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產品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
產品簡介
白細胞介素-18（IL-18），也稱為IL-1F4，是一種屬于IL-1超家族的促炎細胞因子，由巨噬細胞和其他細胞產生。成熟的人IL-18與小鼠和大鼠IL-18具有大約63%的氨基酸序列同一性。IL-18的激活是由感染或組織損傷誘導的，并導致慢性炎癥的疾病病理學。在IL-12或IL-15存在的情況下，IL-18通過誘導IFN-γ的產生以及CD8+T細胞和NK細胞的溶解活性來增強抗病毒Th1免疫應答。在不存在IL-12或IL-15的情況下，IL-18促進CD4+T細胞和嗜堿性粒細胞產生Th2細胞因子IL-4和IL-13。IL-18還促進髓系樹突狀細胞成熟并觸發中性粒細胞呼吸爆發。在癌癥中，IL-18表現出多種活性，包括增強抗腫瘤免疫、抑制或促進血管生成、促進腫瘤細胞轉移。
翌圣Mouse IL-18 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素18(Mouse IL-18)。特異性抗小鼠白介素18抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的小鼠白介素18與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中小鼠白介素18的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 98011ES48 / 98011ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 31.25-2000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 小鼠 |
檢測時長 | 4.5小時 |
靈敏度 | 17.44 pg/mL |
稀釋線性 | 82 - 121% |
回收率 | 93 - 124% |
板內差 | 3.6% |
板間差 | 5.2% |
實驗數據
標曲數據
濃度（pg/mL） | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | |
2000 | 2.719 | 2.785 | 2.752 | 2.207 |
1000 | 1.794 | 1.769 | 1.782 | 1.296 |
500 | 1.097 | 1.017 | 1.057 | 0.683 |
250 | 0.611 | 0.570 | 0.590 | 0.346 |
125 | 0.342 | 0.309 | 0.325 | 0.183 |
62.5 | 0.197 | 0.180 | 0.189 | 0.108 |
31.25 | 0.125 | 0.113 | 0.119 | 0.074 |
0 | 0.040 | 0.039 | 0.040 | / |
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
靈敏度檢測
IL-18的檢測限為17.44 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定8次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測24次，評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
8 | 8 | 8 | 24 | 24 | 24 | |
平均值 | 1287.1 | 282.8 | 98.3 | 1273.2 | 283.6 | 102.4 |
標準差 | 43.8 | 11.1 | 3.4 | 75.4 | 11.7 | 5.6 |
變異系數（%） | 3.4 | 3.9 | 3.5 | 5.9 | 4.1 | 5.5 |
回收率檢測
通過不同水平的IL-18添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 117.5 | 100.3-124.3 |
血漿 | 106.1 | 93.3-113.8 |
細胞培養上清 | 111.8 | 100.8-121.6 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 97.5 | 91.1-103.9 |
1:04 | 99.9 | 94.9-108.5 |
1:08 | 104.1 | 99.1-108.3 |
1:16 | 99.3 | 93.6-106.3 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 101.5 | 85.2-112.2 |
1:04 | 94.5 | 89.5-103.7 |
1:08 | 109.6 | 98.4-120.3 |
1:16 | 105.8 | 92.3-116.3 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 93.0 | 81.7-102.8 |
1:04 | 97.4 | 93.1-101.5 |
1:08 | 114.0 | 104.5-120.7 |
1:16 | 110.1 | 95.2-120.0 |
樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值（pg/mL） | 樣本值（pg/mL） |
血清 | 10 | 71.6 | n.d.-142.1 |
血漿 | 8 | 87.1 | n.d.-179.8 |
細胞培養上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得31.25 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素18。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | |
GM-CSF | IL-6 | IFN-γ |
IFN-γ | IL-10 | IL-1α |
IL-1α | IL-12 | IL-1β |
IL-1β | IL-17A | IL-4 |
IL-2 | IL-18 | IL-6 |
IL-3 | IL-23 | IL-10 |
IL-4 | TNF-α | IL-17A |
IL-5 | TNF-α | |
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |
