底部形狀據底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V細胞培養板型)平底的什麼類型的細胞都可用﹐但當細胞數目較少﹐如做克隆時﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學方面﹐當做兩種不同淋巴細胞溷合培養時﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(
過氧化氫酶是什么2022/05/05
過氧化氫酶(CAT),是催化過氧化氫分解成氧和水的酶,存在于細胞的過氧化物體內。過氧化氫酶是過氧化物酶體的標志酶,約占過氧化物酶體酶總量的40%。過氧化氫酶存在于所有已知的動物的各個組織中,特別在肝臟中以高濃度存在。過氧化氫酶在食品工業中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的過氧化氫。過氧化氫酶也被用于食品包裝,防止食物被氧化。檢測進行中的過氧化氫酶檢測,可以觀察到氣泡。過氧化氫酶檢測是微生物學家鑒定細菌種類的主要的三種檢測手段之一,即用過氧化氫來檢測過氧化氫酶是否存在。假如細菌中含有過氧化氫酶,則在
鏈霉素的生產方法與藥理作用2022/04/29
生產方法①菌種發酵,將冷干管或沙土管保存的鏈霉菌孢子接種到斜面培養基上,于27℃下培養7天。待斜面長滿孢子后,制成懸浮液接入裝有培養基的搖瓶中,于27℃下培養45~48小時待菌絲生長旺盛后,取若干個搖瓶,合并其中的培養液將其接種于種子罐內已滅菌的培養基中,通入無菌空氣攪拌,在罐溫27℃下培養62~63小時,然后接入發酵罐內已滅菌的培養基中,通入無菌空氣,攪拌培養,在罐溫為27℃下,發酵約7~8天。②提取精制,發酵液經酸化、過濾,除去菌絲及固體物,然后中和,通過弱酸型陽離子交換樹脂進行離子交換,再
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