詳細介紹
人蛋白激酶A(PKA)Elisa試劑盒吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體,適用多種標本類型并節約成本。其高效、靈敏、特異的抗體與高效、靈敏、特異的抗體使實驗曲線更*。是一款可以讓您放心選購的ELISA試劑盒產品。
規格:48次,96次
檢 測 范 圍 :7pg/ml-220pg/ml
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000
轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,
在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
人蛋白激酶A(PKA)Elisa試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這
屬于正常現象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0 的S0 號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5
倍,zui終結果乘以5 才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20 稀釋,即1 份的20×洗滌緩沖液加19 份的蒸餾水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min 后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍
干,如此洗板5 次。
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5 次。
人蛋白激酶A(PKA)Elisa試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗原100
μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,
如此重復洗板5 次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B 各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min 內,在450nm 波長處測定各孔的OD 值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel 工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD 值作縱坐標,繪制出
標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
人蛋白激酶A(PKA)Elisa試劑盒性能
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R 值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于0.1 U/ml。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6 個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗
者承擔,本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
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