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細胞轉染技術是一種將外源DNA或RNA導入目標細胞的過程,它在生命科學領域扮演著至關重要的角色。這一技術不僅促進了基因表達研究、基因功能分析、信號傳導研究等領域的發展,而且在基因治療、疫苗開發和藥物篩選等方面展現出廣泛的應用前景。具體來說,細胞轉染技術的應用包括:
基因功能研究
基因敲除和沉默
腫瘤研究
疫苗生產
基因治療
藥物篩選
此外,細胞轉染技術還涉及到miRNA和mRNA的研究與應用。miRNA通過調節特定基因的表達,在細胞周期調控、細胞分化、免疫應答、發育調節等過程中發揮作用,異常的miRNA表達與多種疾病的發生發展相關。而mRNA轉染作用則是指將體外合成的mRNA導入到細胞內,利用細胞內的翻譯系統將mRNA翻譯成目標蛋白質,這種技術在mRNA疫苗研發和mRNA藥物生產中具有重要應用。
圖1.細胞轉染示意圖[1]
293細胞系,以其轉染效率和穩定的外源基因表達特性,在生物醫學研究領域占據核心地位。這些細胞系源自人類胚胎腎臟細胞,通過腺病毒DNA片段轉化而得到,實現了細胞的永生化。它們不僅在病毒載體的制備中發揮關鍵作用,尤其是在腺相關病毒、慢病毒的及重組蛋白的高效表達方面顯示出巨大潛力。廣泛應用于基因治療、疫苗開發、藥物生產以及結構生物學研究等多個領域,成為現代生物技術 的工具。
到目前為止,根據不同的研究與生產需求,已經人為地建立了許多HEK293細胞的亞型和衍生細胞系,主要有293T、293H、293F和293S四大分支。
圖2.HEK293細胞及其衍生細胞系起源[2]
293細胞系具有以下顯著特點:
高轉染效率:293細胞系對外源DNA具有較高的攝取率,這歸因于它們能夠表達某些促進DNA進入細胞的病毒基因。
易于培養及擴增:293細胞生長迅速且相對容易維護,這對于需要快速且可靠結果的實驗是有益的。
適應性強:293細胞可以在多種條件下生長,包括貼壁或懸浮培養,這使得它們適合大規模蛋白質生產。
人源細胞系:作為人源細胞系,它們為人類生物學提供了更相關的生物學背景,這在治療研究中尤其重要,因為人源細胞的反應可以預測體內結果。
多功能性:它們能夠產生具有復雜翻譯后修飾的蛋白質,這一特征對于許多蛋白質(尤其是治療性抗體)的功能至關重要。
此外,293細胞系的多功能性延伸至復雜蛋白質的生產,包括單克隆抗體、生物仿制藥及細胞與基因治療藥物,用于治療癌癥、自身免疫性疾病和其他疾病。它們精確折疊和修飾蛋白質的能力使它們成為重組蛋白質生產行業的shou選。因此,293細胞系不僅在基礎科研中發揮著重要作用,而且在生物醫藥產業中也扮演著關鍵角色,特別是在疫苗、蛋白質生產及病毒包裝中的作用不可忽視。
Hieff Trans® 293 Transfection Reagent 是一款專為293細胞系設計的高效轉染試劑,它不僅適用于HEK(人胚腎)293貼壁細胞的瞬時轉染,還兼容293F、Expi293F等多種293懸浮細胞系高密度轉染。此外,Hieff Trans®293 Transfection Reagent 的高效性體現在其能夠顯著提升293F細胞中的蛋白表達水平,以及病毒包裝產量,這對于需要大量重組蛋白的生產和病毒包裝研究至關重要。
應用場景
抗體及重組蛋白表達
慢病毒LV及腺相關病毒AAV等病毒包裝
產品特征
適用于貼壁及懸浮293細胞系高密度生產
廣泛用于蛋白表達及病毒包裝
案例展示
在懸浮293F細胞中,轉染GFP質粒,質粒DNA:轉染試劑=1:2;結果顯示Hieff Trans® 293 Transfection Reagent 293專用轉染試劑在懸浮293F細胞上有很高轉染效率。
圖3.懸浮293F細胞轉染效果圖
產品信息
產品名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Hieff Trans®293 Transfection Reagent 293細胞專用轉染試劑 | 1 mL /10 mL /100mL | 40818ES03/10/60 |
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Hieff Trans® Ultra PEI-AAV Transfection Reagent-GMP轉染試劑 | 10 mL /100mL/1L | 40824ES10/60/80 |
參考文獻:
[1] Guo X, Ma Y, Wang H, Yin H, Shi X, Chen Y, Gao G, Sun L, Wang J, Wang Y, Fan D. Status and developmental trends in recombinant collagen preparation technology. Regen Biomater. 2023 Nov 29;11:rbad106. doi: 10.1093/rb/rbad106. PMID: 38173768; PMCID: PMC10761200.
[2] Lin YC, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. Nat Commun. 2014;5:4767. Published 2014 Sep 3. doi:10.1038/ncomms5767