TUNEL 法的實(shí)驗(yàn)原理
基本原理：對(duì)不同組織切片先增加細(xì)胞膜通透性，然后讓 rTDT 和生物標(biāo)記的 dTUTP 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在 rTDT 的輔助下 dTUTP 與核斷裂的 DNA 3』-OH 結(jié)合，再用 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素與 dTUTP 上的 biotin 結(jié)合（每個(gè)鏈霉親和素至少可以再結(jié)合 3 個(gè) biotin 分子），后用 DAB、過(guò)氧化氫與 SP 上的辣根過(guò)氧化物酶 HRP 發(fā)生氧化、環(huán)化反應(yīng)，形成苯乙肼聚合物而呈現(xiàn)棕褐色，終通過(guò)計(jì)數(shù)每張切片上不同視野中 TUNEL 陽(yáng)性細(xì)胞的比例來(lái)判斷細(xì)胞凋亡發(fā)生情況。
石蠟樣本：取下適當(dāng)?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中，甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間，4攝氏度保存運(yùn)輸；