【白細(xì)胞介素1β（IL-1β）簡(jiǎn)介】：是一種在各種細(xì)胞中產(chǎn)生的促炎癥細(xì)胞因子，包括單核細(xì)胞、組織巨噬細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞和其他上皮細(xì)胞。IL-1α和IL-1β都與相同的受體結(jié)合，并具有類(lèi)似甚至相同的生物學(xué)特性。這些細(xì)胞因子具有廣泛的活性，包括通過(guò)誘導(dǎo)IL-2的釋放刺激胸腺細(xì)胞的增殖，B細(xì)胞的成熟和增殖，有絲分裂的FGF樣活性和刺激滑膜細(xì)胞釋放前列腺素和膠原酶的能力。然而，IL-1β是一種分泌型的細(xì)胞因子，而IL-1α主要是一種細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子。

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常見(jiàn)樣本處理及要求：

【血清樣本】：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時(shí)或 4℃過(guò)夜，然后 1000×g 離心 20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：收集血液樣本應(yīng)避免溶血，因?yàn)榧t細(xì)胞在溶解時(shí)會(huì)釋放具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，這種情況下，ELISA實(shí)驗(yàn)中將會(huì)出現(xiàn)非特異性顯色反應(yīng)，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。另外，樣本還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榧?xì)菌可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

【血漿樣本】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注意事項(xiàng)：檢測(cè)前請(qǐng)仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)，查看該試劑盒針對(duì)抗凝劑是否有特殊要求。

【組織勻漿】：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱(chēng)重后將組織jian碎。將jian碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。

豬白細(xì)胞介素1β(IL-1β)科研ELISA試劑盒組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)參考說(shuō)明書(shū)）

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操作流程如下：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入酶標(biāo)試劑100μl（辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體）空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測(cè)定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

注意：我司ELISA試劑盒中每個(gè)試劑都有穩(wěn)定體系的作用，請(qǐng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作

上海軒澤康生物ELISA試劑盒種類(lèi)繁多，根據(jù)產(chǎn)品名稱(chēng)原理大致分為間接法、夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法、捕獲包被法（也稱(chēng)為反向間接法，比較少見(jiàn)）。其中各類(lèi)型試劑盒的基本原理可電詢(xún)我司業(yè)務(wù)人員進(jìn)行詳細(xì)了解。以下是關(guān)于各類(lèi)型ELISA試劑盒及適用類(lèi)型：

①間接法：測(cè)定總抗體或IgG抗體

②抗體夾心法：測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上大分子抗原

③抗原夾心法：測(cè)定抗體

④抗體競(jìng)爭(zhēng)法：測(cè)定抗體

⑤抗原競(jìng)爭(zhēng)法：測(cè)定只有一個(gè)抗原決定簇的小分子半抗原

⑥捕獲包被法：測(cè)定IgM,傳染病的早期診斷

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