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ELISA標本處理不當直接影響實驗操作2023/06/21
一、標本的影響溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性??赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以wan全洗脫,它可使H2O2釋放出原生態氧(O),從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質,即顯藍色,產生假陽性。所以嚴重溶血標本禁用。二、標本受細菌污染因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。三、標本保存不當在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導
小鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說明書2023/06/14
小鼠活性氧(ROS)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T20IU/ml-500IU/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中活性氧(ROS)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠活性氧(ROS)水平。用純化的小鼠活性氧(ROS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活性氧(ROS),再與HRP標記的活性氧(ROS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過CHE底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉
白細胞介素種類及功能介紹2023/06/07
白細胞介素(interleukins,ILs),簡稱白介素,最初是指由白細胞產生并在白細胞之間起調節作用的細胞因子,均為小分子多肽或糖蛋白類物質。1979年,第二屆國際淋巴因子專題會議將免疫應答過程中白細胞間相互作用的細胞因子統一命名為白細胞介素,并規定其命名規則。目前至少發現了38個白細胞介素,常用的為IL-2,IL-4,IL-6,IL-12等,它們具有廣泛的生物學活性,在介導細胞免疫、抵抗微生物感染和抗腫瘤方面起著重要的作用。白介素-1(IL-1)有兩種存在形式,即IL-1α和IL-1β,結
酶聯免疫測定技術(ELISA)的放大系統2023/05/31
酶免疫測定自20世紀70年代初創立以來,由于其具有特異、靈敏、簡便、快速的特點,現已在生物醫學研究領域及臨床疾病的診療中得到了廣泛的應用,相對于放射免疫測定(RIA)技術來說,EIA還有試劑半衰期長,對環境污染小,試驗廢物易于處理等優點,但測定敏感性一般較RIA低,于是,為提高EIA的測定敏感性,出現了眾多的EIA測定放大系統,使EIA的測定敏感性趕上甚或超過了RIA。建立正IA測定放大系統的一般原則EIA本身是以酶[辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)等]作標記物的,因此,EIA的測定
兔谷丙轉氨酶(ALT)elisa試劑盒使用說明書2023/05/24
兔谷丙轉氨酶(ALT)elisa試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:48T1U/L-32U/L使用目的:本試劑盒用于測定兔血清,血漿及相關液體樣本中谷丙轉氨酶(ALT)活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中兔谷丙轉氨酶(ALT)水平。用純化的兔谷丙轉氨酶(ALT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入谷丙轉氨酶(ALT),再與HRP標記的谷丙轉氨酶(ALT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒使用說明書2023/05/17
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.5ng/L-65ng/L使用目的:本試劑盒用于測定土壤樣本中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平。用純化的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入NAG,再與HRP標記的NAG抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作
分析影響ELISA中非特異性顯色的原因2023/05/10
影響ELISA中非特異性顯色的原因很多,如試劑盒特異性、檢驗標本中含酶標記物的干擾物,操作過程中的問題。本文就這一原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗結果。試劑盒特異性因素1.固相載體的選擇。ELISA中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板最為常見[1]。它具有良好的吸附性能,孔底透明度高,空白值低,各板之間、同一板各孔之間性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于原料的不同和制作工藝的差別,各產品的質量
怎樣斷定ELISA實驗的結果是否準確?2023/05/06
ELISA實驗已經做完,做出來的數據是否準確,有沒有達到自己的預期,這些都是有很多條件決定的,具體有哪些條件呢,今天就讓上海勁馬與您一起分享一下。首先要選擇優質的試劑優質的試劑是良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各優質的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國內醫學檢驗一般均用板式點。本
猴降鈣素原(PCT)elisa試劑盒使用說明書2023/04/27
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T8ng/L-450ng/L使用目的:本試劑盒用于測定猴血清、血漿及相關液體樣本中降鈣素原(PCT)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中猴降鈣素原(PCT)水平。用純化的猴降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入降鈣素原(PCT),再與HRP標記的降鈣素原(PCT)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的
ELISA試劑盒實驗前如何做好優化?2023/04/20
ELISA試劑盒包被條件的優化:1、包被液的挑選:一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,假定包被的抗原在堿性條件下不穩定的話,也能夠運用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。2、包被濃度的挑選:包被的最適濃度隨固相載體和包被物的性質改動,一般蛋白質的包被濃度為1-5ug/ml,要清楚關于特定包被抗原的最適包被濃度需求通過實驗來斷定。3、包被溫度的挑選:一般是4-8度條件下放置一個黑夜或許37度保溫2小時,咱們激烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的堅持。4、包被抗原的挑選:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分
