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1、吸附色譜法
在高效液相色譜法中,吸附色譜法是一種較為常見的檢測方法,它主要是以吸附劑作為固定相進行的相關測試,其中硅膠是運用多的吸附色譜固定相,流動相則通常會選擇一種或者多種有機溶劑的混合溶劑。不同的組分因與不同的固定相吸附力在吸附色譜中會被分離,在組分極性越大時,固定相吸附力也將越強,它所保留的時間也將更長。流動相的極性若越大,則具有更強的洗脫力,同時,組分的保留時間將會越短。
2、離子交換色譜法離子交換色譜法是一類以離子交換劑為固定相的色譜法,離子交換劑與組分會因不同的親和力而得以分離。在柱填料中含有極性可離子化的基團,如季銨離子、羧酸以及磺酸等,這些在適宜的pH值下會得到解離,并且吸引相反電荷的物質。因為離子型物質可以與柱填料產生相關的關系,從而能夠分離。在樣品中,各類組分會由于離子交換平衡常數的差異而分離,離子交換色譜的流動相通常為一定pH值的緩沖溶液,在有些時候也會加入少量的有機溶劑(如乙腈、乙醇、四***等),從而使組分在流動相中的溶解度增加。流動相的pH值對于離子交換劑的交換容量有一定的影響。
流動相的pH值對于弱堿性或者弱酸性的被分離組分來說還會影響其電離情況,流動相的pH值應保持待分離組處于離解狀態,如此方能被分離。在測定條件下,離子交換色譜法會呈現出離解狀態的組分,反相離子對色譜法在藥物分析中的運用也相當廣泛,它可運用于磺胺類藥物、生物堿、維生素以及抗生素等藥物分析。
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