細(xì)胞侵襲

服務(wù)目的：

研究趨化因子或其他營養(yǎng)物質(zhì)對細(xì)胞侵襲的影響
服務(wù)原理：

將細(xì)胞種于上室，趨化因子等種于下室，細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑。與遷移實(shí)驗不同是侵襲實(shí)驗需要在小室聚碳酸酯膜上鋪設(shè)一層基質(zhì)膠。用以模仿體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)，細(xì)胞欲進(jìn)入下室，先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）將基質(zhì)膠降解，方可通過聚碳酸酯膜。計數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。

客戶提供：

1.提供檢測樣本的樣本信息、檢測應(yīng)用及檢測時間點(diǎn)等；

2.若客戶提供細(xì)胞：25T細(xì)胞培養(yǎng)瓶，灌滿培養(yǎng)基新鮮運(yùn)輸或提供細(xì)胞凍存管，干冰運(yùn)輸

服務(wù)流程：

1. matrigel在4℃過夜融化
   2. 稀釋matrigel至終濃度1mg/ml
   3. 在chamber上室底部中央垂直加入稀釋后的matrigel。37℃溫育4-5 h
   4. 所有細(xì)胞培養(yǎng)試劑和Transwell chamber放在37℃恒溫水浴箱溫育
   5. 消化培養(yǎng)至對數(shù)期的細(xì)胞，用無血清培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整濃度為5*10⁵/ml
   6. 在下室加入含20%血清的培養(yǎng)基。上室加入細(xì)胞懸液，37 ℃、5％CO²、飽和濕度條件下繼續(xù)培養(yǎng)24 h
   7. 取出chamber，吸干上室液體，移到預(yù)先加入甲醇的孔中，室溫固定30min
   8. 取出chamber，吸干上室固定液，移到預(yù)先加入結(jié)晶紫染液的孔中，室溫染色            15-30min；用PBS沖洗浸泡數(shù)次，取chamber，先用干棉簽將上室內(nèi)液體吸去，再用棉簽輕輕擦Matrigel凝膠和聚碳酯膜上表面的細(xì)胞
   9. 揭下膜表面上的細(xì)胞，晾干，封片
   10. 顯微鏡下計數(shù)，統(tǒng)計結(jié)果；（若不用保存底膜，可省去步驟9）

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

【本公司合作項目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實(shí)驗，病理實(shí)驗，免疫學(xué)實(shí)驗，細(xì)胞實(shí)驗，動物實(shí)驗，蛋白組學(xué)實(shí)驗等，能夠進(jìn)行藥效學(xué)評價、毒理學(xué)評價、細(xì)胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)！

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