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酶標(biāo)儀的分類(lèi)選購(gòu)
酶標(biāo)儀已經(jīng)逐漸成為了實(shí)驗(yàn)室里的常規(guī)儀器，普通酶標(biāo)儀的價(jià)格并不算高，不過(guò)若是沒(méi)選對(duì)合用的型號(hào)也相當(dāng)令人頭疼。購(gòu)買(mǎi)儀器往往比選試劑麻煩得多，各種各樣的參數(shù)難免讓人挑花了眼，怎樣才能找到適用的酶標(biāo)儀呢？
酶標(biāo)儀一般分為普通酶標(biāo)儀和多功能酶標(biāo)儀，普通酶標(biāo)儀的功能基本相當(dāng)于一個(gè)分光光度計(jì)，主要用于吸收光（OD值）檢測(cè)，我們一般用普通酶標(biāo)儀進(jìn)行蛋白/核酸定量、Elisa、MTT等常規(guī)實(shí)驗(yàn)。而多功能酶標(biāo)儀在此基礎(chǔ)上還可以進(jìn)行發(fā)光檢測(cè)和熒光檢測(cè)，能夠直觀反映出目標(biāo)分子在細(xì)胞內(nèi)的活性。多功能酶標(biāo)儀應(yīng)用相當(dāng)廣泛，包括：報(bào)告基因研究、分子間相互作用、信號(hào)傳導(dǎo)、藥物代謝和藥物篩選等等。
在選購(gòu)酶標(biāo)儀的時(shí)候，我們會(huì)首先面臨一個(gè)選擇，濾光片還是光柵？酶標(biāo)儀主要分為濾光片型和光柵型，分別以?xún)煞N不同方式生成特定波長(zhǎng)的激發(fā)光，一種是通過(guò)濾光片，一種是通過(guò)單色器（包括光柵和棱鏡）。對(duì)于我們使用者來(lái)說(shuō)，這兩種酶標(biāo)儀究竟有何區(qū)別呢？
濾光片透光度高，光路簡(jiǎn)單，能夠zui大程度減少光線(xiàn)的損失，因此濾光片型酶標(biāo)儀一般要比光柵型酶標(biāo)儀靈敏。此外，濾光片能夠?qū)崿F(xiàn)快速的波長(zhǎng)轉(zhuǎn)換，很適合離子通道比率分析以及雙信號(hào)快速動(dòng)力學(xué)分析等。濾光片的配置決定了酶標(biāo)儀所能使用的波長(zhǎng)，我們更改實(shí)驗(yàn)波長(zhǎng)就是在切換濾光片。濾光片型酶標(biāo)儀一般要比光柵型便宜一些，如果我們需要的波長(zhǎng)比較固定，對(duì)靈敏度又有較高要求，那么濾光片型酶標(biāo)儀無(wú)疑是*選擇。若是日后想要應(yīng)用其他波長(zhǎng)，還需另外購(gòu)買(mǎi)濾光片，要是需添置的波長(zhǎng)多就不大合算了。所以在我們出手之前一定要先想好未來(lái)可能進(jìn)行的各項(xiàng)研究，謀定而后動(dòng)。
目前市面上的光柵型酶標(biāo)儀其實(shí)比濾光片型更為普遍，這是因?yàn)楣鈻趴梢造`活設(shè)置波長(zhǎng)，就算臨時(shí)開(kāi)展新研究也不用專(zhuān)門(mén)去買(mǎi)濾光片。而且如果我們要用未知染料進(jìn)行檢測(cè)，或是需要自定義波長(zhǎng)和光譜掃描，就只能選光柵型酶標(biāo)儀。此外，光柵在近紫外區(qū)的檢測(cè)效率也更高（如色氨酸熒光檢測(cè)）。zui先推出光柵型酶標(biāo)儀的是MD公司，MD酶標(biāo)儀采用一個(gè)光柵和一個(gè)濾片濾光的單光柵系統(tǒng)。后來(lái)又出現(xiàn)了兩個(gè)光柵組成的濾光系統(tǒng)，例如PE、TECAN、Thermo、BioTek等公司的一些產(chǎn)品，這類(lèi)系統(tǒng)由于激發(fā)和發(fā)射各用兩個(gè)光柵也被稱(chēng)為四光柵系統(tǒng)。
總的來(lái)說(shuō)，如果實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用很多需要多種波長(zhǎng)，那么選擇靈活方便的光柵型酶標(biāo)儀準(zhǔn)沒(méi)錯(cuò)。若是應(yīng)用比較單一但對(duì)靈敏度要求高，物美價(jià)廉的濾光片型酶標(biāo)儀就相當(dāng)貼心。此外，還有BioTek公司的Hybrid Technology系統(tǒng)，該系統(tǒng)將濾光片和單色器組合起來(lái)，想用濾光片時(shí)選濾光片，想用光柵時(shí)選光柵，就是這么簡(jiǎn)單。
適合的才是的不論我們買(mǎi)什么，適合自己的才是的，選擇酶標(biāo)儀時(shí)也是如此。酶標(biāo)儀性能指標(biāo)包括測(cè)定波長(zhǎng)范圍、濾光片配置、檢測(cè)速度、吸光度范圍、線(xiàn)性范圍、分辨率、準(zhǔn)確度、精密度等。
對(duì)于一般生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，酶標(biāo)儀主要可用于基因表達(dá)、信號(hào)傳導(dǎo)、ELISA、蛋白和核酸定量、細(xì)胞活性分析和免疫分析。如果要進(jìn)行細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)，酶標(biāo)儀一般要能夠底部讀取、微孔板掃描、并支持孵育和搖晃。而要做高通量篩選的實(shí)驗(yàn)室，就需要考慮到檢測(cè)速度和靈敏度。高通量篩選可能涉及到特殊篩選溶液、更低的檢測(cè)限以及大量微孔板。在選擇酶標(biāo)儀時(shí)除了要關(guān)注可靠性、靈敏度和一致性以外，能否對(duì)微孔板所有孔進(jìn)行同時(shí)檢測(cè)也是不可忽視的考量因素。