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percoll分離細(xì)胞的原理2022/11/22: Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低（Ficoll常用來(lái)分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞。Ficoll是蔗糖的多聚體，呈中性，犌W水性高，平均分子量為400,000，當(dāng)密度為1.2g／ml仍未超出正常生理性滲透壓，也不穿過(guò)生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大，離心后沉于管底；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重，離心后漂浮于分層液的液面上，也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞，就可從外周血中分離到單個(gè)核細(xì)胞。

二甲基亞砜的用途與作用2022/11/21: 二甲基亞砜，英文名稱DMSO。無(wú)色粘稠液體。有吸濕性。能與水、CH3CH2OH、丙酮、CH?CHO、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶，不溶于C?H?以外的脂肪烴類化合物。二甲基亞砜用途廣泛，可用作溶液和反應(yīng)試劑。DMSO在有機(jī)合成，醫(yī)藥、電子等方面均有應(yīng)用。二甲基亞砜特別用于無(wú)水化學(xué)合成反應(yīng)及醫(yī)藥中間體合成反應(yīng)溶劑。使用該溶劑能提高反應(yīng)速度，反應(yīng)收率，縮短反應(yīng)時(shí)間。二甲基亞砜是有機(jī)溶媒，溶解范圍廣，并具有一定的消炎止癢作用，在實(shí)驗(yàn)室中作為溶媒被廣泛使用。也廣泛用作滲透

怎樣提取及分離純化金屬硫蛋白2022/11/18: 金屬硫蛋白（metallothionein，MT)是一類廣泛存在于生物中的低分子質(zhì)量(6~7kD)、無(wú)芳香族氨基酸、富含金屬與半胱氨酸(Cys20%?30%)的生物學(xué)特性的金屬結(jié)合蛋白。1957年，美國(guó)科學(xué)家Margoshes和Vallee最早從馬腎中分離得到金屬硫蛋白，繼1975年P(guān)rinz從釀酒酵母中分離得到Cu-MT后，1977年科學(xué)家又從大豆的根中分離出富含Cd2+的類金屬硫蛋白。金屬硫蛋白中大量巰基賦予了其螯合重金屬離子功能及重金屬解毒作用，同時(shí)MT清除自由基的能力明顯強(qiáng)于超氧化物歧化

雌二醇的制備方法2022/11/17: 制備方法：采用人骨髓來(lái)源細(xì)胞使用化合物三甲基膽蒽（MCA）誘導(dǎo)產(chǎn)生并篩選出細(xì)胞，并使用該細(xì)胞在體外合成性雌二醇；所述細(xì)胞已由中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號(hào)CCTCCC2012173；制備步驟為：（1）人骨髓來(lái)源細(xì)胞（HMBDCs，主要成分為人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞）采用現(xiàn)有技術(shù)（本實(shí)施例采用骨髓沖洗、貼壁法）進(jìn)行原代培養(yǎng)制備，制備的細(xì)胞培養(yǎng)于含15%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件為37℃，5%CO2，直至105個(gè)細(xì)胞/培養(yǎng)瓶；（2）培養(yǎng)基中加入MCA，使其終濃度為1ug/ml，并每星期更換含M

胎牛血清、新生牛血清、小牛血清之間的區(qū)別2022/11/16: 小牛血清，新生牛血清，胎牛血清三者是依據(jù)采集的牛齡的不同來(lái)命名。胎牛是還未接觸外界世界的母牛體內(nèi)的牛，所以胎牛血清的免疫球蛋白含量應(yīng)該是極少的，血清比較純。依次是新生牛，再次是小牛。三者的區(qū)別：1、采血時(shí)間不同胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí)，通過(guò)胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來(lái)自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同兩者所含的促

蛋白酶k在DNA提取中的作用2022/11/15: 蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌（tritirachiumalbumlimber）中純化得到。蛋白酶k，是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶k在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而它應(yīng)用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶k的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的p

