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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 50108ES60 | 應用領域 | 生物產業,制藥/生物制藥 |
產品介紹
過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒
產品描述
過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒Catalase Assay Kit是一種簡單快速、可通過測試吸光度來檢測動物血清、血漿、組織以及全血、紅細胞、培養細胞、培養液中的過氧化氫酶（CAT）的活力。過氧化氫酶（CAT）催化H2O2分解為水和氧氣，當加入鉬酸銨后，反應迅速終止，剩余的H2O2與試劑盒中的鉬酸銨發生絡合反應，得到淡黃色的產物。這個黃色產物的最大吸收波長是405 nm 。所以，可以通過檢測405 nm處的吸光度，來測定樣品中的過氧化氫酶（CAT）的活力。
羥基自由基（OH-）是很活潑的活性氧，它能與細胞內的許多有機物、核酸、有機酸等等發生氧化反應，破壞性強。過氧化氫酶（CAT）廣泛分布在血清、血漿、紅細胞等中，能分解活性氧，保護細胞免受破壞，因而測定過氧化氫酶（CAT）的活力至關重要。
產品組分
產品編號 | 產品組分 | 產品規格 |
50108-A | 試劑一 | 100 mL |
50108-B | 試劑二 | 10 mL |
50108-C | 試劑三 | 7 g |
50108-D | 試劑四 | 10 mL |
運輸與保存
冰袋運輸；2℃～8℃避光保存即可；保質期6個月。
注意事項
1）加入試劑一和試劑二之前，要進行37 ℃預熱；
2）試劑三溶解、保存后，使用前有沉淀，直接取上清即可，不影響實驗結果；
3）當天冷時試劑四會凝固，使用前37 ℃水浴加熱至透明即可；
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5）本產品僅作科研用途！
使用說明
1.溶解試劑三：向試劑三（顯色粉劑）中加入100 mL的雙蒸水溶解；放入2℃～8℃冰箱避光保存（如果底部有不溶的粉末沉淀，直接取上清即可，不影響實驗結果）
2.預熱：實驗之前，先將試劑盒中的試劑一和試劑二放在37 ℃水浴鍋中預熱10～20 min，以備后用；
3.加樣品，檢測吸光度：
A.血清、血漿樣本吸光度檢測：
血清、血漿樣本 | ||
實驗組 | 對照組 | |
試劑一（37 ℃預熱） | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑二（37 ℃預熱） | 0.1 mL | 0.1 mL |
血清/血漿 | 0.1 mL | |
混勻后，在37 ℃中準確加熱1min（注意：一定要準確加熱反應1min），然后加試劑三和試劑四； | ||
試劑三 | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑四 | 0.1 mL | 0.1 mL |
血清/血漿 | 0.1 mL | |
混勻，在光徑為0.5 cm，波長為405 nm處，雙蒸水調零，檢測吸光度。 | ||
B.全血、紅細胞樣本吸光度檢測：
1) 1：99溶血液配置：向50 μL全血或紅細胞樣本中加雙蒸水至5mL，混勻，放置10 min，待測；
2) 檢測吸光度：
全血、紅細胞樣本 | |||
實驗組 | 空白對照組 | 自身對照組 | |
蒸餾水 | 0.05 mL | 2.1 mL | |
1：99溶血液 | 0.05 mL | 0.05 mL | |
試劑一（37 ℃預熱） | 1.0 mL | 1.0 mL | |
試劑二（37 ℃預熱） | 0.1 mL | 0.1 mL | |
混勻后，在37 ℃中準確加熱1min（注意：一定要準確加熱反應1min），然后加試劑三； | |||
試劑三 | 1.0 mL | 1.0 mL | |
混勻，在光徑為0.5 cm，波長為405 nm處，雙蒸水調零，檢測吸光度。 | |||
C.組織樣本吸光度檢測：
1) 組織勻漿液制備：按組織重量（g）：生理鹽水體積（mL）=1:9的比例，在冰水浴條件下，制備成10%的組織勻漿，2500r/min離心10 min，取上清；再用生理鹽水稀釋到最佳取樣濃度，一般稀釋成：5%、2%、1%、0.5%、0.25%、0.1%等不同的取樣濃度，其中小鼠肝臟勻漿取樣濃度為0.25%～1%。
2) 檢測吸光度：
組織樣本 | ||
實驗組 | 對照組 | |
試劑一（37 ℃預熱） | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑二（37 ℃預熱） | 0.1 mL | 0.1 mL |
組織勻漿 | 0.05 mL | |
混勻后，在37 ℃中準確加熱1min（注意：一定要準確加熱反應1min），然后加試劑三和試劑四； | ||
試劑三 | 1.0 mL | 1.0 mL |
試劑四 | 0.1 mL | 0.1 mL |
組織勻漿 | 0.05 mL | |
混勻，在光徑為0.5 cm，波長為405 nm處，雙蒸水調零，檢測吸光度。 | ||
4.過氧化氫酶活力計算
A.血清、血漿中過氧化氫酶（CAT）活力計算（每毫升血清或血漿每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個活力單位）
血清中過氧化氫酶活力（U/mL）=（對照組OD值－實驗組OD值）×
×樣本測試前稀釋倍數
B.血紅蛋白中過氧化氫酶（CAT）活力計算（每毫克血紅蛋白每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個活力單位）溶血液中過氧化氫酶活力（U/mgHb）=（空白對照組OD值＋自身對照組OD值－實驗組OD值）×
÷血紅蛋白含量（mgHb/mL）
C.組織勻漿中過氧化氫酶（CAT）活力計算（每毫克組織蛋白每秒鐘分解1μmol H2O2的量為一個活力單位）
組織勻漿中過氧化氫酶活力（U/mgprot）=（對照組OD值—實驗組OD值）×
÷待測樣本蛋白濃度（mgprot/mL）
HB20190802
