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上海雅吉生物科技有限公司 |
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更新時(shí)間:2024-10-21 10:56:01瀏覽次數(shù):310
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人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a)Elisa試劑盒優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:速率法,20分鐘可完成20-40例樣本的測(cè)定。
2、取樣量微:取樣量?jī)H為50l左右
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
5、回收試驗(yàn): X =102%。
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣:可測(cè)各種動(dòng)物血清(漿)、組織等
人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a)Elisa試劑盒植物組織樣本的前處理:
1、勻漿介質(zhì):
一般采用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水(0.86%或0.9%),客戶可根據(jù)樣本及測(cè)定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。
2、組織勻漿液的制備:
①、手工勻漿:取組織塊(0.2g~0.5g)在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,將玻璃勻漿管置于冰水浴條件,手動(dòng)勻漿,30秒/次,間隔30秒,重復(fù)6~8次,制成20%的勻漿液。
②、機(jī)器勻漿:取組織塊(0.2g~0.5g)在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,機(jī)械式勻漿機(jī)(組織搗碎機(jī)或內(nèi)切式勻漿機(jī)),10000~15000轉(zhuǎn)/分,冰水浴條件下,15秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,制成20%的勻漿液。
③、液氮研磨:取組織塊(0.2g~0.5g)在冰冷的勻漿介質(zhì)中漂洗,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放
入研缽中,用眼科小剪盡快剪碎組織塊,加入液氮研磨至粉末狀(研磨要迅速),加入勻漿
介質(zhì),充分抽提,制備成20%的勻漿液。
鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片,顯微鏡下觀察細(xì)胞是否破碎,若沒有則可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。
勻漿上清液的制備:將制備好的20%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)3500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進(jìn)行測(cè)定(測(cè)定相應(yīng)指標(biāo)的同時(shí)需測(cè)一下相應(yīng)樣本的蛋白濃度,總蛋白測(cè)試盒本所有售)。
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