DNA提取試劑盒的幾種提取步驟2022/11/14: DNA提取試劑盒是根據(jù)氯/化/芐法構(gòu)建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。氯/化/芐具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細(xì)胞壁的特性。本制品利用了氯/化/芐的這一特性，將植物樣品凍結(jié)融解后，再使用PipetTip的尖//端將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細(xì)胞壁。本法與傳統(tǒng)方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。而且，本制品經(jīng)過(guò)了改良，熱處理時(shí)間只需15分鐘，使用本制品從實(shí)驗(yàn)開始至水相回收只需30分鐘時(shí)間。得到的基因組DNA可以進(jìn)行PC

什么是組蛋白？組蛋白的功能是什么？2022/11/08: 組蛋白（histone）是真核生物體細(xì)胞染色質(zhì)與原核細(xì)胞中的堿性蛋白質(zhì)，和DNA共同組成核小體結(jié)構(gòu)。它們是染色質(zhì)的主要蛋白質(zhì)組分，作為DNA纏繞的線軸，并在基因調(diào)控中發(fā)揮作用，但是原核細(xì)胞組蛋白對(duì)基因調(diào)控的作用非常微弱。沒有組蛋白，染色體中未纏繞的DNA將非常長(zhǎng)（人類DNA中的長(zhǎng)寬比超過(guò)1000萬(wàn)比1）。例如，每個(gè)人類二倍體細(xì)胞（含有23對(duì)染色體）具有約1.8米長(zhǎng)的DNA，但是在組織蛋白上纏繞它具有約90微米（0.09毫米）的染色質(zhì)，當(dāng)在有絲分裂期間復(fù)制和濃縮時(shí)，其導(dǎo)致約120微米的染色體。組蛋

常用抗原的修復(fù)方法2022/10/31: 1）抗原熱修復(fù)可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體條件，選用微波爐抗原修復(fù)、高壓鍋抗原修復(fù)或水浴高溫抗原修復(fù)。抗原熱修復(fù)可選用各種緩沖液，如TBS、PBS、重金屬鹽溶液等，但實(shí)驗(yàn)證明，以0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）效果。請(qǐng)選用我公司提供的ZLI-9064枸櫞酸鹽緩沖液（粉劑）配制，取該粉劑一包溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，其pH值在6.0±0.1，如因蒸餾水本身造成的pH值偏差，請(qǐng)自行調(diào)整。（1）高壓熱修復(fù)切片脫蠟至水。將1500ml~3000ml的0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0，工作液）或

Trizol法提取總RNA的流程及原理2022/10/26: 提取原理：Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對(duì)細(xì)胞進(jìn)行裂解，從而使細(xì)胞當(dāng)中的蛋白質(zhì)以及核酸物質(zhì)解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質(zhì)變性，但它不能抑制RNA酶的活性，因此Trizol中還加入了8－羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來(lái)抑制內(nèi)源和外源RNase（即RNA酶）。Trizol試劑是直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品的裂解液或勻漿中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯/仿(CHCl3)后離心，樣品能分成水樣層和有機(jī)層。而RNA存在于水樣層中。在

吐溫的用途有哪幾種？2022/09/30: 吐溫（或聚山梨酯）為非離子型表面活性劑，有異臭，溫暖而微苦，系一系列聚氧乙xi去水山梨醇的部分脂肪酸酯。廣泛用作乳化劑和油類物質(zhì)的增溶劑。聚山梨酯通常被認(rèn)為是無(wú)毒、無(wú)刺激性的材料。據(jù)WHO的評(píng)估，按總聚山梨酯計(jì)算，日攝入量可高到25mg/kg體重。用途：1.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中乳化蛋白，在使用時(shí)，Tween和同類型的TritonX-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非離子型去污劑不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，可減少對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞。離子型去污劑如SDS則破壞蛋白的結(jié)構(gòu)。2.在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中作封閉劑，封閉劑應(yīng)

