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| 供貨周期 | 一個月 | 貨號 | C5866 |
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epochlifescience：CloneRanger 拓撲異構(gòu)酶試劑盒
CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning Kit專為同等效率地克隆兩個平端片段而設計
零背景全拓撲異構(gòu)酶克隆試劑盒利用痘苗病毒拓撲異構(gòu)酶 I 的 DNA 鏈轉(zhuǎn)移活性，快速克隆長達 10 kb 的 DNA 片段。痘苗病毒 DNA 拓撲異構(gòu)酶 I 與含有 5' CCCTT↓ 切割識別基序的質(zhì)粒載體形成 3'-磷酰基中間體。然后，共價結(jié)合的拓撲異構(gòu)酶 I 將切割的載體 DNA 鏈轉(zhuǎn)移到帶有游離 5'-OH 末端的待克隆 DNA 片段（參見下圖）。該轉(zhuǎn)移反應快速且可重復。該試劑盒中包含的克隆載體 pCloneEZ-Omni-Amp/HC 和 pCloneEZ-Omni-Kan/HC 是經(jīng)過改造的高拷貝數(shù)質(zhì)粒，可耐受輕度毒性基因。可快速克隆劇毒基因。
不包括感受態(tài)細胞。
零背景：> 90% 的隨機挑選的克隆包含正確的插入片段。
快速：PCR片段與載體混合后立即轉(zhuǎn)化，無需孵育。
CloneSmarter™ Zero Background Topo Omni DNA Cloning 試劑盒流程圖：
套件尺寸 | ||
| 成分 | C5865-25/C5866-25（25 次反應） | C5865-50/C5866-50（50 次反應） |
| pCloneEZ-Omni-Amp/HC 或 pCloneEZ-Omni-Kan/HC (20 ng/μl) | 25微升 | 50 微升 |
| 10X 增強劑 | 30 微升 | 60 微升 |
| 對照插入物 lacZα (20ng/μl) | 10微升 | 10微升 |
| 空白對照載體 (100ng/μl) | 20 微升 | 20 微升 |
| M13F 測序引物 (10pmol) | 100 微升 | 100 微升 |
| M13R 測序引物 (10pmol) | 100 微升 | 100 微升 |
上海牧榮生物科技有限公司
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