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全自動定氮儀測定小麥籽粒蛋白質
全自動定氮儀測定小麥籽粒蛋白質
摘要
目的：考察全自動定氮儀測定小麥籽粒蛋白質的可行性。
方法：以皖麥44和煙麥19為供試品種, 應用全自動凱氏定氮儀測定小麥籽粒蛋白質, 研究該測定方法的度和準確性, 并與經典凱氏定氮法的測定結果進行比較。
結果：皖麥44全麥粉總氮量的添加回收率在99. 38% ~ 100. 35%; 皖麥44和煙農19的蛋白質含量10次平行測定結果的變異系數分別為0. 60和0.84, 符合國標方法允許誤差的要求; 經顯著性測驗表明, 全自動定氮儀與經典的凱氏定氮法對皖麥44和煙農19全麥粉的蛋白質測定結果無顯著性差異。
結論：用全自動定氮儀測定小麥籽粒蛋白質的結果與經典凱氏定氮法的吻合, 不僅具有很好的度和準確度, 還具有操作簡便和快速省力的特點, 可廣泛用于小麥籽粒的蛋白質含量測定。
關鍵詞 小麥;蛋白質含量;全自動定氮儀
Abstract
Objective：The study ami ed to investigate the feasibility of de term ining prote in in wheat gra ins byFull AutomaticKjeldahl apparatus.
Method：WithWanmai 44 and Yannong 19 as the tested varieties, their gra in pro te in was determ ined by Autom aticAzotometer to study the precision and accuracy o f this determ iningm ethod and its determ ined resultw as compared w ith that by the c lassicalK je-ldahlm ethod.
Result：The totalN amount in wholemea l ofWanm ai 44 had the fortified recovery ra te of 99. 38% - 100.35%. The varia tioncoe fficient o f 10 para lle l determ ina tions on prote in contents in who lem ea l ofW anma i44 and Yannong 19 were 0. 60 and 0.84 resp. , which accordedthe error request for national standard that could be allow ed. The significant test show ed that therewas no significant difference of protein content either inW anm ai 44 or Yannong 19 between the autom atic azotometerm ethod and the classica lK jeldahl method.
Conclusion：Full AutomaticKjeldahl apparatus in determ ination on the protein in wheat g rains inosculated w ith that by the classica lK je ldahlm ethod, and it not only had very good prec ision and accuracy for determ ination, but a lso had characters of smi p le opera tion, rap id and laboursaving, which could bew idely applied in determ ining protein in wheat.
Key words Whea;t Prote in conten;Full Automatic Kjeldahl apparatus
小麥品質差異在很大程度上影響其經濟價值, 其中蛋白質含量是衡量加工品質的重要指標。蛋白質為復雜的含氮有機化合物, 其含量測定通常采用經典的凱氏定氮法, 此法是食品標準GB /T5009. 5-2003的法定檢測方法[1] , 但由人工操作, 比較費時, 檢測結果的準確性易受人為因素影響, 且所需試劑較多, 對環境不利。現上普遍采用自動定氮儀檢測蛋白質, 該法具有自動、省時、準確, 減少環境污染等優點。經典的凱氏定氮法與自動定氮儀的原理是一致的, 不同之處在于前者使用經典凱氏定氮燒瓶及定氮蒸餾裝置進行樣品消化和蒸餾, 手工滴定計算結果; 而后者利用消化器和氮含量自動測定儀器獨立進行計算。自動定氮儀已廣泛地用于牛奶、大豆、肉制品、食用菌、肥料等不同樣品的檢測, 結果與經典的凱氏定氮法一致[ 2- 7] 。筆者應用全自動凱氏定氮儀對小麥籽粒進行測定, 考察該方法的可行性。
1 材料與方法
1. 1 材料
1. 1. 1 供試樣品：小麥品種皖麥44、煙麥19。
1. 1. 2 儀器：全自動定氮儀、消解儀;萬分之一電子分析天平;磨粉儀。
1. 1. 3 試劑：0. 10 mol/L硫酸標準溶液、400 g/L氫氧化鈉溶液、濃硫酸、含溴甲酚綠和甲基紅指示劑的2%硼酸吸收溶液、硫酸銨(以上試劑均為分析純);催化劑(硫酸鉀和硫酸銅)。
1. 2 方法
1. 2. 1 經典凱氏定氮法：按GB /T 5009. 5-2003 規定執行[ 1] 。
1. 2. 2 自動定氮儀檢測法：將小麥籽粒烘干后, 在磨粉儀中磨成全麥粉。用萬分之一天平準確稱取1. 000 0 g的全麥粉放入消化管中, 加入兩片催化劑片, 再加12m l左右濃硫酸慢慢搖動將樣品浸濕, 將消化管放入已預熱至420度的消化器, 消化約60 m in 樣品消化呈透明藍綠色液體, 取出冷卻15~ 20 m in, 將消化管放入全自動定氮儀蒸餾裝置中, 關上安全門, 儀器自動蒸餾、滴定并得出結果。
2 結果與分析
2. 1 方法準確度 準確稱取皖麥44全麥粉1 g左右, 添加不同量的硫酸銨標樣, 共5 個處理, 每處理標樣含氮量分別為1. 92、5. 46、10. 54、15. 71、20.80 mg進行氮回收試驗, 每個處理3次重復, 結果見表1。從表1可以看出, 總氮量的添加回收率為99. 38% ~ 100. 35%, 表明全自動凱氏定氮儀準確度良好。
2. 2 方法精密度 測定皖麥44和煙農19的全麥粉, 每個品種平行測定10次。皖麥44和煙農19 的蛋白質含量平行測定結果變異系數分別為0. 60% 和0. 84%, 均小于1. 00%, 見表2。結果表明,全自動定氮儀的度良好, 符合國標方法允許誤差的要求。
2. 3 方法對比 用全自動定氮儀和經典的凱氏定氮法分別對皖麥44、煙農19的蛋白質含量進行測定,每個處理3次重復, 結果見表3。經顯著性測驗, | t |= 0. 971< t0. 05, 5 = 2. 571, P > 0. 05, 說明這兩種方法對同一樣品的測定結果無顯著性差異。
3 小結
根據上述試驗結果可以看出, 用含量, 其測定度和準確度很好, 測定結果與經典的凱氏定氮法吻合, 并且全自動定氮儀操作簡便、快速省力, 可廣泛應用于小麥籽粒的蛋白質含量測定。
參考文獻
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2003.
[ 2] 于雯, 呂玉瓊. 全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質[ J]. 中國衛生檢驗雜志, 2001,
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[ 3] 王丹紅, 周黎榕, 傅弘毅, 等. 采用模塊式消化、全自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質
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[ 4] 陳小葵. 自定氮儀測定肉制品中的蛋白質[ J]. 肉類工業, 2002, 254( 6) :16- 17.
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[ 7] 王鈁, 陳建文, 華楚衍, 等. 應用全自動定氮儀測定有機肥氮含量的探討[ J] . 浙江農業
科學, 2006( 6): 703- 704.