ELISA常用檢測方法優劣勢對比2023/04/12
我們知道,Elisa可分為多種類型測定,是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。我公司技術部將各種Elisa常用方法的優勢劣勢進行對比,結果如下:一、直接法(directElisa)將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。1.優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。2.劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。二、間接法(indirectElisa)此測定方法與直接法類似,
植物黃酮醇合成酶(FLS)ELISA試劑盒使用說明書2023/04/06
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T6U/L-200U/L使用目的:本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關樣本中黃酮醇合成酶(FLS)活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物黃酮醇合成酶(FLS)水平。用純化的植物黃酮醇合成酶(FLS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入植物黃酮醇合成酶(FLS),再與HRP標記的黃酮醇合成酶(FLS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用
ELISA檢測結果準確可靠的必要條件2023/03/29
1.標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、xue塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本
小鼠ELISA試劑盒樣本取血操作步驟及注意事項2023/03/23
大鼠、小鼠ELISA試劑盒檢測中,經常有客戶采用鼠類的血清,血漿做檢測樣本,但是收集樣本復雜,本章小編就根據大鼠,小鼠ELISA試劑盒樣本取血及注意事項。以小鼠為例:1剪尾采血小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數分鐘,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用試管接流出的血液,同時自尾根部向尾尖anmo。取血后用棉球壓迫止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。2摘除眼球采
小鼠狂犬病毒糖蛋白IgG抗體(RVG-IgG)ELISA試劑盒說明書2023/03/15
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T3ng/L-180ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中狂犬病毒糖蛋白IgG抗體(RVG-IgG)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中小鼠狂犬病毒糖蛋白IgG抗體(RVG-IgG)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入狂犬病毒糖蛋白IgG抗體(RVG-IgG),再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在
ELISA試劑盒實踐過程技巧2023/03/08
操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。1.正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。2.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孑L內滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,造
關于ELISA試劑盒的實驗操作,這些細節很重要2023/03/01
人ELISA試劑盒實驗操作中,須特別注意細節問題,細節往往決定著試驗的成功與否。關于ELISA試劑盒的實驗操作,這些細節很重要:1、吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。2、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。4、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。6、未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工
小技巧改變ELISA試劑盒實驗誤差大問題2023/02/22
一般來說,ELISA操作技術員會在全部準備就緒后開端試驗,而在試驗進程其時卻常會呈現一些問題。因為ELISA試驗操作過程雜亂,或許一個小小的差錯就會呈現大問題,那么咱們要怎么處理并完善試驗過程的差錯問題呢?今天帶給您的資訊主題是:小技巧改動ELISA試劑盒試驗差錯大問題。①因為滴瓶的精密性必定不如加樣器,不掃除不同滴頭滴量的差錯。另外滴加進程中是否產生氣泡、速度是否均勻,是否顫抖等影響液量的要素均可導致以上狀況。高標準要求時應運用加樣器。②值鄰近實踐上是個灰區,不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均
關于ELISA樣本值低于空白值的問題2023/02/08
在ELISA實驗中,樣本值低于空白值是一個經常性的問題。當樣本值較低接近試劑盒的靈敏度就容易發生樣本值低于空白值的現象,特別是在血清和血漿樣本的檢測。究其原因,主要在于兩個方面,一方面是誤差,另一方面是基質效應。下文逐個分析不同影響因素的原理、和解決方案。一、誤差Error誤差分為三類,系統誤差、隨機誤差和過失誤差。這三類誤差中,系統誤差對樣本值和空白值之間的差異無影響。ELISA樣本值低于空白值在誤差方面主要來源于隨機誤差和過失誤差。1、隨機誤差RandomError無法控制的變因,使測量值產
人去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)ELISA試劑盒使用說明書2023/02/01
本試劑盒僅供研究使用。使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)水平。用純化的人去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2),再與HRP標記的去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過CHE底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,
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