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活性氧(ROS),如超氧陰離子(O??)和過氧化氫(H?O?),在所有生物體的代謝過程中不斷產生。在正常生理條件下,細胞內ROS的生成與抗氧化酶和其他氧化還原分子的作用保持平衡。然而,ROS的過度積累會導致細胞損傷,例如對DNA、蛋白質和脂質膜的損害。由于其潛在的有害影響,細胞必須通過多種抗氧化防御機制迅速清除過量的ROS。超氧化物歧化酶(SOD)是最重要的抗氧化酶之一,它催化超氧陰離子歧化為過氧化氫和分子氧。SOD酶分為三類:細胞質中的銅鋅SOD(Cu/Zn-SOD)、線粒體中的錳SOD(Mn-SOD)和細胞外的胞外SOD(Ec-SOD)。
我們的OxiSelect?超氧化物歧化酶活性檢測試劑盒采用黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶(XOD)系統生成超氧陰離子。試劑盒中包含的顯色劑在超氧陰離子還原作用下可產生水溶性甲臜染料。SOD的活性通過抑制顯色劑還原的程度來確定。
OxiSelect?超氧化物歧化酶活性檢測試劑盒是一種快速可靠的工具,可用于檢測細胞裂解液、血漿、血清和組織勻漿中的SOD活性。每套試劑盒提供足夠的試劑,可進行多達100次檢測,包括空白對照、SOD標準品和未知蛋白樣本。
作為Cell Biolabs全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產品OxiSelect超氧化物歧化酶活性化驗。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
OxiSelect超氧化物歧化酶活性化驗 | STA-340 | 查看 |
OxiSelect超氧化物歧化酶活性化驗檢測原理:
超氧陰離子(O??)由黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶(XOD)系統生成,然后通過顯色劑溶液進行檢測。然而,在SOD存在的情況下,超氧陰離子的濃度會降低,從而產生較弱的比色信號。
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試劑盒組成
1. SOD標準品(部件編號234001):提供1支100 ?L的5 Units/?L溶液。單位定義:在pH 7.8、25°C、3.0 mL反應體積的偶聯體系中,使用黃嘌呤和黃嘌呤氧化酶時,1個單位可將細胞色素c還原速率抑制50%。
2. 黃嘌呤溶液(部件編號234002):1支550 ?L溶液。
3. 黃嘌呤氧化酶溶液(150X)(部件編號234003):1支50 ?L溶液。
4. 顯色劑溶液(部件編號234004):1支550 ?L的棕色瓶裝溶液。
5. SOD檢測緩沖液(10X)(部件編號234005):2支1.5 mL溶液。
未提供材料
1. 96孔微孔板
2. 能夠在490 nm處讀取吸光度的微孔板讀取儀
儲存條件
將試劑盒組分在-20°C下保存。通過分裝避免多次凍融。顯色劑溶液對光敏感,應保存在棕色瓶中。
以下圖表展示了典型的OxiSelect?超氧化物歧化酶活性檢測結果。以下數據僅供參考,不應用于解讀實際檢測結果。
SOD活性(抑制百分比)=(OD空白 - OD樣本)/OD空白 × 100
SOD活性標準曲線。左:SOD活性與吸光度(OD)的關系。右:SOD活性與抑制百分比的關系。
文獻參考:
1. Lepock, J. R., Arnold, L. D., Torrie, B. H., Andrews, B., and Kruuv, J. (1985) Arch. Biochem.Biophys. 241, 243–251.
2. Lepock, J. R., Frey, H. E., and Hallewell, R. A. (1990) J. Biol. Chem. 265, 21612–21618.
3. Valentine, J. S., and Hart, P. J. (2003) Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 100, 3617-3622.
4. Zelko, I. N., Mariani, T. J., and Folz, R. J. (2002) Free Radic. Biol. Med. 33, 337-349.
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