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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 貨號 | 20328ES50 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
SDS-PAGE Gel Preparation Kit
SDS-PAGE凝膠配制試劑盒
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 儲存 | 價格（元） |
SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 | 20328ES50 20328ES72 | 1 kit (30~50 gels) 1 kit (150~250 gels) | 4℃~25℃ 4℃~25℃ | 177.00 719.00 |
產品描述
蛋白電泳經常使用聚丙烯酰胺凝膠來實現蛋白分離，此類凝膠一般由濃縮膠和分離膠兩部分組成，前者起到將蛋白樣品進行濃縮的作用，后者則是根據凝膠所使用的丙烯酰胺單體和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交聯劑的濃度不同從而分離不同大小范圍的蛋白質。
本試劑盒提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠設備和蒸餾水即可配膠，大大簡化了制膠過程，貨號20328ES50可配制30-50塊常規大小的凝膠，20328ES72可配制150~250塊常規大小的膠。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | 產品編號/規格 | 保存方式 |
20328ES50（30~50 gels） | 20328ES72（150~250 gels） | |||
20328-A | 30%丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺，29:1 | 100 mL | 500 mL | 4℃避光 |
20328-B | 4×Tris-HCl-SDS分離膠緩沖液，pH 8.8 | 70 mL | 350 mL | 4℃ |
20328-C | 4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液，pH 6.8 | 30 mL | 90 mL | 4℃ |
20328-D | APS 過硫酸銨 | 0.5 g | 2.5 g | 4℃~25℃ |
20328-E | TEMED 四甲基二乙胺 | 0.6 mL | 2.8 mL | 4℃~25℃避光 |
運輸與保存方法
室溫運輸。4℃~25℃保存，有效期至少6個月。
注意事項
① 丙烯酰胺溶液和TEMED有毒，請適當防護。
② APS溶液不穩定，當配制成10%溶液后，分裝成-20℃凍存。盡量減少室溫存放時間，以防失效。若是發現凝膠聚合時間明顯延長，需要更換使用其它-20℃凍存或者新鮮配置的10%APS。
③ TEMED易揮發，使用后請蓋緊瓶蓋。
④ 凝膠凝聚的速度與溫度、光照、以及TEMED、APS的用量關系密切。在其他組分用量不變的前提下，可通過適當調節TEMED以及APS的用量，控制現有室溫條件下凝膠凝聚的速度。可參考附件的量進行相應的調整。
⑤ 溫度較低時，4×Tris-HCl-SDS分離膠緩沖液和4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液中的SDS可能析出。此時需水浴溫育，并在*溶解和混勻后使用。
⑥ 凝膠配制過程，特別是液體混勻步驟，需盡量避免氣泡的產生。
⑦ 在分離膠上層進行水壓時需小心操作，加水速度不宜過快。
⑧ 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1 根據目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度【參考附表1】
2 按照附表2配制相應濃度的SDS-PAGE分離膠，制膠程序如下：
2.1 將不同體積的30% Acr-Bis(29:1)、4×分離膠緩沖液和蒸餾水在試管或者小燒杯內混合；
2.2 加入10% APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免氣泡產生；
2.3 在裝好的制膠模具中灌入適量分離膠溶液，對于mini膠，分離膠液加至約距前玻璃板頂端1.5 cm或距梳齒約0.5 cm即可。然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-5cm的水層，從而壓平凝膠表面；
2.4 靜置30-60 min，待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面，表面凝膠已聚合；
3 按照附表3配制SDS-PAGE濃縮膠，制膠程序如下：
3.1 去除覆蓋在分離膠上的水層。
3.2 將不同體積的30% Acr-Bis(29:1)、4×濃縮膠緩沖液和蒸餾水在試管或者小燒杯內混合；
3.3 加入10% APS和TEMED，輕輕攪拌使其混勻，避免產生氣泡。
3.4 將濃縮膠溶液加至分離膠的上面，直至凝膠溶液到達前玻璃板的頂端。
3.5 將梳子插入凝膠內，避免產生氣泡。
3.6 靜置10-20 min，等待濃縮膠聚合。
3.7 待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。
3.8 可用電泳緩沖液吹走孔內殘留的一些膠液【可選】，然后進行上樣和后續的常規電泳操作。
附表1. 不同濃度SDS-PAGE分離膠的///佳分離范圍
SDS-PAGE分離膠濃度 | ///佳分離范圍 |
6%凝膠 | 50-150 KD |
8%凝膠 | 30-90 KD |
10%凝膠 | 20-80 KD |
12%凝膠 | 12-60 KD |
15%凝膠 | 10-40 KD |
附表2. 不同濃度SDS-PAGE分離膠配制體系
分離膠濃度 | 凝膠體積(mL) | 所需各組分體積（單位：mL） | ||||
蒸餾水 | 30% Acr-Bis（29:1） | 4×Tris-HCl-SDS分離膠緩沖液，pH 8.8 | 10% APS | TEMED | ||
6% | 5 | 2.7 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10 | 5.4 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
15 | 8.1 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
20 | 10.8 | 4.0 | 5.0 | 0.2 | 0.016 | |
30 | 16.2 | 6.0 | 7.5 | 0.3 | 0.024 | |
50 | 27.0 | 10.0 | 12.5 | 0.5 | 0.040 | |
8% | 5 | 2.37 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10 | 4.7 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
15 | 7.1 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
20 | 9.5 | 5.3 | 5.0 | 0.2 | 0.012 | |
30 | 14.2 | 8.0 | 7.5 | 0.3 | 0.018 | |
50 | 23.7 | 13.3 | 12.5 | 0.5 | 0.030 | |
10% | 5 | 2.03 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 | 4.07 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15 | 6.1 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20 | 8.1 | 6.7 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
30 | 12.2 | 10.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
50 | 20.3 | 16.7 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
12% | 5 | 1.7 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 | 3.4 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15 | 5.1 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20 | 6.8 | 8.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
30 | 10.2 | 12.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
50 | 17.0 | 20.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
15% | 5 | 1.2 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 | 2.4 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15 | 3.6 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20 | 4.8 | 10.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
30 | 7.2 | 15.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
50 | 12.0 | 25.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
附表3. 5% SDS-PAGE濃縮膠配制體系
凝膠體積（mL） | 所需各組分體積（單位：mL） | ||||
蒸餾水 | 30% Acr-Bis（29:1） | 4×Tris-HCl-SDS濃縮膠緩沖液，pH 6.8 | 10% APS | TEMED | |
2 | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4 | 2.28 | 0.68 | 1.0 | 0.04 | 0.004 |
6 | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8 | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.008 |
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HB200514
