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Pimonidazole

MCE 國際站：Pimonidazole hydrochloride

品牌：MedChemExpress (MCE)

貨號：HY-105129

CAS：70132-51-3

中文名稱：鹽酸哌莫硝唑； 鹽酸乏氧示蹤劑

Synonyms：鹽酸哌莫硝唑

純度：99.94%

存儲條件：4°C，密封保存，遠離潮濕 *溶劑中：-80°C，6個月；-20°C，1個月（密封保存，遠離潮濕）

運輸條件：美國大陸的室溫；其他地方可能有所不同。

產品活性：Pimonidazole 是一種缺氧標記物，用于瘤內缺氧和細胞增殖的補充性研究。Pimonidazole 通過與大分子的共價結合或通過被還原形成還原性代謝物后在缺氧細胞中積累，可用于定性和定量評估腫瘤缺氧。

生物活性：哌莫硝唑是一種新型缺氧標志物，可用于補充研究腫瘤缺氧和腫瘤細胞增殖^[1]。哌莫硝唑通過與大分子共價結合或其硝基被還原后形成還原性代謝產物在缺氧細胞中蓄積，可用于腫瘤缺氧的定性和定量評估^[2]。 體外：外源性缺氧標記物哌莫硝唑是一種 2-硝基咪唑化合物，可在氧含量低于 1.3% 時與細胞大分子形成共價鍵。
< b>檢測：用小鼠單克隆抗體對哌莫硝唑進行免疫組化檢測，發現缺氧細胞。用用于增殖細胞核抗原（PCNA）的市售單克隆抗體檢測細胞增殖。利用光學顯微鏡定性評估缺氧和細胞增殖，并使用點計數和圖像分析軟件方法定量評估。
然后通過免疫熒光檢測哌莫硝唑-蛋白加合物細胞（90% 匯合度）用鹽酸哌莫硝唑(10-100 μM)，用完-全培養基或PBS稀釋，缺氧或常氧2-4小時。然后HBSS洗滌細胞4次，10%中性溶液固定10分鐘在室溫下用福爾馬林緩沖，用 tris 緩沖鹽水洗滌 3 次，并用帶有 DAPI 封片劑的 Prolong Gold 封片^[3]。為了監測內在缺氧信號，取出組織并胚胎在固定前用 400 μM 哌莫硝唑孵育 2 小時。使用抗哌莫硝唑蛋白加合物 (Hypoxyprobe) 的抗體^[4] 進行免疫染色。 體內：哌莫硝唑是一種 2-硝基咪唑，在缺氧細胞中被特異性還原激活，并與蛋白質、肽和氨基酸中的硫醇基團形成穩定的加合物。此外，檢測到的哌莫硝唑的量與體內腫瘤內的缺氧水平成正比。為這個有用的工具提供了以下協議來詢問缺氧水平？體內. 1.鹽酸哌莫硝唑以30 mg/ml的濃度懸浮于0.9%無菌生理鹽水或PBS中。 2.給多只小鼠靜脈（尾靜脈）注射60 mg/kg鹽酸哌莫硝唑哌莫硝唑溶液。 3.在用異氟烷或二氧化碳(CO2)對小鼠實施安-樂死之前，讓其在體內循環90分鐘。 注意：對于動物安-樂死：符合適當的 IACUC 協議！ 4. 處死小鼠，然后取出器官、稱重、快速冷凍，并儲存在 -80 的塑料閃爍瓶中°C. 5. 哌莫硝唑染料可用于石蠟包埋組織、冷凍組織和細胞系。器官嵌入 OCT，置于低溫恒溫器中，并切成 10 μm 厚的切片。將切片置于顯微鏡載玻片上進行染色。

體外：Pimonidazole 是一種外源性缺氧標記物，是一種 2-硝基咪唑類化合物，在氧濃度低于 1.3% 時與細胞大分子形成共價鍵。 檢測：免疫組化檢測匹莫硝唑可識別缺氧細胞使用小鼠單克隆抗體。用用于增殖細胞核抗原 (PCNA) 的市售單克隆抗體檢測細胞增殖。通過光學顯微鏡定性評估缺氧和細胞增殖，并使用點計數和圖像分析軟件方法定量評估。然后通過免疫熒光檢測 Pimonidazole hydrochloride-蛋白加合物用 Pimonidazole hydrochloride (10-100 μM) 處理細胞 (90% 匯合度) ，再用完-全培養基或 PBS 稀釋，缺氧或常氧 2-4 小時。然后 HBSS 洗滌細胞 4 次，10% 中性溶液固定 10 分鐘在室溫下用福爾馬林緩沖，用 tris 緩沖鹽水洗滌 3 次，并用帶有 DAPI 封片劑的 Prolong Gold 封片[3]。為了監測內在缺氧信號，取出組織并胚胎在固定前用 400 μM Pimonidazole hydrochloride 孵育 2 小時。使用針對 Pimonidazole hydrochloride 蛋白加合物的抗體進行免疫染色[4]。 MCE尚未獨立證實這些方法的準確性。僅供參考。

體內：Pimonidazole 是一種 2-硝基咪唑，在缺氧細胞中被特異性還原激活，并與蛋白質、肽和氨基酸中的硫醇基團形成穩定的加合物。此外，檢測到的 Pimonidazole hydrochloride 的量與體內腫瘤內的缺氧水平成正比。為這個有用的工具提供了以下方案來詢問體內的缺氧水平. 1.鹽酸 Pimonidazole hydrochloride 以 30 mg/mL 的濃度懸浮于 0.9% 無菌生理鹽水或 PBS 中。 2.給多只小鼠靜脈 (尾靜脈) 注射 60 mg/kg 的 Pimonidazole hydrochloride 3.讓小鼠體內循環 90 分鐘，然后用異氟烷或二氧化碳 (CO2) 對小鼠進行安-樂死。注意：對于動物安-樂死：符合適當的 IACUC 協議！ 4. 處死小鼠，然后取出器官、稱重、快速冷凍，并儲存在 -80°C 的塑料閃爍瓶中。 5. Pimonidazole hydrochloride 染料可用于石蠟包埋組織、冷凍組織和細胞系。器官嵌入 OCT，置于低溫恒溫器中，并切成 10 μM 厚的切片。將切片置于顯微鏡載玻片上進行染色。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

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參考文獻：

[1]. Varia MA, et al. Pimonidazole: a novel hypoxia marker for complementary study of tumor hypoxia and cell proliferation in cervical carcinoma. Gynecol Oncol. 1998 Nov;71(2):270-7.
[2]. Masaki Y, et al. Imaging Mass Spectrometry Revealed the Accumulation Characteristics of the 2-Nitroimidazole-Based Agent "Pimonidazole" in Hypoxia. PLoS One. 2016 Aug 31;11(8):e0161639.
[3]. Kristina Y Aguilera, et al. Hypoxia Studies with Pimonidazole in vivo. Bio Protoc
[4]. Stephanie M Evans, et al. Molecular probes for imaging of hypoxia in the retina. Bioconjug Chem. . 2014 Nov 19;25(11):2030-7.