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1、消毒物品的初步處理
凡接觸過病原微生物的醫療器械等物品均應先用化學消毒劑進行消毒，然后按照常規清洗，特別是傳染病房使用后的各類物品，要嚴格把關，先嚴密消毒后，再清洗消毒；有軸節、齒槽或縫隙的器械和其他物品，應盡可能張開或拆卸，進行*清洗；其他微生物、細胞等培養用物品應按照相關方法清洗干凈；洗滌后的物品應烤干，按各需要分包，防止交叉污染。
2、裝入滅菌物品前的準備
將待測滅菌物放入滅菌器之前，一定先檢查滅菌倉內的水位，防止水位過高或干燒；高壓滅菌器腔蓋要到旋轉到一定高度，過松，容易造成，滅菌過程中的蒸汽泄漏，過緊容易造成密封圈的摩擦變形，選擇有自動壓力連鎖裝置的滅菌器。
3、滅菌物品應多少事宜，布局合理
為了達到滅菌的目的，滅菌腔內的物品應不要太滿太緊，以利于蒸汽定量流通。滅菌物品體積過大蒸汽就不易床頭物品。下層物品擺放盡量稀疏，如果下層蒸汽量相對較少，分壓不夠，會造成滅菌不*，因此擺放時注意上下疊放，使有較多空隙，利于蒸汽穿透。如需對較小物品進行滅菌，應事先裝在蒸汽容易穿透的容器中，不能選用民用呂盒進行高壓滅菌。滅菌腔內的物品不能超過滅菌腔總容量的80%。
4、 必須充分除去冷空氣
壓力蒸汽滅菌器內蒸汽的溫度不僅與壓力有關，而且與蒸汽的飽和度有關。滅菌腔內冷空氣未排盡時，及時蒸汽壓力達到要求，溫度也上不到相應的高度，而且還會影響高壓蒸汽穿透物品的能力。故首先要排空冷空氣。冷空氣的排除是滅菌效果的可靠保障。
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