国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

乙酰輔酶A羧化酶（ACC）測試盒

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義

ACC在生物體內催化乙酰輔酶A羧化生成丙二酰輔酶A，是脂肪酸和許多次生代謝產物合成的關鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。

測定原理

ACC能夠催化乙酰輔酶A、NaHCO3和ATP生成丙二酰輔酶A、ATP和無機磷，通過鉬酸銨定磷法測定無機磷的增加量來測定ACC活性。

需自備的儀器和用品

分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成

提取液：100mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：10mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；

試劑四：粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水，溶解后4℃可保存一周。

試劑五：粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水，溶解后4℃可保存一周。

試劑六：液體 25mL×1 瓶，室溫保存。

試劑七：10μmol/mL 標準磷貯備液 10mL×1 瓶，4℃保存。

樣本的前處理

1、細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

測定步驟

1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上，調節波長至660nm，蒸餾水調零。

2. 酶促反應試劑的配制和預熱：在試劑二瓶中加入2.5mL試劑一，充分溶解混勻；在試劑三瓶中加入2mL蒸餾水，充分溶解混勻；將試劑一、二、三在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘。

3、定磷試劑的配制：按H2O: 試劑四:試劑五:試劑六=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷試劑

              應為淺黃色，若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，定磷劑現用現配。

注意：配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

4、0.5μmol/mL 標準磷應用液配制：將試劑七20倍稀釋，即取 0.5mL試劑七加9.5蒸餾水，充分混勻。

5、酶促反應

37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）準確反應30min后，90℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，10000g 25℃離心5min，取上清

6、定磷

混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）保溫30min，冷卻至室溫，在 660nm處，蒸餾水調零，記錄各管吸光值A。標準管、空白管只要做一次即可，每個測定管需要設一個對照管。

注意：若測定管吸光值大于2，將樣品用提取液稀釋適當倍數后再進行測定，使吸光值小于2，可提高檢測靈敏度，計算公式中乘以相應稀釋倍數。

ACC活性計算： 

1、按組織蛋白濃度計算：

定義：每小時每毫克組織蛋白產生1μmol無機磷的量為一個 ACC活力單位。

ACC (μmol/h/mg prot)=(C標準管×V總)×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷

(V樣×Cpr)÷T=10×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr

2、按樣本鮮重計算： 

定義：每小時每g組織產生1μmol無機磷的量為一個 ACC活力單位。

ACC (μmol/h /g鮮重)=(C標準管×V總)×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管）×V總÷

(W× V樣÷V樣總)÷T=10×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷W

3. 按細菌或細胞密度計算：

定義：每小時每500萬細菌或細胞產生1μmol無機磷的量為一個 ACC活力單位。

ACC (U/104 cell)=(C標準管×V總)×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管）×V總÷

(500× V樣÷V樣總)÷T=0.02×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)

C標準管：標準管濃度，0.5μmol/mL；V總：酶促反應總體積，0.1mL；V樣：加入樣本體積，0.01mL ；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應時間，0.5小時；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g；500：細菌或細胞總數，500萬。

上海牧榮生物科技有限公司

1. 國內試劑耗材經銷代理。

2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

3. 提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。

4. 進出口貨物代理服務。

5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 質量保證，所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式，為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源，加強網絡建設，提高公司內部運作效率，為客戶提供方便、快捷的服務。

7. 公司突出創新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優惠的價格。

乙酰輔酶A羧化酶（ACC）測試盒