高靈敏度:能夠敏銳檢測(cè)到極微量的人 EpCAM,檢測(cè)下限可達(dá)皮克級(jí)別,滿足對(duì)低豐度 EpCAM 樣本的檢測(cè)需求,為深入探究 EpCAM 在生理和病理狀態(tài)下低表達(dá)水平時(shí)的功能提供有力支撐。
特異性強(qiáng):試劑盒內(nèi)的抗體歷經(jīng)嚴(yán)格篩選與優(yōu)化,對(duì)人 EpCAM 具有ji高特異性,與其他粘附分子及干擾物質(zhì)幾乎無交叉反應(yīng),有效杜絕假陽性結(jié)果,極大保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。
重復(fù)性佳:憑借嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝和完善的質(zhì)量控制體系,該試劑盒批內(nèi)和批間重復(fù)性表現(xiàn)優(yōu)異。多次重復(fù)檢測(cè)同一批次樣本,結(jié)果的變異系數(shù)(CV)被嚴(yán)格控制在極小范圍,實(shí)驗(yàn)人員可獲取穩(wěn)定且可重復(fù)的數(shù)據(jù),有力支撐科學(xué)研究的可重復(fù)性。
操作便捷:試劑盒配備齊全的試劑以及詳盡的操作說明書,實(shí)驗(yàn)步驟清晰明了,即便新手實(shí)驗(yàn)人員也能快速上手。整個(gè)檢測(cè)流程無需復(fù)雜儀器設(shè)備和高深專業(yè)技能,顯著節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間與人力成本。
檢測(cè)范圍寬:其檢測(cè)范圍覆蓋人 EpCAM 在正常生理以及多種病理狀態(tài)下常見的濃度區(qū)間,既能精準(zhǔn)檢測(cè)正常情況下低水平的 EpCAM 表達(dá),也能準(zhǔn)確測(cè)定在疾病或?qū)嶒?yàn)干預(yù)后可能出現(xiàn)的高水平 EpCAM 變化,適用于各類相關(guān)研究場(chǎng)景。
樣本準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖占濉⒀獫{、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本。確保樣本采集過程規(guī)范,避免污染、溶血等情況干擾檢測(cè)結(jié)果。若樣本采集后需保存,應(yīng)置于 - 20℃或 - 80℃冰箱,防止反復(fù)凍融。
試劑準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,使其恢復(fù)至室溫。按照說明書依次準(zhǔn)備好標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗體、底物、洗滌液等試劑。標(biāo)準(zhǔn)品需進(jìn)行系列倍比稀釋,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
加樣:將稀釋好的標(biāo)準(zhǔn)品和處理后的樣本加入預(yù)包被有抗人 EpCAM 抗體的微孔板中,同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照孔。輕輕振蕩使液體混合均勻,隨后將微孔板放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時(shí)間,促使樣本中的 EpCAM 與包被抗體充分結(jié)合。
洗滌:孵育結(jié)束后,倒掉孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 5 次,以清除未結(jié)合的物質(zhì),降低非特異性背景信號(hào)。每次洗滌后要將微孔板拍干,確保洗滌效果。
加酶標(biāo)抗體:向每孔加入適量酶標(biāo)抗體,再次輕輕振蕩混勻,放入 37℃恒溫孵育箱孵育一段時(shí)間,讓酶標(biāo)抗體與已結(jié)合在包被抗體上的 EpCAM 結(jié)合。
再次洗滌:重復(fù)洗滌步驟,去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。
顯色:向每孔加入底物工作液,輕輕振蕩混勻,將微孔板置于 37℃避光環(huán)境孵育,此時(shí)酶標(biāo)抗體上的酶會(huì)催化底物顯色,顏色會(huì)逐漸變深。
終止反應(yīng):當(dāng)顯色達(dá)到預(yù)期效果,加入終止液終止反應(yīng)。溶液顏色隨即固定,應(yīng)立刻使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定各孔吸光度值。
結(jié)果計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,依據(jù)樣本的吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對(duì)應(yīng)的 EpCAM 濃度,并結(jié)合樣本的稀釋倍數(shù)進(jìn)行校正,最終得出樣本中 EpCAM 的實(shí)際濃度。
腫瘤研究:EpCAM 在多種上皮來源的腫瘤如乳腺癌、結(jié)直腸癌、肺癌中高表達(dá),且與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。該試劑盒可用于檢測(cè)腫瘤患者樣本中 EpCAM 含量,輔助腫瘤早期診斷、病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估,同時(shí)為腫瘤靶向治療提供潛在靶點(diǎn)。
干細(xì)胞研究:在胚胎干細(xì)胞和上皮干細(xì)胞研究中,EpCAM 作為重要的細(xì)胞表面標(biāo)志物,可用于干細(xì)胞的分離、鑒定與培養(yǎng)。通過該試劑盒檢測(cè) EpCAM 含量,有助于深入了解干細(xì)胞的特性與分化機(jī)制。
發(fā)育生物學(xué)研究:在胚胎發(fā)育過程中,EpCAM 參與細(xì)胞間的粘附與信號(hào)傳導(dǎo),對(duì)組織器官的形成和發(fā)育至關(guān)重要。利用該試劑盒檢測(cè)不同發(fā)育階段樣本中 EpCAM 含量變化,有助于揭示胚胎發(fā)育的分子機(jī)制。