天冬酰胺酶（EC 3.5.1.1）是天冬氨酸代謝中的關鍵酶。 它的主要用途是治療急性淋巴細胞白血病和淋巴母細胞淋巴瘤，其中天冬氨酸是一種必需氨基酸。BioAssay Systems的DASN-100試劑盒提供了一種便捷的熒光法方法，用于測量生物樣本中的天冬酰胺酶活性。在此檢測中，鄰苯二甲醛與釋放的氨反應，熒光強度在λex/em = 415/475 nm處的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioAssay Systems熱銷產品天冬酰胺酶測定試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點

- 安全且快速。非放射性檢測。檢測可在40分鐘內完成。

- 靈敏且準確。96孔板檢測的線性檢測范圍為1.1至300 U/L天冬酰胺酶。

- 便捷且高通量。均質“混合-孵育-測量"型檢測。可輕松自動化，每天可檢測數千個樣本。

應用

- 用于定量測定生物樣本中的天冬酰胺酶活性。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測）

- 檢測緩沖液：5 mL（20 mM）

- 標準品：50 ?L

- 20 mM底物：300 ?L

- 檢測試劑：5 mL

儲存條件

- 試劑盒在室溫下運輸。收到后將所有組分存于-20°C。

- 保質期：收到后6個月。

注意事項

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時應遵循實驗室試劑的常規預防措施。請參閱材料安全數據表以獲取詳細信息。

操作程序

- 本檢測基于動力學反應。為確保孵育時間一致，向樣本中加入工作試劑（WR）應迅速，混合應簡短但充分。建議使用多通道移液器。檢測可在室溫下進行。

- 試劑準備：在檢測前，將所有組分平衡至室溫，并在打開前短暫離心試管。每次檢測運行應新鮮配制工作試劑（WR）。

- 酶準備：酶應在酶緩沖液中制備，例如50 mM磷酸鉀（pH 7.4）。以下協議針對重組大腸桿菌天冬酰胺酶進行了優化。如果使用其他酶，建議您通過實驗確定每孔使用的最佳酶量。

- 樣本準備：

- 血清和血漿樣本必須至少稀釋1:10。

- 尿液必須在檢測前用水稀釋1:50。

- 標準品準備：將10 ?L 20 mM標準品與190 ?L檢測緩沖液混合，制備1 mM預混液。將10 ?L標準品移至每個孔中，并加入40 ?L檢測緩沖液。

- 反應準備：

1. 將每個樣本的10 ?L分別移至板的不同孔中。

2. 通過將每孔的2.5 ?L 20 mM底物和45 ?L檢測緩沖液混合，為所有樣本孔準備足夠的工作試劑（WR）。

3. 通過加入40 ?L工作試劑啟動反應。在室溫下孵育反應20分鐘。

4. 向所有樣本孔中加入50 ?L檢測試劑。輕拍板以混合并孵育20分鐘。在λex/em = 415/475 nm處測量熒光強度。

所需材料（但未提供）

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、黑色平底96孔板（例如Corning Costar）、離心管和酶標儀。

結果示例

在室溫下，使用1 mM天冬氨酸對高純度大腸桿菌天冬酰胺酶的不同量（300 U/L至9.37 U/L）進行了20分鐘的檢測。

文獻參考：

1. Batool, T et al. (2016) A comprehensive review on L-asparaginase and its applications. Applied Biochem. and Biotech. 178, 900-923.

2. Salzer, W. L et al. (2014). Development of asparaginase Erwinia chrysanthemi for the treatment of acute lymphoblastic leukemia. Annals of the New York Academy of Sciences, 1329, 81–92.

2. Sugawara, K, Oyama, F. (1981). Fluorgenic reaction and specific microdetermination of ammonia. J. Biochem. 89, 771–774. 

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區的高新技術生物技術公司，專注于研發、生產和銷售高品質的生化檢測試劑盒，產品種類齊全，主要用于科學研究和生物醫藥開發，以滿足生命科學行業日益增長的需求。BioAssay Systems在現代藥物發現領域擁有超過50年的豐富經驗，已經開發了超過250種用于藥物發現和生命科學研究的檢測試劑盒。產品主要包括：1.血液尿液化學；2.酶活性測定；3.能量代謝；4.氧化應激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測。

作為BioAssay Systems在中國區域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產品。

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