樣本收集:依據(jù)實驗?zāi)康模占m量的血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清。血清樣本需血液自然凝固后離心獲?。谎獫{樣本要在采血時添加合適抗凝劑,再離心分離;細胞培養(yǎng)上清按標準流程收集并離心去除細胞碎片等雜質(zhì)。收集好的樣本妥善保存,避免反復凍融。
試劑盒準備:從冰箱取出試劑盒,在室溫(20℃ - 25℃)平衡 30 分鐘,讓試劑盒內(nèi)各試劑溫度均勻。同時準備好移液器、吸頭、酶標儀等實驗器材,確保其性能良好。
加樣:將標準品、待測樣本及空白對照按規(guī)定體積準確加入微孔板相應(yīng)孔中,輕輕振蕩混勻,使樣本與包被抗體充分接觸,然后在設(shè)定溫度下孵育一定時間。
洗板:孵育結(jié)束,棄去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,徹di清除未結(jié)合的物質(zhì),減少非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干,防止殘留液體影響后續(xù)反應(yīng)。
加酶標抗體:向各孔加入適量酶標檢測抗體,振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止:加入底物顯色液,在避光條件下孵育,待顏色變化至合適程度時,加入終止液終止反應(yīng),使反應(yīng)停止在最佳檢測狀態(tài)。
結(jié)果測定:立即使用酶標儀在規(guī)定波長下測定各孔 OD 值,根據(jù)標準曲線計算出樣本中 sCD30 的含量。
高靈敏度:能夠檢測到極低濃度的 sCD30,滿足對微量樣本或低表達水平的檢測需求。
特異性強:試劑盒中的抗體對 sCD30 具有高度特異性,與其他類似物質(zhì)交叉反應(yīng)極小,保證檢測結(jié)果的準確性。
重復性好:同一批樣本多次檢測結(jié)果穩(wěn)定,變異系數(shù)小,為科研及臨床診斷提供可靠且可重復的數(shù)據(jù)支持。在應(yīng)用上,sCD30試劑盒可用于自身免疫性疾病病情評估、腫瘤疾病的輔助診斷與預(yù)后判斷等領(lǐng)域,助力醫(yī)學研究與臨床實踐的發(fā)展。