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奧林巴斯正置三目顯微鏡BX53的使用技巧

時間:2025/3/12閱讀:126
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以下是一些奧林巴斯正置三目顯微鏡 BX53 的使用技巧:


奧林巴斯BX53顯微鏡光路調(diào)節(jié)技巧

光源優(yōu)化:根據(jù)樣品的特性和觀察需求來調(diào)節(jié)光源強度。對于透明或較薄的樣品,使用較低的光源強度,避免過亮導致細節(jié)丟失;對于不透明或較厚的樣品,則可能需要增加光源強度。同時,可通過調(diào)節(jié)聚光鏡的高度和孔徑光闌來控制光線的匯聚和散射,使光線均勻地照亮樣品,獲得更好的對比度和清晰度。

光路校準:定期進行光路校準,確保光路系統(tǒng)的準確性。例如,檢查物鏡、聚光鏡和目鏡是否在同一光軸上,可通過觀察視野中心的樣品圖像是否在不同放大倍數(shù)下都保持清晰和居中,若有偏差,可使用顯微鏡的校準工具進行調(diào)整。


奧林巴斯BX53顯微鏡聚焦與成像技巧

粗調(diào)與微調(diào)配合:在開始觀察時,先使用粗調(diào)旋鈕快速找到樣品的大致位置,使樣品進入視野。然后,切換到微調(diào)旋鈕進行精細調(diào)節(jié),以獲得最清晰的圖像。在高倍鏡下觀察時,微調(diào)的精度尤為重要,要緩慢、小心地轉(zhuǎn)動微調(diào)旋鈕,以免錯過最佳聚焦點。

利用景深:根據(jù)樣品的厚度和觀察目的,合理利用景深。對于較薄的樣品,可以通過減小景深來突出樣品的細節(jié);對于較厚的樣品,則需要適當增大景深,以便觀察到樣品不同層面的結(jié)構(gòu)。可以通過調(diào)節(jié)物鏡的數(shù)值孔徑或聚光鏡的孔徑光闌來控制景深。

三目成像優(yōu)化:當使用三目接口連接成像設(shè)備時,先在雙目觀察下將圖像調(diào)節(jié)清晰,然后再切換到三目進行成像。同時,根據(jù)成像設(shè)備的特性,調(diào)整相機的曝光時間、增益等參數(shù),以獲得高質(zhì)量的圖像。


奧林巴斯BX53顯微鏡樣品制備與觀察技巧

樣品切片厚度:對于需要切片的樣品,切片厚度要適中。一般來說,對于細胞和組織樣品,切片厚度在 5-10 微米較為合適,過厚的切片會導致光線散射和成像模糊,過薄則可能會丟失樣品的一些結(jié)構(gòu)信息。

樣品染色:根據(jù)樣品的特點選擇合適的染色方法,以增強樣品的對比度和可見度。例如,對于細胞樣品,常用的蘇木精 - 伊紅(HE)染色可以使細胞核和細胞質(zhì)呈現(xiàn)不同的顏色,便于觀察細胞的結(jié)構(gòu);對于細菌樣品,革蘭氏染色可以區(qū)分革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌。

觀察順序:在觀察樣品時,建議先使用低倍物鏡進行整體觀察,了解樣品的大致形態(tài)和分布情況,然后再選擇感興趣的區(qū)域,切換到高倍物鏡進行詳細觀察。這樣可以避免在高倍鏡下盲目尋找目標,提高觀察效率。


奧林巴斯BX53顯微鏡特殊觀察模式技巧

相差觀察:在相差觀察模式下,要根據(jù)樣品的透明度和折射率差異,調(diào)節(jié)相差環(huán)的位置和聚光鏡的相位板,以突出樣品的相位差,使透明樣品的細節(jié)更加清晰可見。

熒光觀察:進行熒光觀察時,選擇合適的熒光激發(fā)塊和濾光片組合,以確保能夠有效地激發(fā)熒光并過濾掉不需要的光線。同時,要注意熒光染料的激發(fā)和發(fā)射波長范圍,避免不同熒光信號之間的干擾。此外,為了減少熒光淬滅,應(yīng)盡量縮短觀察時間,并在觀察過程中避免強光照射。

偏光觀察:對于具有雙折射特性的樣品,在偏光觀察時,需要旋轉(zhuǎn)載物臺,觀察樣品在不同角度下的偏光現(xiàn)象,以分析樣品的晶體結(jié)構(gòu)和取向等信息。同時,可以使用補償器來進一步增強偏光效果,提高觀察的準確性。


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