国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

15000105423

technology

首頁   >>   技術文章   >>   答應我,看完再做ELISA(上)

愛必信(上海)生物科技有...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

答應我,看完再做ELISA(上)

閱讀:665      發布時間:2024-9-26
分享:

作為常見實驗技能之一的ELISA已經成功逼瘋了一大批研究生:加樣加到手抽筋,拍板拍到人發瘋。為此,小愛嘔心瀝血寫了一份ELISA實驗詳解,原理、步驟、注意事項一網打盡,幫助各位小伙伴快速入門并精通ELISA(分為上下兩篇噢)。


ELISA實驗原理

 

酶聯免疫吸附試驗 (Enzyme-linked Immunosorbent Assay,簡稱ELISA), 是一種利用抗原抗體結合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法,是免疫學經典實驗方法。ELISA可適用多種樣本類型,主要包括血清、血漿、細胞培養物上清液、細胞裂解物、唾液、組織裂解物和尿液等。

 

實驗名稱
特點

WB

IHC/IF

ELISA

 

 

 

定性

定量

半定量

半定量

定位

 

 

靈敏度

中高

樣本類型

組織
細胞

組織
細胞

血清
血漿
細胞培養上清
體液……

表1 ELISA與常規免疫實驗對比

 

ELISA實驗類型

 

1)直接法ELISA:將抗原固定在微孔板上,使用酶標抗體孵育抗原,最后加入酶反應的底物進行顯色反應,顯色產生信號與所結合的分析物量成正比;

2)間接法ELISA:將抗原直接固定在微孔板上,首先將不帶有標記的一抗加入微孔板,與板內抗原特異性結合,接著加入酶標二抗識別一抗,最后加入酶反應的底物進行顯色,顯色信號值與所結合的分析物量成正比;

3)夾心法ELISA:最常見的ELISA類型。兩種特異性抗體將抗原夾在中間,通常稱為配對的抗體對。將捕獲抗體包被在微孔板上,加入樣品后,捕獲抗體與樣本結合,然后再加入酶標記的檢測抗體,形成夾心抗體對,最后加入酶反應的底物進行顯色反應,顯色產生信號值與所結合的分析物量成正比。夾心法ELISA使用兩種抗體與抗原結合,因此特異性更高;

4)競爭法:將捕獲抗體包被在微孔板上,加入標記的抗原,該抗原可與樣本中的目標抗原競爭性結合捕獲抗體,樣品中存在的抗原越多,能夠與捕獲抗體結合的標記抗原就越少,加入底物并產生信號,信號值與樣品中存在的蛋白量成反比。

 

ELISA類型

優點

缺點

適用場景

直接法ELISA

操作簡單,實驗耗時短

a)僅使用一種抗體,所以特異性不夠高

b)如果來自樣本的所有蛋白質都被固定在孔中,則有可能出現高背景

評估抗體的親和力和特異性及研究阻斷/抑制相互作用

間接法ELISA

利用二抗進行信號放大

二抗可能引起交叉反應

測定內源性抗體

夾心法ELISA

a)高特異性和高靈敏度

b)與復雜的樣品基質兼容

a)實驗流程較長

b)配對抗體對的開發具有挑戰性

確定生物樣本中的分析物濃度

競爭法ELISA

能夠定量小分子

a)僅使用一種抗體,特異性不高

b)需要標記抗原

確定小分子和激素的濃度

表2 四種ELISA類型的比較

 

如何選擇合適的ELISA試劑盒


小伙伴們在了解了ELISA的原理和類型之后,是不是迫不及待要開始大展身手了,NO!最重要的ELISA試劑盒,我們還沒好好選一選呢。俗話說,兵馬未動,糧草先行,選擇一個有質量有保障并且適合自己實驗的ELISA試劑盒,才能夠保證后續實驗的順利進行。ELISA試劑盒的選擇和抗體的選擇一樣,我們都要考慮很多因素,包括以下方面:

1)樣本種屬:一般情況,不同種屬不能通用。小鼠、人或者其他家禽的因子檢測要選擇對應種屬的試劑盒。

2)待測因子表達水平:待測因子表達水平決定著我們要選擇的試劑盒的檢測限和靈敏度。

3)樣本類型:ELISA實驗可以檢測的樣本類型包括:血清、血漿、細胞培養上清、尿液等,不同的試劑盒適配的樣本類型不同。并且不同的樣本,預處理也會有所不同。

4)文獻支持:相同的種屬,指標、靈敏度,當然會選擇發表高分文獻多的那一個啦。

5) 試劑盒類型:ELISA的試劑盒有即用型和研發型兩種,即用型里面包括實驗所需的所有試劑,適合新手;研發型試劑盒需要自己包被微孔板,勝在經濟實惠,適合ELISA已經做得爐火純青的熟手。

6)儀器設備:ELISA 檢測方法有很多,但在實驗室中較普遍的方法是比色、熒光和化學發光法,其中比色法又是最常見的,每個孔中的顯色量用分光光度計讀取,樣品在彼此之間進行比較,或與用已知分析物濃度制成的標準曲線進行比較。也就是說,ELISA的實驗結果需要用酶標儀在對應的波長下檢測吸光度,一般也會使用雙波長測定(檢測波長和校正波長),所以酶標儀需要能夠設置到我們使用的兩個波長。

 

小愛在這里也給大家推薦兩個品牌的ELISA試劑盒,bio-techne旗下的R&D systems作為ELISA的金標準,一直致力于開發包括細胞因子、ELISA試劑盒、抗體、Luminex液相芯片、多因子檢測固相芯片在內的免疫學和細胞生物學產品,可提供即用型和研發型兩種ELISA試劑盒。Absin,中國人自己的生命科學百寶箱,也能夠提供即用型的ELISA試劑盒,包含一整套完整的試劑,國產的價格,進口的品質。

 

文中相關產品:


產品名稱

貨號

檢測范圍

Human IL-6 ELISA Kit

abs510003-96T

9.38pg/mL-600pg/mL

Human IL-6 ELISA Kit (Plus)

abs551103-96T

1.56-100pg/ml

Human IL-6 High Sensitivity ELISA Kit

abs551804-96T

0.31-20 pg/mL




 

Absin產品線:

爆款產品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細胞培養(類器官試劑盒+基質膠,胎牛血清+培養添加劑+細胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...

特色產品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 晋江市| 称多县| 砚山县| 长乐市| 开阳县| 太原市| 康马县| 贵港市| 宣武区| 宝清县| 同江市| 岳西县| 华容县| 铜梁县| 唐山市| 广汉市| 石景山区| 辽中县| 九龙县| 房产| 克东县| 巴楚县| 宜兰市| 鹿邑县| 白玉县| 宣城市| 阿拉善盟| 鄂托克前旗| 乐陵市| 中方县| 都匀市| 磐石市| 洪泽县| 噶尔县| 永善县| 金门县| 宝应县| 东港市| 拜泉县| 石门县| 永德县|