腺病毒是一種無包膜病毒，其衣殼呈二十面體結構，直徑為90到100納米，包含一個雙鏈DNA基因組，基因組大小在26到46 kb之間。重組腺病毒已被開發為基因傳遞載體，用于重組疫苗和基因治療應用，包括代謝紊亂和癌癥的治療。

傳統上，感染性顆粒通過噬菌斑形成單位（PFU）測定法在培養中測量，該方法根據稀釋度計算病毒噬菌斑的數量。這些方法耗時（10-14天），需要較長的感染期，并且存在高度的實驗間變異性和受病毒-細胞相互作用的影響。Cell Biolabs的QuickTiter?免疫測定試劑盒利用針對腺病毒六鄰體蛋白的抗體，通過免疫細胞化學染色觀察感染細胞。六鄰體蛋白是腺病毒衣殼中最大且豐富的結構蛋白，它們對稱分布以形成衣殼的面。

Cell Biolabs的QuickTiter?免疫測定試劑盒提供了一種快速且完整的系統，用于測定病毒的感染性滴度。該試劑盒提供的試劑足以在24孔板中進行多達100次滴定。與經典的噬菌斑測定法所需的10到14天感染期相比，該試劑盒僅需2天感染期。試劑盒中的六鄰體蛋白抗體通過免疫細胞化學識別所有51種腺病毒血清型，只要病毒能夠在A549或類似的易感細胞中擴增，就可以與任何腺病毒系統配合使用。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產品QuickTiter 野生型腺病毒滴度免疫試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

檢測原理

1. 在24孔板中接種A549細胞  

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2. 準備腺病毒稀釋液并感染A549細胞48小時  

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3. 使用抗腺病毒抗體進行免疫細胞化學（ICC）染色  

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4. 計數陽性細胞并計算病毒滴度  

相關產品

1. VPK-252：RAPAd? CMV腺病毒表達系統  

2. VPK-099：ViraBind?腺病毒小柱純化試劑盒  

試劑盒組成（藍冰運輸）

1. 抗腺病毒抗體（1000倍稀釋）（部件編號51681C）：一支30 ?L的管  

2. 二抗，HRP偶聯物（1000倍稀釋）（部件編號10902）：一支50 ?L的管  

3. DAB底物（25倍稀釋）（部件編號10903）：一支1.5 mL的管  

4. 稀釋液（10倍稀釋）（部件編號10905）：一瓶4.5 mL  

未提供材料

1. 感興趣的腺病毒  

2. A549細胞及細胞培養生長培養基  

3. 甲醇  

4. 1% BSA/PBS  

5. H?O?  

6. 光學顯微鏡  

保存方法

收到后，請將試劑盒中的所有組分保存在4℃。

結果示例

以下圖表展示了典型的滴定結果。以下數據僅供參考，不應用于解釋實際結果。

圖1：野生型Ad5滴定。** 使用純化的野生型Ad5進行10倍系列稀釋后，感染24孔板中的A549細胞48小時。按照檢測協議進行抗腺病毒免疫染色。

文獻參考：

1. Tatsis N, Ertl HC. (2004) Adenoviruses as vaccine vectors. Mol Ther. 10:616–629.

2. Vannucci L, Lai M, Chiuppesi F, Ceccherini-Nelli L, Pistello M. (2013) Viral vectors: A look back and ahead on gene transfer technology. New Microbiol. 36:1–22.

3. Mittal SK, Ahi YS, Vemula SV. (2016) Xenogenic adenoviral vectors. In: Curiel D,editor. Adenoviral Vectors for Gene Therapy. 2nd ed. San Diego,California: Academic Press; 495–528.

4. Vemula SV, Mittal SK. (2010) Production of adenovirus vectors and their use as a delivery system for influenza vaccines. Expert Opin Biol Ther. 10:1469–1487.

5. Sharma A, Tandon M, Bangari DS, Mittal SK. (2009) Adenoviral vector-based strategies for cancer therapy. Curr Drug Ther. 4:117–138.

6. Bangari DS, Mittal SK. (2006) Development of nonhuman adenoviruses as vaccine vectors. Vaccine. 24:849–862.

7. Bewig B., Schmidt WE (2000) Accelerated titering of adenoviruses. BioTechniques 28:870-873.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈（San Diego），是有名的細胞學試劑品牌，作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商，為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的g端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。  

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