規格:50ml/100ml，價格：140/245元，產品簡介

ECL化學發光試劑盒用于Western blot的化學發光檢測，比DAB顯色的靈敏度至少高50倍，可達ng水平。原理是采用新型發光底物（Luminol），可與二抗上耦連的辣根過氧化物酶發生化學反應，發出熒光，從而可以通過用X光片壓片或其它適當熒光成像設備檢測樣品。在電泳的過程中，將復雜的蛋白混合物經SDS-PAGE分離，并轉移到固相膜上（如PVDF、NC）等，經辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗與膜上的蛋白直接反應。當加入ECL化學發光試劑后，Luminol發生氧化降解，并發射波長為428nm的光，此光可經X光片（放射自顯影片）感光記錄下來。

試劑盒組份

存儲溫度

A液 （避光） 25 mL      50mL 4℃

B 液 25 mL 50mL 4℃

試劑盒以外自備儀器和試劑

鑷子，1.5ml離心管，X光片，暗盒，顯影液，定影液、去離子水

操作步驟

1、 按照常規的Western實驗步驟進行操作到二抗孵育和洗滌后的膜待用。2、 ECL工作液的配制：        取1.5ml的eppendorf管，加入500μL A液和500μL B 液，混勻后即為ECL工作液（配制后請盡快使用）。3、 用平頭鑷將膜取出，用吸水紙略吸去過多的液體(切勿接觸膜的蛋白面)，然后置于一潔凈保鮮膜上。4、 根據膜的大小，按每10平方厘米膜加1ml ECL工作液的比例，滴加ECL工作液到膜上，確保使工作液均勻覆蓋在膜上，放置1-2分鐘。         5、取膜，棄ECL工作液，用吸水紙略吸去過多的液體。將膜放在兩片保鮮膜中間，小心趕盡氣泡。          6、將膜固定于片夾內。暗室內壓片1分鐘，立即顯影定影，根據結果再調整壓片時間。或直接分別壓片30秒，1，3，5分鐘，然后一起顯影定影觀察結果。

保存條件

4℃避光保存，一年有效。

注意事項

1、 A液和B液在吸取過程中必須要更換槍頭，A液和B液相互污染后會導致A液或B液逐漸失效，影響后續的使用效果。2、 各溶液使用后，請蓋緊瓶蓋，以防失效。特別是B液，含有氧化劑，比較容易被還原而失效。3、 A液和B液均對人體有害，操作時請注意適當防護。4、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。