pH 標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的特點(diǎn)、配飾方法及保存方法有哪些？2022/09/29: 1.什么是pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液？它有哪些特點(diǎn)？pH緩沖溶液是一種能使pH值保持穩(wěn)定的溶液。如果向這種溶液中加入少量的酸或堿，或者在溶液中的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生少量的酸或堿，以及將溶液適當(dāng)稀釋，這個(gè)溶液的pH值基本上穩(wěn)定不變，這種能對(duì)抗少量酸堿或大或稀釋，而使pH值不變化的溶液就稱為緩沖溶液。pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖液有以下特點(diǎn)：（1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值是已知的，并達(dá)到規(guī)定的準(zhǔn)確度；（2）標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值有良好的復(fù)現(xiàn)性和穩(wěn)定性，具有較大的緩沖容量，較小的稀釋值和較小的溫度系數(shù)；（3）溶液的制備方法簡(jiǎn)單；2.如何配制pH標(biāo)準(zhǔn)

牛血清白蛋白（BSA）的主要成分及作用有哪些？2022/09/28: 牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5種組份，其中第五種就是白蛋白）一、主要成分：1、蛋白質(zhì)是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白，球蛋白。纖維粘連素細(xì)胞促進(jìn)細(xì)胞附著；α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促細(xì)胞附著；轉(zhuǎn)鐵蛋白能結(jié)合鐵離子，減少其毒性和被細(xì)胞利用。2、多

關(guān)于細(xì)胞傳代2022/09/27: 1.細(xì)胞吸除培育瓶?jī)?nèi)舊培育液。2.參加無(wú)菌pbs洗液（5-8mL）悄悄潤(rùn)濕細(xì)胞，稀釋多余的培育基，之后吸走洗液，動(dòng)作要輕，不可吹打到細(xì)胞。3.向瓶?jī)?nèi)參加含0.25%EDTA的胰蛋白酶混合液少許，以能覆滿瓶底為限。4.置溫箱中2~5分鐘，一旦鏡檢發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，細(xì)胞變圓，比較松動(dòng)后，當(dāng)即終止消化。5.參加該細(xì)胞對(duì)應(yīng)的培育基6mL（T25培育瓶）或12mL（T75培育瓶）終止消化。6.用吸管通過(guò)吸取的培育基悄悄反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)應(yīng)盡量以少的次數(shù)將細(xì)胞

二甲基亞砜的運(yùn)用有哪些2022/09/22: 二甲基亞砜是一種在許多制造行業(yè)上都可以用獲得的物質(zhì)，這類物質(zhì)能夠協(xié)助大家處理各個(gè)方面的問題。而在藥業(yè)生產(chǎn)及其診療中，二甲基亞砜也是擁有較為普遍的運(yùn)用，能夠用于醫(yī)治各種各樣的病癥，使病人修復(fù)身心健康。一、在診療中的運(yùn)用DMSO對(duì)很多藥品具備水溶液性、透水性、自身具備消炎、止疼，推動(dòng)血液循環(huán)系統(tǒng)和傷口修復(fù)，并有有利排尿、銷靜功效。能提升藥品消化吸收和提升功效。各種各樣藥品融解在DMSO中，無(wú)需內(nèi)服和注射，涂在皮膚上就能滲透到身體，開拓了給藥有效途徑。更關(guān)鍵的是提升了病房部分藥品成分，減少人體別的的藥

提取原代細(xì)胞的方法與詳細(xì)步驟2022/09/21: 原代細(xì)胞是通過(guò)一定的方法如酶法或機(jī)械法或生長(zhǎng)法使細(xì)胞從人體和動(dòng)物的母體器官、組織或液體中分離出來(lái)，并在受控環(huán)境條件下分離的細(xì)胞在體外或其他人體和動(dòng)物體內(nèi)生長(zhǎng)。原代細(xì)胞的提取方法詳細(xì)步驟：1.整個(gè)操作要在潔凈通風(fēng)的超凈臺(tái)下進(jìn)行，所有的器材要高壓消毒。2.根據(jù)BALB/c小鼠的體重，將小鼠置于盛有75%乙醇的燒杯內(nèi)，這一步不僅可以消毒，也可以讓小鼠體毛浸濕，后續(xù)剃去皮毛的時(shí)候不會(huì)沾到剪刀或組織上。3.用鑷子輕輕挑起小鼠的心臟，裝有PBS的注射器插入心尖，同時(shí)在右心耳處剪開一個(gè)小口，緩慢推動(dòng)注射器，隨

