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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 兩周 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
產品簡介
IL-1又稱為淋巴細胞刺激因子，細胞來源主要由活化的單核-巨噬細胞產生，主要存在形式為IL-1α和IL-1β，在體內發揮免疫調節作用。IL-1α作為IL-1家族主要成員，還可在上皮細胞、內皮細胞和基質細胞中表達，參與各種免疫反應、炎癥過程和造血。可通過多種刺激在造血細胞和非造血細胞中上調。在非造血細胞中，IL-1α以TAK1依賴的方式通過髓系細胞上的IL1R發出信號，以誘導促炎細胞因子的表達。IL-1α也在病毒、真菌或原生動物感染后中性粒細胞的募集和宿主防御中發揮作用。IL-1α產生的失調與許多自身炎癥性疾病相關，目前白介素1α的治療潛力被科研人員關注，越來越多的臨床試驗將它們作為治療藥物和靶點。
翌圣Mouse IL-1α ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素1α(Mouse IL-1α)。特異性抗小鼠白介素1α抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的小鼠白介素1α與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中小鼠白介素1α的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
貨號 | 98012ES48 / 98012ES96 |
規格 | 48 T / 96 T |
檢測范圍 | 15.63-1000 pg/mL |
檢測方法 | 雙抗夾心法 |
檢測物種 | 小鼠 |
檢測時長 | 4.5小時 |
靈敏度 | 6.64 pg/mL |
稀釋線性 | 84 - 125% |
回收率 | 74 - 111% |
板內差 | 5.3% |
板間差 | 5.9% |
濃度（pg/mL） | 顯色值 | 平均值 | 校準值 | |
1000 | 2.719 | 2.785 | 2.752 | 2.752 |
500 | 1.794 | 1.769 | 1.782 | 1.783 |
250 | 1.097 | 1.017 | 1.057 | 1.054 |
125 | 0.611 | 0.570 | 0.590 | 0.592 |
62.5 | 0.342 | 0.309 | 0.325 | 0.328 |
31.25 | 0.197 | 0.180 | 0.189 | 0.188 |
15.63 | 0.125 | 0.113 | 0.119 | 0.115 |
0 | 0.040 | 0.039 | 0.040 | / |
實驗數據
標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
標準曲線圖
靈敏度檢測
IL-1α的檢測限為6.64 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定8次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測24次，評估酶標板間的精密度。
項目 | 板內精密度 | 板間精密度 | ||||
樣本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
8 | 8 | 8 | 24 | 24 | 24 | |
平均值 | 457.5 | 107.3 | 28.3 | 463.6 | 105.7 | 29.4 |
標準差 | 28.1 | 4.5 | 1.5 | 32.1 | 4.0 | 2.0 |
變異系數（%） | 6.1 | 4.2 | 5.5 | 6.9 | 3.8 | 6.9 |
回收率檢測
通過不同水平的IL-1α添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍（%） |
血清 | 94.6 | 78.0-110.9 |
血漿 | 80.9 | 73.7-89.8 |
細胞培養上清 | 95.8 | 78.5-104.8 |
稀釋線性檢測
血清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 98.6 | 91.0-105.7 |
1:04 | 107.2 | 110.3-105.9 |
1:08 | 117.5 | 114.5-121.6 |
1:16 | 103.7 | 98.4-107.4 |
血漿稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 94.5 | 83.8-103.3 |
1:04 | 109.3 | 98.0-120.1 |
1:08 | 112.2 | 111.5-112.8 |
1:16 | 110.5 | 103.3-124.8 |
細胞培養上清稀釋比例 | 平均期望值(%) | 范圍（%） |
1:02 | 102.7 | 92.2-114.2 |
1:04 | 111.4 | 103.5-115.8 |
1:08 | 107.5 | 104.6-109.1 |
1:16 | 101.7 | 98.2-106.6 |
樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
樣本類型 | 樣本數目 | 平均值（pg/mL） | 樣本值（pg/mL） |
血清 | 8 | n.d. | n.d. |
血漿 | 8 | n.d. | n.d. |
細胞培養上清 | 4 | n.d. | n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得15.63 pg/mL
測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素1α。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
Recombinant human: | Recombinant Mouse: | Recombinant Rat: | ||
IFN-γ | IL-6 | IFN-γ | IL-6 | IFN-γ |
IL-1α | IL-10 | IL-1β | IL-10 | IL-1β |
IL-1β | IL-12 | IL-1ra | IL-13 | IL-2 |
IL-1ra | IL-13 | IL-2 | IL-21 | IL-4 |
IL-2 | IL-16 | IL-4 | IL-22 | IL-6 |
IL-4 | IL-17 | IL-5 | IL-10 | |
IL-5 | IL-22 | |||
檢測簡圖
疑問解答
問題 | 造成原因 | 解決方法 |
標曲不好 | 移液量不準確 | 檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
稀釋方法不恰當 | ||
顯色值偏低 | 孵育時間太短 | 給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
移液量不足或稀釋不當 | 校準移液器和規范操作 | |
CV偏高 | 酶標板清洗不當 | 使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
受污染的洗液 | 準備新鮮洗液 | |
靈敏度較低 | 試劑盒儲存不當 | 按照產品組分表進行保存。 |
