上海雅吉的質粒小量抽提試劑盒（通用型）是一種用于從大腸桿菌中進行小量質粒快速抽提的通用型離心柱式試劑盒。本試劑盒不僅適用于常用的EndA-菌株DH5α、JM109和XL-1 blue等，也適用于EndA+菌株如JM110、BL21（DE3）、TG1和HB101等，能有效避免EndA+菌株中高豐度核酸酶的污染，并適用于從糖類修飾水平高的野生菌株中提取質粒。

上海雅吉的質粒小量抽提試劑盒(通用型) (Plasmid Mini Preparation Kit for All Purpose, Plasmid Miniprep Kit for All
Purpose)是一種用于從大腸桿菌中進行小量質粒快速抽提的通用型離心柱式試劑盒。
      本試劑盒不僅適用于常用的EndA-菌株DH5α、JM109和XL-1 blue等，也適用于EndA+菌株如JM110、BL21(DE3)、TG1和HB101等，能有效避免EndA+菌株中高豐度核酸酶的污染，并適用于從糖類修飾水平高的野生菌株中提取質粒。
      野生型大腸桿菌中表達Endonuclease I，能切割并降解雙鏈DNA。編碼Endonuclease I的基因是endA，如果endA突變失活，其基因型會被標注為endA1，相應的突變菌株被稱為EndA-菌株，而野生型菌株則被稱為EndA+菌株。常見的EndA-和EndA+菌株參見附表1。從EndA+菌株中抽提的質粒，微量核酸酶和質粒結合而容易被共純化，導致容易降解，而本試劑盒增加了特殊的洗滌步驟(核酸酶洗滌液溶液PB洗滌)，可以有效避免EndA+菌株中抽提獲得的質粒容易降解的問題(參考圖1)。

 

 圖1. 使用溶液PB可以使從EndA+菌株JM110中抽提的質粒不易降解，而對于EndA-菌株DH5α中抽提的質粒沒有影響。使用本試劑盒時，如上圖所示，在使用和不使用溶液PB時的質粒得率*。但對于EndA+菌株JM110，不使用溶液PB時從其中抽提獲得的質粒在內切酶緩沖液Buffer Y中37℃孵育1小時后會全部降解，而使用溶液PB時同樣孵育1小時就不會降解。對于EndA-菌株DH5α無論是否使用溶液PB，抽提獲得的質粒的都很穩定。
      質粒小量抽提試劑盒(通用型)采用了一種新型的離子交換柱。在特定條件下，使質粒能在離心過柱的瞬間，結合到質粒純化柱上，在一定條件下又能將質粒充分洗脫，從而實現質粒的快速純化。無需酚氯抽提，無需酒精沉淀，12個樣品只需不足30分鐘即可完成。
      每個質粒純化柱可以結合的質粒量的上限約為20微克。每個純化柱可用于抽提1-5毫升用LB培養過夜的大腸桿菌。抽提所得質粒的OD260和OD280比值一般在1.80左右。抽提獲得的質粒量會受質粒拷貝數等因素影響。抽提獲得的質粒DNA的OD260和OD280比值也會因菌種不同等原因而略有波動。
      質粒小量抽提試劑盒(通用型)抽提所得到的質粒可直接用于轉染細胞，DNA測序，PCR，基于PCR的突變，體外轉錄，轉化細菌，內切酶消化等。本試劑盒在使用溶液PB的情況下，獲得的質粒的純度更高，內毒素含量低，總體上轉染細胞的效率會顯著提高。

包裝清單：

保存條件：
      室溫保存，一年有效。
質粒小量抽提試劑盒(通用型)注意事項：
      *次使用前把試劑盒提供的RNase A全部加到溶液I (懸浮液)中，混勻，并在瓶上做好標記。加入RNase A后4℃存放。
      *次使用前請根據說明書和瓶上的標示，在溶液IV (洗滌液)中加入相應體積的無水乙醇，混勻，并在瓶上做好標記。
      溫度較低時，溶液II和溶液III可能會有沉淀產生。使用前必須檢查一遍。如有沉淀，37℃水浴加熱溶解，混勻后使用。溶液II請勿過分劇烈混勻，否則會產生大量氣泡。
      溶液II使用完后，一定要蓋緊瓶蓋，防止被空氣中二氧化碳酸化。
      溶液II有強堿性，溶液II、溶液III、溶液PB和溶液IV對人體有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
      本試劑盒所有操作均在室溫進行，操作時無需冰浴。所有離心也均在室溫進行。
      廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄。
      本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。