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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 25KU |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 20157ES25 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品介紹
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU | -20℃ | 1125.00 |
20157ES50 | 50 KU | -20℃ | 1965.00 | |
20157ES60 | 100 KU | -20℃ | 3245.00 | |
20157ES80 | 1 MU (1000 KU) | -20℃ | 27585.00 | |
20157ES90 | 5 MU (5000 KU) | -20℃ | 118655.00 |
產品描述
UltraNuclease（全能核酸酶），又稱非限制性核酸內切酶、廣譜核酸酶；是一種來源于Serratia Marcescen的非特異性核酸內切酶，可在鏈內任意核苷酸間進行切割，將核酸*消化成2-5個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸，能夠在非常廣泛的條件下（6 M Urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF）降解各種形式的（雙鏈，單鏈，線狀，環狀，天然或變性）DNA和RNA，廣泛用于去除生物制品中的核酸。
本品經基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表達純化并在GMP環境下制備，不僅可在科學研究中降低細胞上清和細胞裂解液的粘度，提高蛋白純化效率及功能研究；還可以應用在病毒純化、疫苗生產、蛋白和多糖類制藥工業作為宿主殘留核酸去除試劑，將宿主殘留核酸降至皮克（pg）級別從而提高生物制品功效和安全性；并且可以有效防止細胞治療和疫苗研究中人外周血單核細胞（PBMC）的結團。
本品以無菌液體酶的形式提供，儲存于緩沖液（20 mM Tris-HCl pH 8.0，2 mM MgCl2，20 mM NaCl，50%甘油）中，無色透明液體。
產品性質
來源 | E. coli |
生產管理標準 | ISO9001/GMP |
分子量（Molecular Weight） | 26.5 kDa |
等電點 | 6.85 |
純度（Purity） | ≥ 99%（SDS-PAGE） |
酶活（Enzyme Activity） | ≥ 250 U/μL |
比活（Specific Activity） | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
最適pH（Optimum pH） | 8.0（工作范圍pH 6-10） |
最適溫度（Optimum Temperature） | 37℃（工作范圍0-42℃） |
輔助因子（Cofactor） | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性（Protease） | Undetected |
無菌檢查（Sterility） | Undetected |
內毒素（Endotoxin） | < 0.25EU/1000U |
宿主蛋白殘留（Host protein） | < 10ppm（μg/mL） |
儲存緩沖液（Storage Buffer） | 20 mM Tris-HCl pH8.0，2 mM MgCl2，20 mM NaCl，50%甘油 |
活性單位定義（Unit Definition） | 在37℃，pH 8.0反應條件下，2.625 mL反應體系中，在30 min內使△A260吸收值變化1.0（相當于*消化37 μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸）所用的酶量定義為一個活性單位（U）。 |
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃保存，有效期1年。若是打開包裝后并4℃放置超過一周，建議過濾除菌防止微生物污染。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
推薦使用條件
條件參數 | 最///佳條件 | 有效條件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
溫度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巰基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
單價陽離子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根離子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
推薦使用量及處理時間
UltraNuclease用量（終濃度） | 處理時間 |
0.25 U/mL | > 1 h |
2.5 U/mL | 15 min |
25 U/mL | 2 min |
使用方法
樣本準備
貼壁細胞：去除培養基，用PBS清洗細胞，去除上清。
懸浮細胞：離心收集細胞，用PBS清洗細胞，6,000 rpm 離心10 min，收集沉淀。
大腸桿菌：離心收集菌體，用PBS清洗1次，8,000 rpm 離心5 min，收集沉淀。
2、樣品處理
將收集到的細胞沉淀按照質量（g）與體積（mL）比1：(10~20) 的比例進行裂解處理，也可通過在冰上或室溫通過機械或化學方法裂解細胞（1 g細胞約為109個）。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g細胞沉淀的比例添加UltraNuclease，也可以跟據上表中的推薦使用量自行選定添加方案，在一定范圍內增加酶量，消化所需時間相應減少。
4、上清獲取
以12,000 rpm的轉速離心30min獲得細胞裂解液上清，再進行后續相關實驗。
【注】若溶液為高鹽溶液，偏酸性或者偏堿性，含有較高濃度的去垢劑、變性劑，應適當增加酶的用量或延長孵育時間。
相關產品
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU |
20156ES50 | 50 KU | |
20156ES60 | 100 KU | |
UCF·METM UltraNuclease（Endotoxin-free）全能核酸酶 | 20125ES25 | 25 KU |
20125ES50 | 50 KU | |
20125ES60 | 100 KU |
HB210326
