国产一级a毛一级a看免费视频,久久久久久国产一级AV片,免费一级做a爰片久久毛片潮,国产精品女人精品久久久天天,99久久久无码国产精品免费了

上海北諾生物科技有限公司

中級會員·14年

聯(lián)系電話

15800960770

您現(xiàn)在的位置： 首頁> 技術文章 > ELISPOT技術原理和技術特點
中級會員·14年
聯(lián)系人：
周經(jīng)理 劉經(jīng)理
電話：
021-57730393
手機：
15800960770
傳真：
86-021-61496710
地址：
上海市徐匯區(qū)宜山路520號中華門大廈18樓D座
個性化：
www.bnbiotech.com
網(wǎng)址：
www.bnbiotech.com

掃一掃訪問手機商鋪

ELISPOT技術原理和技術特點

2013-6-30　　閱讀(1641)

分享：

ELISPOT全名為酶聯(lián)免疫斑點檢測，英文：Enzyme-linked Immunospot Assay。它結合了細胞培養(yǎng)技術與酶聯(lián)免疫吸附技術（即ELISA技術），能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。其技術原理，一句話概括就是：用抗體捕獲培養(yǎng)中的細胞分泌的細胞因子，并以酶聯(lián)斑點顯色的方式將其表現(xiàn)出來（Sedgwick JD 2005）。

該技術檢測細胞因子具有三大優(yōu)點：其一，靈敏度高。在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。這是目前為止，zui為靈敏的檢測技術，靈敏度比傳統(tǒng)的的ELISA方法高2-3個數(shù)量級。其二，單細胞水平，活細胞功能檢測。ELISPOT檢測的是單個細胞分泌，而非細胞群體的平均分泌。在檢測的過程中，有活細胞培養(yǎng)與抗原刺激階段，檢測的是活細胞的功能，而非死細胞的物。其三，操作簡便經(jīng)濟，可以進行高筒量篩選。ELISPOT沒有復雜的細胞體外擴增過程，不使用同位素，不需要大型的、專門的實驗儀器設備。按照標準化的實驗操作，一個實驗者可以同時處理數(shù)百個樣品，效率遠遠高于其它檢測方法（Kalyuzhny AE 2005）。

實驗設計在96孔培養(yǎng)板上進行，直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質，包被上特異性的單克隆抗體，用以捕獲細胞分泌的細胞因子。（由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程，對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體，該抗體需要無毒，不含內毒素，親和力高等特點。）之后，在培養(yǎng)板的孔內加入細胞培養(yǎng)基（現(xiàn)在無血清ELISPOT技術已經(jīng)成熟，培養(yǎng)基中可以不再含有血清）、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。

在特異性的抗原或者非特異性的有絲分裂原的刺激下，數(shù)小時之內，T細胞就會開始分泌各種細胞因子。細胞因子當即就被位于細胞下方的膜上的單克隆抗體所捕獲。在洗去細胞之后，被捕獲的細胞因子可以與生物素標記的第二抗體結合，然后用酶標親和素再與生物素結合，進行化學酶聯(lián)顯色，就可以在膜的局部形成一個個圓形的斑點。每一個斑點就對應了當初一個分泌細胞因子的細胞，這些細胞被稱為斑點形成細胞（Spots forming cells SFCs）。統(tǒng)計膜上的斑點的數(shù)目，再除以當初加入孔內的細胞總數(shù)，就可以計算出陽性細胞的頻率。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏！
標簽：
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用：

提示

X
您的留言已提交成功！我們將在第一時間回復您~
產(chǎn)品對比 二維碼 在線交流

掃一掃訪問手機商鋪

對比框

在線留言
主站蜘蛛池模板： 屏山县| 淮滨县| 灌南县| 石渠县| 嘉祥县| 突泉县| 绵竹市| 新巴尔虎左旗| 搜索| 黑河市| 南乐县| 漠河县| 礼泉县| 宣城市| 兴城市| 平昌县| 明水县| 会东县| 陇川县| 清河县| 昭通市| 宜兰县| 垦利县| 逊克县| 额尔古纳市| 茶陵县| 肥城市| 盐源县| 克什克腾旗| 志丹县| 雅江县| 略阳县| 西藏| 永清县| 桃园县| 桃江县| 慈溪市| 喀什市| 兴山县| 沙坪坝区| 松滋市|