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NFKb ELISA 介紹
NF-κB ELISA，即核因子 κB 酶聯免疫吸附測定，是一種用于定量檢測生物樣本中核因子 κB（NF-κB）含量的關鍵技術，在細胞信號傳導研究、炎癥相關疾病探索及腫瘤學等眾多領域都有著不可huo缺的地位。
檢測原理
NF-κB 試劑盒 主要運用雙抗體夾心模式。試劑盒內的微孔板預先包被了針對 NF-κB 的特異性捕獲抗體。當加入血清、血漿、細胞裂解液等待測樣本時，樣本中的 NF-κB 蛋白會與包被抗體特異性結合。隨后添加酶標記的檢測抗體，該抗體能與已結合在包被抗體上的 NF-κB 進一步結合，從而構建起 “捕獲抗體 - NF-κB - 酶標檢測抗體" 的穩定免疫復合物。接著加入酶的底物溶液，在酶的催化作用下，底物發生顯色反應，顏色的深淺與樣本中 NF-κB 的含量成正比。通過酶標儀在特定波長下測定吸光度（OD 值），再與預先繪制好的標準曲線相對照，便能精確計算出樣本中 NF-κB 的含量。
操作流程
樣本采集與處理：依據實驗需求，收集適量樣本。若是血清，需讓血液自然凝固后離心獲取；血漿則要在采血時添加合適抗凝劑再離心分離；細胞裂解液需按照規范流程裂解細胞并離心去除細胞碎片等雜質。收集處理好的樣本妥善保存，防止反復凍融。
試劑盒準備：從冰箱取出試劑盒，室溫（20℃ - 25℃）平衡 30 分鐘，確保試劑盒內各試劑溫度一致。同時準備好移液器、吸頭、酶標儀等實驗器材，并檢查其性能是否正常。
加樣：將標準品、待測樣本及空白對照按規定體積準確加入微孔板相應孔中，輕輕振蕩混勻，使樣本與包被抗體充分接觸，然后在設定溫度下孵育特定時長。
洗板：孵育結束，棄去孔內液體，用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次，徹di清除未結合的物質，降低非特異性信號干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干，避免殘留液體影響后續反應。
加酶標抗體：向各孔加入適量酶標檢測抗體，振蕩混勻后再次孵育。
顯色與終止：加入底物顯色液，在避光條件下孵育，待顏色變化至合適程度時，加入終止液終止反應，使反應停止在最佳檢測狀態。
結果測定：立即使用酶標儀在規定波長下測定各孔 OD 值，根據標準曲線計算出樣本中 NF-κB 的含量。
性能優勢與應用
高靈敏度：能夠精準檢測到極低濃度的 NF-κB，滿足對微量樣本或低表達水平的檢測需求。
特異性強：試劑盒中的抗體對 NF-κB 具有高度特異性，與其他類似物質交叉反應極小，保證檢測結果的準確性。
重復性好：同一批樣本多次檢測結果穩定，變異系數小，為科研及臨床診斷提供可靠且可重復的數據支持。在應用方面，NF-κB試劑盒可用于研究炎癥性疾病的發病機制、評估腫瘤的發展進程等，為醫學研究和臨床實踐提供有力的數據支撐。