甲殼質(zhì)的應(yīng)用2022/09/20: 甲殼質(zhì)又稱甲殼素、幾丁質(zhì)，英文名Chitin，是一種從海洋甲殼類動(dòng)物的殼中提取出來(lái)的多糖物質(zhì)，化學(xué)式為(C8H13O5N)n。甲殼質(zhì)是淡米黃色至白色，溶于濃鹽酸、磷酸、硫酸和乙酸，不溶于堿及其它有機(jī)溶劑，也不溶于水。甲殼質(zhì)的脫乙酰基衍生物殼聚糖（chitosan）不溶于水，可溶于部分稀酸。甲殼素應(yīng)用范圍很廣泛，在工業(yè)上可做布料、衣物、染料、紙張和水處理等。在農(nóng)業(yè)上可做殺蟲劑、植物抗病毒劑。漁業(yè)上做養(yǎng)魚飼料。化妝品美容劑、毛發(fā)保護(hù)、保濕劑等。醫(yī)療用品上可做隱形眼鏡、人工皮膚、縫合線、人工透析膜和人

PBS是磷酸鹽緩沖溶液2022/09/19: PBS緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣，而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1mmol/LCaCl2和0.5mmol/LMgCl2，以提供二價(jià)陽(yáng)離子。PBS是磷酸鹽緩沖溶液的簡(jiǎn)稱，不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來(lái)稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用，

檸檬酸鐵的作用與危害2022/09/16: 檸檬酸鐵銨具有強(qiáng)身健體、消除疲勞等作用，但可能會(huì)有輕度的、胃難受、便秘和腹瀉等副作用。可促進(jìn)脂肪分解，調(diào)節(jié)身體酸堿平衡。緩解小兒厭食、智力發(fā)育遲緩和出牙晚、青少年精力不集中、易疲勞和牙齒發(fā)育不良以及預(yù)防老年性皮膚病、腰椎頸椎疼痛等癥狀。檸檬酸鐵銨也能夠去除皮膚表面堆積的陳舊性角質(zhì)，清潔皮膚、疏通毛孔檸檬酸鐵銨一般不會(huì)對(duì)人造成較大的危害。檸檬酸鐵銨作為一種食品添加劑，一般并不會(huì)對(duì)身體組織器官功能造成損害，危害到身體健康，只是在少數(shù)情況下，可以引起嘔吐、、胃部疼痛、腹瀉等消化道不適癥狀。生活中使用檸

羧甲基纖維素2022/09/15: 天然纖維素是自然界中分布、含量最多的多糖，來(lái)源十分豐富。當(dāng)前纖維素的改性技術(shù)主要集中在醚化和酯化兩方面。羧甲基化反應(yīng)是醚化技術(shù)的一種。纖維素經(jīng)羧甲基化后得到羧甲基纖維素（CMC），其水溶液具有增稠、成膜、黏接、水分保持、膠體保護(hù)、乳化及懸浮等作用，廣泛應(yīng)用于石油、食品、醫(yī)藥、紡織和造紙等行業(yè)，是最重要的纖維素醚類之一。羧甲基纖維素（CMC）屬陰離子型纖維素醚類，外觀為白色或微黃色絮狀纖維粉末或白色粉末，無(wú)臭無(wú)味，無(wú)毒；易溶于冷水或熱水，形成具有一定粘度的透明溶液。溶液為中性或微堿性，不溶于乙醇、

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