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羥苯基熒光素

MCE 國際站：Hydroxyphenyl Fluorescein

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-111330

CAS：359010-69-8

中文名稱：羥苯基熒光素

Synonyms：HPF; 3'-p-(Hydroxyphenyl fluorescein

純度：99.91%

存儲條件：溶液, -20°C, 避光, 2年

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產品活性：Hydroxyphenyl Fluorescein (HPF) 是一種穩定的 ROS 熒光探針染料，比 H2DCFDA (HY-D0940) 的特異性與穩定性強。Hydroxyphenyl Fluorescein 通過羥基自由基，與細胞內過氧亞硝基反應，可產生強烈的綠色熒光。Hydroxyphenyl Fluorescein 可應用于熒光顯微鏡、高通量成像儀、熒光酶標儀或流式細胞儀。其熒光波長：Ex/Em=490/515 nm。

生物活性：羥苯基熒光素（HPF）是可以直接檢測高活性氧（hROS）的試劑。羥苯基熒光素選擇性地和劑量依賴性地與hROS反應，如羥基自由基和過氧亞硝酸鹽，表現出強熒光^[1][2] . 體外在與藍光照明的布雷他汀孵育（30 分鐘）后，羥苯基熒光素 (HPF) 的熒光大大增強。在 Ar 吹掃和非 Ar 吹掃條件下，羥苯基熒光素的熒光增強同樣有效，表明單線態氧作為中間體的參與是不可能的。使用羥苯基熒光素進行的熒光測量表明，羥苯基熒光素 (10 μM) 的熒光強度與硫脲濃度 (0-1 mM) 之間呈負線性關系^[1]。 體內：在 IR（電離輻射）前 20 分鐘，將羥苯基熒光素 (HPF) 探針（15 μl，25 μM）注射到麻醉小鼠的睪丸內。評估了氧化形式的 HPF 發出的熒光信號對 ?OH 的積累^[3]。

體外：HPF 工作液的配制1.1 制備儲存液用 DMSO 配制 10 mM 的 HPF。注：HPF 儲存液建議分裝后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。1.2 工作液的配制用預熱好的無血清細胞培養基或 PBS 稀釋儲存液，配制成 1-10 μM 的 HPF 工作液。注：請根據實際情況調整 HPF 工作液濃度，且現用現配。 細胞染色2.1 準備工作懸浮細胞：離心收集細胞，加入 PBS 洗滌兩次，每次 5 分鐘。貼壁細胞：棄去培養基，加入胰蛋白酶消化細胞。離心棄去上清后，加入 PBS 洗滌兩次，每次 5 分鐘。2.2 加入 1 mL HPF 工作液，室溫孵育 15 分鐘。2.3 400 g，4℃ 離心 3-4 分鐘，棄去上清。2.4 加入 PBS 洗滌細胞兩次，每次 5 分鐘。2.5 用 1 mL 無血清培養基或 PBS 重懸細胞后，在熒光顯微鏡或流式細胞儀下檢測。 MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

體內：在 IR（電離輻射）前 20 分鐘，將羥苯基熒光素 (HPF) 探針（15 μl，25 μM）注入麻醉小鼠的睪丸內。通過氧化形式的 HPF 發出的熒光信號評估 OH 的積累[3]。MCE 尚未獨立證實這些方法的準確性。它們僅供參考。

Emission (Em)：515

Excitation (Ex)：490

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參考文獻：

[1]. Ming-De Li, et al. Dynamics of Oxygen-Independent Photocleavage of Blebbistatin as a One-Photon Blue or Two-Photon Near-Infrared Light-Gated Hydroxyl Radical Photocage. J Am Chem Soc. 2018 Nov 21;140(46):15957-15968.